El manuscrito describe los pasos necesarios para llevar a cabo el trasplante cardíaco heterotópico en el ratón.
Ahora es de más de cuarenta años desde que esta técnica fue reportada primero por Corry, Wynn y Russell. Aunque tomó algunos años para otros laboratorios para ser competentes en y utilizan esta técnica, ahora es ampliamente utilizado por muchos laboratorios de todo el mundo. Un refinamiento importante a la técnica original fue desarrollado y reportado en 2001 por Niimi. Se describen aquí son las técnicas que se han desarrollado durante más de una década en manos de tres cirujanos (Plenter, Grazia, Pietra) en nuestro centro. Estas técnicas están siendo transmitidos a una generación más joven de cirujanos e investigadores.
Basado en gran parte en la experiencia Niimi, los procedimientos utilizados han evolucionado en los pequeños detalles – detalles que haremos todo lo posible para relacionar aquí de una manera tal que otros pueden ser capaces de utilizar este modelo de gran utilidad. Como Niimi, hemos encontrado que una ayuda de video para el aprendizaje es un recurso de valor incalculable para el principiante.
En una era en la que es posible realizar trasplantes de riñón, pulmón, hígado y páncreas en ratones, la piedra angular de un trasplante de órgano la investigación básica y la inmunología desde 1973 1-4 sigue siendo el modelo de trasplante heterotópico de corazón en el ratón. En los años transcurridos varios trabajos se han publicado detalles de mejoras / mejoras de 5,6 a este procedimiento.
Como modelo de trasplante de órganos sólidos principalmente vascularizado este procedimiento es insuperable. Una vez dominado este procedimiento se presta a la investigación de respuestas de rechazo alogénico 7, el desarrollo de vasculopatías crónicas 8 y los mecanismos de la lesión de isquemia-reperfusión 9.
Las claves para el aprendizaje con éxito este procedimiento son como cualquier otra cirugía, la paciencia por parte del instructor y el alumno y la atención al detalle. Al comienzo del proceso de la nueva cirujano encontrará que Tbueno pasará muchas horas en cada trasplante. Medida que se adquiere experiencia, los tiempos quirúrgicos, y por lo tanto de isquemia, se reducirá drásticamente. Prestar atención a los detalles de cada paso, tarde o temprano llevará al éxito.
Mientras que el instructor puede hacer su mejor esfuerzo para transmitir, y para anticipar, todas las posibles caídas del hoyo que se pueden encontrar durante estas cirugías, el aprendiz "creativo" es probable encontrar algunos de los suyos!
Los fundamentos del procedimiento son los siguientes. El donante ascendente arco aórtico es de extremo a lado anastomosa a la aorta abdominal receptor y la arteria pulmonar del donante es de extremo a lado anastomosada al destinatario abdominal de la vena cava inferior (VCI). La sangre fluye desde la aorta destinatario en forma retrógrada a través de la aorta del donante a las arterias coronarias. Una vez que la sangre ha pasado a través del sistema coronario que drena en la aurícula derecha a través del seno coronario, se bombea hacia el ventrículo derecho ya continuación, a través de la arteria pulmonar en el receptor IVC. De esta manera el sistema coronario se suministra la sangre arterial y el ritmo sinusal devuelve al injerto dentro de 1-2 min de reperfusión. Desde las cámaras izquierdas del corazón son la presión esencialmente bajo-cargado la pared libre del ventrículo izquierdo se atrofia con el tiempo.
Esta técnica quirúrgica no es fácil de dominar, pero una vez dominado es una poderosa herramienta de investigación. El investigador / cirujano se ve recompensado por la consistencia de la técnica y por la atención a los detalles. Paciencia durante la fase de aprendizaje es la clave. Según lo publicado por Niimi 3, con la ayuda de una herramienta de aprendizaje de vídeo basado toma un promedio de 11 intentos para lograr el primer procedimiento exitoso y 78 intentos de lograr una tasa de éxito del 90%. Videos se han convertido en una herramienta de enseñanza importante en la cirugía 11,12.
