Het doel van dit protocol is bedoeld als een dierlijk model van cochleaire implantatie, die kan worden gebruikt om aan te pakken van een veelheid van onderzoeksvragen. Mogelijke toepassingen zijn onder andere de evaluatie van farmaceutische interventies of elektrische stimulatie voor gunstige effecten op de hoorzitting drempels of elektrode impedances.
Cochleaire implantaten zijn zeer efficiënte apparaten die horen bij personen met diepe gehoorverlies kunnen herstellen. Als gevolg van verbeterde toespraak perceptie resultaten, zijn kandidatuur criteria uitgebreid in de afgelopen decennia. Het gaat hierbij om patiënten met substantiële resterende hoorzitting die profiteren van elektrische en akoestische stimulatie van dezelfde oor, waardoor het behoud van de hoorzitting tijdens cochleaire implantatie een belangrijke kwestie. Impedances van de elektrode en de verwante kwestie van het energieverbruik is een andere belangrijke onderzoeksterrein, vooruitgang op dit gebied kan effenen voor volledig implanteerbare auditieve prothesen. Om deze kwesties op een systematische manier, zijn voldoende diermodellen van essentieel belang. Daarom is het doel van dit protocol te verstrekken een dierlijk model van cochleaire implantatie, die kan worden gebruikt om verschillende onderzoeksvragen. Als gevolg van de grote tympanic bulla, waarmee eenvoudige chirurgische toegang tot het binnenoor, evenals haar gehoor bereik die relatief vergelijkbaar met het bereik van de hoorzitting van de mens is, is de cavia een veelgebruikte soorten auditieve onderzoek. Cochleaire implantatie in de cavia wordt uitgevoerd via een retroauricular benadering. Via de bullostomy een cochleostomy is geboord en de elektrode cochleair implantaat wordt ingevoegd in de scala pauken. Deze elektrode kan vervolgens worden gebruikt voor elektrische stimulatie, bepaling van de impedances van de elektrode en de meting van samengestelde actie potentieel van de gehoorzenuw. Naast deze toepassingen kunnen cochleair implantaat elektroden ook worden gebruikt als drug delivery apparaten, als een actuele levering van farmaceutische agenten aan de cellen of vloeistoffen van het binnenoor is bedoeld.
Meer dan 500 miljoen mensen wereldwijd lijden aan gehoorverlies. 1 Impaired hoorzitting is gekoppeld aan een hoger tarief van depressie, lagere eigenwaarde en lagere gevoelens van eigenwaarde, die alle tot verminderde kwaliteit van leven leiden. 2 terwijl gehoorapparaten een adequate manier zijn te herstellen van sensorische functie in geval van matig gehoorverlies, de meest effectieve behandeling modaliteit voor patiënten die lijden aan diepgaande gehoorverlies is het cochleair implantaat (CI). Vanwege de uitstekende resultaten met betrekking tot Spraakperceptie, kandidatuur criteria voor cochleaire implantatie nu ook omvattens patiënten hebben substantiële resterende horen in de lagefrequentie-regio, maar profiteren niet van gehoorapparaten. 3 omdat deze patiënten kunnen gebruik gecombineerd elektrische en akoestische stimulatie in de geïmplanteerde oor, behoud van de hoorzitting is uitgegroeid tot een groot probleem voor CI chirurgen. Tijdens cochleaire implantatie, wordt een elektrodenserie ingevoegd in de pauken van de scala van het slakkenhuis, waar het elektrisch de gehoorzenuw stimuleert. 4 de elektrode inbrengen trauma vormt een gevaar voor de resterende hoorzitting en induceert fibrose, die impedances van de elektrode en het batterijverbruik van het implantaat verhoogt. Modellen om te studeren van farmaceutische interventies die verminderen kunnen het verlies van het gehoor en fibrose veroorzaakt door het inbrengen van de elektrode zijn dus essentieel.
De cavia is een geschikt en handige diermodel voor CIs, vanwege het gemakkelijker en meer reproduceerbare chirurgische toegang tot het binnenoor in vergelijking met gerbils, ratten of muizen. 5 , 6 , 7 , 8 voorts het bereik van de hoorzitting van deze soort is relatief vergelijkbaar met menselijke gehoor. 9 grotere soorten zoals katten of aapjes, die zijn gebruikt voor het adres specifiek onderzoeksvragen met betrekking tot DIS, niet vertegenwoordigen een redelijke keuze voor de meeste CI studies als gevolg van zowel financiële als ethische overwegingen. 10 , 11
Kortom is de cavia een betrouwbare en relatief voordelige model voor de evaluatie van de effecten van farmacologische interventies in het kader van cochleaire implantatie.
