Procedimento de instilação transuretral no rato adulto masculino
Özet
Instilação transuretral é um procedimento desafiador e não tem sido bem descrita na literatura. O objetivo deste manuscrito é descrever uma técnica transuretral inserção de um cateter para entrega intravesical de líquidos com substâncias activas para a bexiga urinária e/ou próstata em ratos machos adultos.
Abstract
Transuretral instilação pode ser usada para entregar soluções diferentes com ingredientes ativos (por exemplo, drogas, produtos químicos, bactérias e vírus) localmente em bexiga urinária para induzir a modelos animais de patologias de bexiga ou avaliar o eficácia dos tratamentos intravesicais. Mais roedores modelos de patologias inferiores do trato urinário (LUT) são induzidos em ratos fêmeas devido à facilidade de instilação intravesical das substâncias através da uretra feminina. No entanto, devido a diferenças anatômicas entre o feminino e masculino LUT, transuretral instilação em um rato masculino foi considerada um procedimento muito desafiador, e não foi previamente descrito. Neste manuscrito, nós fornecemos uma descrição detalhada de como preparar tubos de polietileno (PE) para posterior inserção na uretra de um rato masculino. Além disso, discutimos os tipos ideais de tubos de PE para ser usada dependendo do local desejado da inoculação. Além disso, descrevemos como preparar um animal para uma bem sucedida instilação transuretral evitar danos à uretra e assegurar a entrega da solução para o local desejado para o ponto por ponto. O procedimento é iniciado por retrair o prepúcio e glande para expor a abertura do meato uretral. Em seguida, a glande são agarrados pela contundente fórceps não-esmagamento para estabilizar o pênis e os tubos de PE. A tubagem de PE primeiro é inserida no meato uretral paralelo ao organismo animal e, em seguida, seu ângulo é ajustado pela inclinação do cateter para manobrá-lo para acompanhar a curvatura natural da uretra. Esta técnica pode ser usada para modelos murino induzidos de patologias de bexiga e/ou avaliar a eficácia dos tratamentos intravesical em ratos masculinos.
Introduction
A abordagem de instilação transuretral tem sido usada em estudos anteriores como um dos métodos para criar modelos de roedores de bexiga patologias1,2,3,4 e pode ser usada para avaliar a eficácia dos tratamentos entregues localmente em camundongos. Embora modelos animais totalmente não podem recapitular a patologias humanas, identificação dos mecanismos subjacentes em estudos com animais fornece um melhor entendimento dos transtornos LUT humanos tais como a síndrome de dor cistite intersticial/bexiga, neurogênica cistite, doença auto-imune e cistite inflamação prostática5.
O procedimento de instilação transuretral realizado em um rato macho adulto é tecnicamente mais difíceis de instilação intravesical em um rato adulto feminino6. Anatomia da uretra masculina junto com seu pequeno diâmetro naturalmente curvada dificultar tecnicamente realizar a inserção de um cateter transuretral. Portanto, instruções pormenorizadas para a indução transuretral de rato de infecção do trato urinário6 e LUT inflamação7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 via cateter inserido na bexiga foram descritas anteriormente para ratos fêmeas somente. Este manuscrito visa fornecer uma descrição passo a passo da técnica para transuretral instilação de substâncias nos ratos masculinos, incluindo os clipes de vídeo, imagens e ilustrações. Instilação transuretral procedimentos em um rato adulto masculino podem ser realizados com variável inocula semelhante à anteriormente descrita no rato fêmea7 e fundiu-se com técnicas adicionais tais como gravações de Eletromiografia de respostas visceromotor (VMR)16.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este manuscrito descreve detalhadamente um método de instilação transuretral no rato adulto masculino. Diferencial área de semeadura primária pode ser alcançada por meio de tubos de PE de diâmetros diferentes. PE-50 é recomendado para alcançar com êxito o lúmen da bexiga urinária, enquanto um diâmetro superior que PE-10 é usado para alcançar o AP e SV (Figura 3A-B). A escolha do tamanho do órgão-alvo para inoculação e tubo de PE, além de outros fatores, t…
Açıklamalar
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Os autores não têm qualquer reconhecimentos.
Materials
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 | BD Medical | 63019-004 | |
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 | BD Medical | 63019-048 | |
| BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath | BD Medical | 311411 | |
| Ethanol (EtOH) | Fisher Scientific | BP2818500 | |
| BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch | Becton Dickson | 205155 | |
| BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch | Becton Dickson | 305129 | |
| Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS22 | |
| Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS27 | |
| 6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone | Norton | 40204034 | |
| Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac | Surgilube | 281020543 | |
| Isoflurane | Fluriso | 13985-528-60 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SS-01 | |
| Dissecting Forceps, Curved | vwr | 82027-392 | |
| BD 1 ml Syringe | BD Medical | 309626 | |
| India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer | Alfa Aesar | J61007 | |
| 8~12 weeks old male C57B/6 Mice | Jackson Lab | #000664 |
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