小儿食管上皮细胞重编程的条件在组织工程和疾病使用调查

食管癌组织工程和嗜酸性粒细胞性食管炎（EOE）一直是研究在许多实验室在过去十年中的焦点。先天性缺陷，如食管闭锁，被认为在约1 4,000活产，这导致在食道导致无力的发育不完全吃^1。 EOE的发病率和患病率一直在自从疾病实体于1993年鉴定EOE的发病率从0.7变化到每人10年/ 10万和患病率0.2范围到43/10万²的崛起。一种新的有吸引力的手术方法来治疗长差距食管闭锁在于生成的组织构建了利用患者自身的细胞植入。这些细胞在用合成脚手架结合将产生自体构造，不需要免疫抑制。一些团体已经开始调查美国食管组织工程³以及使用本地食管上皮细胞的干细胞样细胞电子重新填充粘膜^{4 – 7。}疾病存在于儿童患者食道往往难以诊断或不干预研究。此外，利用动物模型或体外永生化细胞系模型的儿科疾病，如EOE不包括确切的发病机制或患者的具体差异^8。因此，为了研究患者的疾病过程在体外的能力，以确定特定疾病触发抗原，评估潜在的机制和调查药物治疗将是新颖的和提供可在患者的治疗辅助信息临床医生。

已经有已被建议用于Tissu酒店使用许多自体或患者特定的细胞类型机电工程和研究人类疾病的发病机制。然而，这些类型的细胞在它们的能力是有限的，以产生一个特定的表型的足够的细胞接种大型支架或体外研究进行高吞吐量。使用多潜能或多能的干细胞已经大量的研究讨论的话题，但是，局限性和缺点对于使用这些细胞已被很好地描述^9。利用人类胚胎干细胞的高度辩论，提出了许多伦理问题。最重要的是，这些细胞形成畸胎瘤，其类似于一个肿瘤，如果他们不从它们的多能性状态提供它们到生物主机¹⁰之前区分。此外，使用胚胎干细胞的不会是患者特异性的，并可能引起同种异体反应和需要免疫抑制^10。诱导多能干细胞（iPS细胞）是多能干细胞，它可以从患者自身的细胞。体细胞，如皮肤细胞，可以使用各种一体化和非整合的技术来诱导多能状态。这些细胞然后作为用于组织工程或疾病调查患者特异性细胞来源。不需要的遗传物质整合到这些细胞是很多人所描述即使序列完全去除iPS细胞似乎节省了后生“记忆”对从它们所衍生¹¹细胞类型值得关注。这些细胞还将形成畸胎瘤体内如果不是移植前¹¹区分。许多分化的协议已经研究专注于上皮谱系^{12，13，14，}但是，要注意的是在分化结束时所产生的细胞类型不均匀和O这是非常重要的唯一一句具有感兴趣的细胞类型的一小部分。这导致低收率和需要纯化所需的细胞类型。虽然iPS细胞是一个潜在的患者特定的细胞来源，该方法以获得对任何组织工程或疾病调查感兴趣的细胞类型是非常低效的。

肺^15，乳房^16，小肠^17，结肠^18，膀胱¹⁹和食道^20：人上皮细胞已经从各种人体包括患病和非患病组织的被成功分离。要注意的是人的原代细胞具有其中表型被保持^21,22通道的一个有限数量是很重要的。不幸的是，这意味着需要的疾病调查或播种的工程支架的细胞数用于植入可能无法达到。因此，需要新的技术来扩大患者的细胞，同时仍保持上皮表型。利用饲养细胞和ROCK抑制剂正常和癌性上皮细胞的有条件的重编程被刘等人在2012年描述。 ^{2 3。}这个技术被用于扩展从利用照射饲养细胞，ROCK抑制剂和有条件的重新编程介质前列腺癌和乳腺癌的活检获得的癌细胞的上皮细胞。我们的目标是产生足够的细胞用于在体外测定，如药物筛选。该技术是能够通过“重新编程”这些细胞干细胞或祖状态，这是高度增殖性无限期膨胀的上皮细胞的。已经证实，这些细胞是非致瘤性和不具有形成畸胎瘤^23,24的能力。此外，没有染色体异常或遗传操作是使用这种技术^23,24在培养传代这些细胞后存在。最重要的是，这些细胞仅能够分化成感兴趣的天然细胞类型。因此，这种技术提供了一个大的贮存器的患者特异性上皮细胞疾病调查或组织工程无需永生化。

从一个特定的器官，以研究疾病过程获得上皮组织往往有限，并不总是可能的，因为病人的风险。对于那些从食管疾病或缺陷的患者，内镜活检检索是用于获得可以解离，并有条件地重新编程，以提供特定于该病人的食管粘膜无限期细胞源的上皮组织微创方法。然后，这允许在体外研究上皮细胞，以评估疾病过程和屏幕为潜在治疗剂。一种疾病过程，可以极大地从该方法中受益是嗜酸性食管炎，已被描述为食道⁸的过敏性疾病。过敏试验以及治疗方法可以在体外使用患者自身的上皮细胞进行评估，然后这个数据可以被传递到治疗医师来开发个性化的治疗方案。条件重新编程的与来自儿科患者获得内窥镜活检一起使用时的技术提供了从任何患者无限膨胀正常食管上皮细胞的能力。此单元源因此可以用天然或合成的脚手架一起合作，以提供缺陷，疾病或创伤患者专用手术选择。有一个不确定的细胞数量将有助于工程师是拥有一个完全重新接种食道的构造为了与食管上皮细胞流明帮助促进剩余的细胞类型的再生。