Het gepresenteerde protocol wordt beschreven hoe u cochleaire implantatie in het model van de cavia. Dit protocol kan worden gebruikt om te evalueren van de verschillende interventies voor hun effecten op de resterende hoorzitting en vreemd lichaam reactie op de CI-elektrode. Verschillende voorzorgsmaatregelen moeten worden genomen om het bereiken van een hoge reproduceerbaarheid en de nauwkeurigheid van de experimenten.
Basislijn hoorzitting drempels van alle cavia’s moeten worden gemeten aan de preoperatively met behulp van bijvoorbeeld auditieve brainstem reacties. Sommige van de verkrijgbare cavia’s vertonen een relevante gehoorverlies en moeten daarom niet worden opgenomen in de experimentele cohort. Afhankelijk van de lengte van de operatie en het protocol die bij deze evaluatie kan worden uitgevoerd hetzij onmiddellijk vóór de operatie of een paar dagen voor cochleaire implantatie, geven de dieren voldoende tijd om te herstellen van de verdoving.
Bij het uitvoeren van de operatie onder narcose in een spontaan ademhaling dier, snelheid is belangrijk. Zorgvuldige voorbereiding voor de operatie is daarom essentieel, zoals de keuze van het protocol van de verdoving. Het gebruik van ketamine, medetomidine, midazolam en fentanyl in combinatie met plaatselijke verdoving resulteert in een voldoende verdoving en Analgesie, terwijl tegelijkertijd het dier blijft ademen spontaan. Vergeleken met de vaak beschreven gebruik van ketamine en xylazine, resulteert dit regime in betere analgesie en verminderde perioperatieve morbiditeit en mortaliteit. Het is belangrijk dat alle instrumenten en medicijnen (met inbegrip van een booster van de verdoving) beschikbaar is alvorens het dier om te slapen.
Als gevolg van de wijzigingen van de positie van de dieren tijdens de operatie (veranderen van liggend naar zijwaartse positie en rug), bestaat het gevaar voor aspiratie van de maag inhoud in naar de longen. Om deze reden bevat het protocol ook de toepassing van een maag-buis, dat een snelle en gemakkelijke manier is te beschermen het dier tegen aspiratie en verminderen de perioperatieve sterfte.
Als u wilt behouden steriliteit tijdens de re-positionering, de gebieden waar het dier is aangeraakt moeten worden gedekt door steriele gordijnen, handschoenen moet daarna worden gewijzigd of re-positionering moet gebeuren door enig ander persoon die niet steriel.
O2-verzadiging controle is ook van het allergrootste belang tijdens de operatie. De positionering van het hoofd voor de visualisatie van de Kaap en ronde venster niche een obstructie van de luchtwegen, die gemakkelijk kan worden behandeld wanneer geïdentificeerd vroeg genoeg kan veroorzaken.
Gewoonlijk verliezen de dieren een grote hoeveelheid lichaamsvloeistoffen (zoals bloed, extra-cellulaire vloeistof, urine) tijdens de operatie. Dus, het protocol van de vloeistof vervanging geïntroduceerd in dit manuscript vertegenwoordigt een goed verdragen methode te stabiliseren de hemodynamica van de dieren en ondersteunt hun snel herstel van de verdoving.
Om te voorkomen fouten bij het uitvoeren van metingen van de audiometrical, is het aanbevolen om dezelfde pincode van de connector verbinden aan een specifieke elektrode tijdens elke operatie.
