肉腫細胞における間葉上皮移行の誘導

表現型の可塑性は、細胞の表現型との間の可逆的な遷移を指し、一般に二つのタイプ、上皮 – 間葉（EMT）遷移と間葉ツー上皮移行（MET）に分割されています。この表現型の可塑性は、このような開発や創傷治癒¹と多細胞生物の正常なプロセスにおいて重要な役割を果たしています。しかしながら、これらの同じ経路および遺伝子発現プログラムはまた、線維症のような疾患につながることができ^、（2に概説^{、3、4）、}癌転移（参考文献^{5、6、7、8}に概説）。転移の間に、例えば、EMTは、細胞極性、細胞-細胞相互作用を破壊、および浸潤^9,10を促進します。一緒に、EMTが貢献します癌細胞の普及を促進する表現型状態秒。また、EMTはまた、癌細胞の代謝⁶の規制緩和、薬物抵抗^11、12の開発を含む積極的な表現型を駆動する他の表現型の変化、増加腫瘍開始能^13,14及び免疫回避^15をホストのホストにつながります。

表現型可塑性はよく癌の進行に研究されてきました。しかし、肉腫はまた、表現型の可塑性を示します。癌における表現型の可塑性の同じドライバーのいくつかはまた、肉腫の可塑性と積極性に貢献しているかのよう興味深いことに、それが表示されます。例えば、肉腫患者からの循環腫瘍細胞（CTCのは）のEpCAM、典型的には上皮細胞¹⁶に見出される細胞表面タンパク質を発現することが示されています。 ADDItionally、250個の軟部組織肉腫サンプルは遺伝子発現に基づいて、上皮様または間葉様に分類しました。上皮様バイオマーカーの署名の患者は間葉様バイオマーカーの署名¹⁷の患者よりも良い予後を持っていました。これは、より多くの上皮様癌の患者は、より間葉様腫瘍¹⁸の患者と比較して、より良い結果を持っている多くの癌腫、と一致しています。

いくつかの肉腫は、バイオマーカーおよびMETと一致した遺伝子発現の経路を表示しますが、この表現型可塑性の分子基盤はよくわかっていないまま。肉腫にMETのメカニズムおよびドライバを研究するために、我々は2上皮固有の要因を使用してMET誘導のモデルを開発し、マイクロRNA（MIR）-200家族とgrainyheadのような2（GRHL2）。 MIR-200S messenの3' のUTRに結合することによって遺伝子発現を調節する小さな非コードRNAのファミリーでありますGERのRNAとタンパク質への翻訳を阻止します。 miR-141およびmiR-200Aを含むもの、およびmiR-200B、MIR-200C、およびmiR-429を含む他の – のmiR-200ファミリーは、2つのサブグループから成ります。 miR-200ファミリーのメンバーは、上皮組織に富んでいる、とのmiR-200Sの損失は癌¹⁹に転移と関連しています。 miR-200ファミリーはまた、正常組織²⁰と比較して、軟組織肉腫にダウンレギュレートされます。 miR-200Sと同様に、GRHL2は、上皮の開発²¹のために重要である重要な調節因子です。例えばE-カドヘリンなどの上皮の遺伝子をアップレギュレートする2つの方法でGRHL2転写因子が作用する：1）上皮細胞において、GRHL2直接EMTマスタレギュレータ、ZEB1 ^22を抑制する。 2）GRHL2直接上皮遺伝子²³の転写を活性化します。私たちの以前の研究は、肉腫細胞におけるmiR-200SとGRHL2の組み合わせ表現を示していますMET様表現型^24を誘導します。ここで、我々は、miR-200SとGRHL2の異所性発現を使用して肉腫細胞におけるMET誘導のin vitroモデルを作成するための詳細なプロトコルを提示します。