마우스의 신경 병증 성 통증의 좌골 신경의 바지를 접 모델

프로토콜은 "위원회 (CCT) D' ETHIQUE EN MATIERE 디부 실험 ANIMALE 드 스트라스부르"(CREMEAS)에 의해 승인되었습니다. 발 탈퇴 임계 값의 1.베이스 라인 측정 마우스는 시험 절차를 시작하기 전에 이주에 적어도 10 일 동안 동물 시설 길들 허용. 본 프레이 테스트 셋업과 4 장에서 설명하는 본 프레이 절차에 마우스를 길들. 수술하기 전에 4.3 절에 설명 된대로 본 프레이 필라멘트와 기계 발 철수 임계 값을 평가합니다. 참고 : 적어도 세 안정적으로 연속 값이 발 철수 임계 값에 얻을 때까지 다른 일에 절차를 반복합니다. 이 그룹은 처음 발 철수 임계 값에 차이가되지 않도록 다른 실험 그룹에 마우스를 할당합니다. 팔목 Implantati 2. 수술 절차에 동물의 무게를 측정. 참고 : 마우스 체중 후술 커프스 삽입 절차 20g 이상이어야한다. 케타민 (17 ㎎ / ㎖) 및 마취 약 45 분을 제공 0.9 %의 NaCl에서 자일 라진 (2.5 ㎎ / ㎖)의 혼합물을 4 ㎖ / kg의 복강 내 주사로 동물을 마취. 핀셋 뒷 발을​​ 집어 발 반사의 부재를 확인하고 동물이 완전히 마취되어 있는지 확인하기 위해 눈 반사의 부재를 확인합니다. 전기 면도기를 사용하여 엉덩이에 무릎에서 오른쪽 다리를 면도. 면봉으로 눈에 눈 보호 액체 젤을 적용합니다. 그 왼쪽에 동물을 배치하고 작은 베개에 오른쪽 뒷다리를 배치하고 접착 테이프로 베개에 오른쪽 뒷다리를 유지한다. 거즈 패드 나 면봉을 사용하여 클로르헥시딘 70 % 에탄올로 수술 필드를 소독. 집게 손가락을 사용하여 대퇴골을 찾아 확인약 0.5 cm의 절개는 대퇴골의 대퇴골과 약 1.5 mm 전방에 평행. 두 멸균 스틱 대퇴골에 가까운 근육을 분리합니다. 주의 사항 : 근육을 절단하지 마십시오. 일반적으로 근육 층은 출혈없이 쉽게 분리 및 좌골 신경은 볼 수 있습니다. 출혈의 경우, 혈액을 흡수하는 멸균 면봉을 사용합니다. 주요 지점을 노출하는 좌골 신경 아래 두 멸균 스틱을 삽입하고, 멸균 생리 용액 (0.9 % 염화나트륨)과 신경을 수화. 분할 PE-20 폴리에틸렌 튜브 (커프스) 날카로운 강철 스틱의 도움과 불독 클램프, 0.38 mm의 ID / 1.09 mm 외경의 사전 준비 멸균 2mm 부분을 잡습니다. 약간을 열 때, 팔목에 날카로운 강철 막대기를 삽입합니다. 커프 측면 개구를 사용하여, 커프스의 한쪽 끝에 불을 삽입하고 커프 평행. 그것은으로 커프를 개최 있도록 불독 (180 °) 회전측면 개방에 반대면. 불독을 닫고 날카로운 강철 막대기를 제거합니다. 참고 : 회전이 들고 온 커프 삽입에 최적화 된 위치에, 불독 클램프도 부분적으로 개방 커프를 유지하는 데 도움이되는 수 있도록하기위한 것입니다. 모델 및 불독 클램프의 크기가 절차의이 단계에 중요하다. 두 번째 실험은 신경에서 두 개의 스틱을 잡고 부드럽게 약 4 mm 길이입니다 좌골 신경의 한 부분에 대한 액세스를 용이하게하기 위해 스틱을 분리해야합니다. 엉덩이에 인접하다 신경의 부분의 주위에 불에 말단 인 커프스 부분을 삽입하여 시작, 좌골 신경의 주요 지점의 주위에 2mm의 커프를 삽입합니다. 