Een beperking van deze methode is de relatief hoge variabiliteit in postoperatieve hoorzitting drempel ploegen, die vaak niet goed met de surgeon’s perceptie correleren. Hoewel deze variabiliteit in resultaten lijkt op de situatie in menselijke CI ontvangers met residuele hoorzitting, is het niet helemaal begrepen wat de oorzaken van de variabele resultaten zijn. 16 , 17 , 18 In het algemeen, de variabiliteit vermindert met de tijd en de ervaring van de chirurg. Het is belangrijk om te voorkomen dat buitensporige krachten bij het invoegen van de elektrode, die kan worden bereikt door een langzame invoeging snelheid. Omdat de zorgvuldige invoeging van een CI-elektrode resulteren kan in slechts zeer beperkte gehoorverlies, het voorgestelde protocol beschrijft een herhaalde invoeging van de elektrode, waardoor een hoger en voorspelbaarder gehoorverlies. Dit verlies van het gehoor is het meest uitgesproken in de hoge frequentie-gebied, tussen 16 en 32 kHz. Het trauma van de intracochlear hangt af van de diepte van de invoegpositie, de morfologie van het slakkenhuis en de aanpak (cochleostomy versus ronde venster plaatsingskosten) moeten in aanmerking worden genomen. Inbrengen van de CI-elektrode via het ronde venster membraan, meestal uitgevoerd in menselijke hoorzitting behoud cochleaire implantatie, is ook gebruikt in het model van de cavia. 19 want het ronde venster membraan is verborgen in de cavia en elektrode inbrengen via het ronde venster membraan resultaten in een ongunstige invoeging hoek, boren van een cochleostomy leidt tot meer voorspelbare hoorzitting drempel verschuivingen. Dit protocol stelt het gebruik van een scalpel in plaats van een boor voor de opening van de tympanic ‘ bulla ‘, omdat dit tot een verminderde ruis blootstelling van het oor leidt te worden geïmplanteerd. Een histologische evaluatie van de oren van de inner aanpakken van de vreemd lichaam reactie op de elektrode, het bedrag van de haarcellen en spiraal peesknoopcellen evenals trauma aan structuren zoals de lamina werden spiraal en elektrode translocatie tarieven moeten worden uitgevoerd geïmplanteerd in alle oren, zoals deze resultaten vergemakkelijken beter inzicht in de functionele resultaten gemeten. 12 , 20
The authors have nothing to disclose.
De auteurs willen Sandra Peiritsch bedanken voor de verzorging van de dieren en de Noelani Peet voor medische schrijven. De financiële steun van de Oostenrijkse wetenschap Fonds (FWF subsidie P 24260-B19) en MED-EL Oostenrijk wordt dankbaar erkend.
Scale | |||
Oxygen insufflator | |||
Shaver | |||
Sucker | |||
Povidone Iodine Solution | |||
Alcohol | |||
Laryngoscope | |||
Stomach tube | Fr 06, Lg 80 cm | ||
Surgical binocular microscope | |||
Drill | |||
0.5 mm diamond burr | |||
1 mm diamond burr | |||
Heating plate | |||
Pulse oximeter | |||
Tissue glue | |||
Dental cement powder | |||
Fluid for dental cement powder | |||
Bipolar cautery | |||
Gauze compress | |||
Cotton bud | |||
Cement mixing bowl | |||
Teflon insulated gold wire | 99.99 % gold, diameter: 0.125 mm, isolation: 0,016 mm, PTFE (Polytetrafluoroethylen) | ||
Scalpel with blade No. 10 | |||
Scalpel with blade No. 15 | |||
Scissors | |||
Mosquito forceps | |||
Dressing forceps | |||
Tissue forceps | |||
Delicate dressing forceps 2X | |||
Micro forceps | |||
Screw driver | |||
Stainless steel screws | diameter: 1 mm | ||
Retractor | |||
Needle probe | |||
Spatula | |||
Needle holder | |||
5-0 absorbable sutures | |||
Needle 23G | |||
Needle 27G | |||
Medetomidine 1 mg/mL | 0.36 mg/kg | ||
Midazolam g mg/mL | 1.2 mg/kg | ||
Fentanyl 50 µg/mL | 0.036 mg/kg | ||
Ketamine 100 mg/mL | 12 mg/kg | ||
Lidocaine (local anesthesia) | 4 mg/kg | ||
Atipamezole 5 mg/mL | 1 mg/kg | ||
Flumazenil 0.1 mg/mL | 0.1 mg/kg | ||
Enrofloxacin 100 mg/mL | 7 mg/kg | ||
Buprenorphin 0.3 mg/mL | 0.05 mg/kg | ||
Physiological Saline (at body temperature) | 12.5 mL/Kg (pre-surgery) | ||
Glucose 5 % (preoperative, at body temperature) | 12.5 mL/Kg | ||
Physiological Saline (at body temperature) | 25 mL/kg (post-surgery) |