Эффективной и простой метод для установления линии Т-клеток у больных с хроническим активный вирус Эпштейна - Барр инфекции и НК

Вирус Эпштейна – Барр (EBV) повсеместно и заражает не только B-клетки, но также T и природных убийца (НК) клетки, что приводит ряд связанных EBV НК/T лимфопролиферативных заболеваний (LPD) и лимфома/лейкоз, например EBV-связанные гемофагоцитный лимфогистиоцитоз, hydroa vacciniforme как лимфома, экстранодальных НК/Т-клеточной лимфомы, носовой тип и агрессивным NK клеток лейкемии^1,2,3. Среди них заболевание тяжелой хронической активных EBV (SCAEBV), который является инцидент, главным образом в Восточной Азии, и которая теперь считается LPD, вызванные клоновых расширения EBV-инфицированных T или NK клеток^{4,5,6, 7}, но без очевидной иммунодефицита присутствует в инфекционный мононуклеоз (IM)-как симптомы, включая лихорадку, гепатоспленомегалия, лимфаденопатия и дисфункции печени постоянно или периодически, а также высокой EBV-ДНК загрузки в периферической крови^8,9. У пациентов с CAEBV плохой прогноз^10,11и его патогенез и роль EBV является неясным. Таким образом, мобильных линий, полученных от связанных EBV НК/T лимфопролиферативных заболеваний и лимфом очень полезны как ячейки модели для разъяснения механизма EBV индуцированной НК или Т-клеток распространения и его отношения с высоким уровнем заболеваемости лейкемией или лимфомы.

На сегодняшний день, были созданы несколько клеточных линий с различными методами^{12,13,14,,1516}. Человеческой линии клеток НК, НК-YS, был создан от НК лимфома/лейкоз, совместного культивирования с линией стромальные клетки мыши как фидер и в присутствии rhIL-2 в концентрации 20U за¹⁵мл. KAI3 был другой NK клеток линии от больных с тяжелой комаров аллергии или SCAEBV с аутологичной лимфобластоидных клеток линии (LCL), клетки B, преобразованная EBV, как клетки фидера и добавление rhIL-2¹⁶100У/мл. SNK6 и SNT8 были получены от опухоли тканей носа НК/T клеток больных лимфомами, добавив высок дозы rhIL-2 (700U/мл)¹². С подобную технику SNK-1 клетка был от CAEBV больных, культивированный от КСДОР, удалив Т-клеток и добавив 700U/мл rhIL-2^13,17. SNT13 и SNT15 были созданы путем удаления CD4 + и CD8 + клетки¹⁸. Пока другие Т-клеток и NK клеточных линий от EBV-НК/T LPD пациентов были разработаны с этот метод¹⁹.

Недостатки существующих методов, упомянутых выше включают занятости клетки фидера, требование высок дозы IL-2, использования как 10 мл цельной крови или очистки НК/Т-клеток, что является весьма сложной в клинике из-за необходимость проверки, какие типы мобильных что EBV латентно заражает перед началом к культуре. Как CAEBV в основном происходит в детей в Азии, 10 мл крови не является легко приобрести во всех регионах. В этом исследовании мы разработали новый простой метод с высокий уровень успеха установить НК и/или Т-клеток линии путем культивирования КСДОР от CAEBV больных с использованием низких доз rhIL2 и объемом 2 мл цельной крови без клетки фидера. Результаты этого метода доказали свою высокую эффективность и экономия времени.