튜브의 형태를 압박하거나 변경하지 않고, 플라이어와의 두 말단 측에 압력을 행사하여 부드럽게 팔목을 닫습니다. 올바르게 닫혀 있는지 확인하기 위해 커프를 켭니다. 면도, 피부 층의 재치를 봉합H 수술 매듭. 깨끗한 집 케이지의 왼쪽에 마우스를 놓습니다. 마우스가 깨어 때까지 가열 램프 아래에 보관하십시오. 여분의 물을 추가하고 홈 케이지에 직접 어떤 중국 사람을 배치합니다. 샴 제어 3. 수술 절차 단계 2.15-2.17으로 수행 한 다음, 2.9 단계 2.1 단계에서 전술 한 바와 같이 동일한 수술 절차를 적용한다. 가짜 컨트롤의 경우, 2.14 유일한 관심사 커프 삽입에 단계 2.10를 생략합니다. 4. 본 프레이 테스트 부드러운 스테인리스 스틸 (1 MX 50cm, 천공 테두리 사이에 2.5 mm로 5mm의 원형 구멍)의 상승 공판에 구멍이 명확 개별 박스 (7cm X 9cm X 7cm)에 마우스를 놓습니다. 참고 : 최대 12 생쥐 병용이 세트 업에 테스트 할 수 있습니다. 운영하는 동물은 수술 후 하루 테스트 할 수 있습니다. 그러나, 복구의 3 일을 관찰 수술 후 과민 반응을 감소하는 것이 좋습니다가짜를 제어합니다. 동물 시험을하기 전에 15 분 동안 습관화 할 수 있습니다. 상승하는 힘의 계열의 각 뒷발의 발바닥 표면에 본 프레이 필라멘트를 적용합니다. 주의 사항 : 본 프레이 필라멘트 보정 직경의 플라스틱 머리입니다. 그들은 오래 5 cm이며, 휴대용 어플리케이터에 고정되어 있습니다. 필라멘트 애플리케이션의 속도가, 굽힘 및 애플리케이션의 재생 시간의 정도는이 테스트 3으로 수득되는 임계 값에 영향을 미칠 수있다. 마우스에서 본 절차, 가장 자주 사용되는 필라멘트는 0.16, 0.4, 0.6, 1, 1.4, 2, 4, 6, 8, 10g이다. 필라멘트 단지 굴절 될 때까지 왼쪽의 발바닥 표면에 선택 필라멘트를 적용합니다. 절차에게 3-5 회 연속 반복 한 다음 오른쪽 발에 동일한 작업을 수행. 필라멘트는 양쪽 발에서 테스트되면, 다음 동물을 시험한다. 참고 : 더 민감 할 수 있습니다 발 측면 테두리를하지 마십시오. 예상 응답은 발입니다철수, 갑자기 주춤하거나 발을 핥는. 적어도 세 예상 응답이 다섯 시험 중 관찰되는 경우에 긍정적으로 응답을 고려하십시오. 주어진 발은 항상 세 번 테스트,하지만 네 번째와 다섯 번째 시험이 완료되는 경우에만 1 또는 2 응답 (들)은 처음 세 개의 테스트 동안 관찰 (했다)였습니다. C57BL/6J 마우스에서 1.4 g 필라멘트와 미리 수술 테스트를 시작합니다. 수술 후, 0.4 g 필라멘트와 테스트를 시작합니다. 긍정 응답이 제 시험 필라멘트 관찰되면, 단계 4.3.2에서 (대신 그 이상) 낮은 힘의 필라멘트를 테스트한다. 4.3.1 절차에 따라 다음 동물에 같은 필라멘트를 적용합니다. 모든 동물이 테스트되면, 더 큰 힘의 다음 필라멘트와 첫 번째 동물에 다시 시작합니다. 모든 쥐가 긍정적 인 응답을 줄 때까지 절차를 반복합니다. 주의 : 시험 각 동물 두 개의 연속 된 필라멘트가 긍정적 인 응답을 줄 때까지. 발 재치로 긍정적 인 반응을 준 낮은 필라멘트의 그램 값을 고려이 동물에 대한 hdrawal 임계 값.