Solución de problemas
Sangrado de las anastomosis se puede producir y esto es probablemente debido a la falta de cualquiera de tensión correcta en los puntos de sutura, o muy pocos puntos de sutura. Mientras que un agente inductor de la coagulación como Gelfoam puede ser útil para reducir las fugas, se recomienda que el cirujano debe contar con una buena técnica. Congestionado corazón no late es más común debido a la anastomosis que son demasiado apretados, sobre todo en el lado venoso. Un no-beatosng, injerto no perfundido es causada comúnmente por una burbuja de aire que ha viajado en una de las arterias coronarias. Es importante mantener un campo húmedo a húmedo para evitar la entrada de burbujas en los vasos.
Limitaciones de la Técnica
Esta técnica no es adecuada si un investigador desea investigar los efectos sobre un corazón en pleno funcionamiento. Eso requeriría una técnica de trasplante ortotópico, que hasta la fecha ha sido imposible de realizar.
Significativas en relación con los métodos existentes
Si se desea estudiar los efectos sobre un trasplante de órgano totalmente vascularizado, sólido en el ratón, entonces el modelo de corazón es probablemente la más sencilla de dominar. Existen modelos de ratón de cáncer de pulmón, el riñón y el trasplante de hígado, pero son mucho más difíciles de aprender y perfecto.
Los pasos críticos dentro del protocolo
Es de vital importancia que todo su espesor, pasnos incluyendo la adventicia vascular y la íntima de la aguja de sutura se consiguen. Evertion de los bordes también se asegura de que haya contacto-íntima a la íntima, que ayuda en el sellado y la cicatrización de las anastomosis. Otro factor muy importante es asegurarse de que la tensión de las líneas de sutura de la anastomosis también es óptima. Resultará demasiado flojo y no habrá fugas irreversible, demasiado apretado y estenosis a fluir. Si en el lado arterial esto se traducirá en una pobre perfusión del injerto, si en el lado venoso dará como resultado un corazón congestionado.
Por encima de todo, la repetición, la consistencia del procedimiento y la atención continua al detalle producirá grandes resultados y los datos que puedan ser financiados y publicables.
The authors have nothing to disclose.
Los autores desean agradecer al Dr. Biagio Pietra por su trabajo previo en nuestro laboratorio.
Instrument | Roboz # | Fine Science Tools # | Arosurgical # |
Straight micro-dissecting forcep #5 | RS-5015 | 11295-51 | |
Curved micro-dissecting forcep #7 | RS-5047 | 11297-00 | |
Curved serrated forcep | RS-5137 | 11052-10 | |
Vannas micro-dissecting scissors, short | RS-5610 | 09.140.08 | |
Micro-dissecting scissors, straight, sharp, long | 11.602.11 | ||
Micro spring handle needle holder | 11.549.15 | ||
Straight mosquito forcep | 91308-12 | ||
Micro-dissecting scissors, straight, blunt | RS-5962 | 14078-10 | |
Micro-dissecting scissors, curved, blunt | RS-5981 | 14079-10 | |
Micro retractor | RS-6540 | ||
Instrument tray, 10” x 6 ½” x ¾” | RT-1350S | ||
Silk suture, 5/0, 22.5m spool | 18020-50 | ||
Suture | |||
10/0 nylon | T4A10Q07 | ||
5/0 silk | E19A05N | ||
Gloves | Drapes | ||
Biogel from Medex Supply | Precept, #64-9012-9 | ||
Syringes | Cotton applicators | ||
B-D 1cc insulin, #329424 | Fisher-brand, #23-400-100 | ||
Povidone-Iodine swabs | |||
PDI, #B40600 | |||
4/0 Cotton ties | |||
Domestic cotton autoclaved with instruments |