Özet

'Nauplius의 움직임을 분석<em> 아테 살리나</em> '플라즈몬 나노 입자의 광학 추적하여

Published: July 15, 2014
doi:

Özet

우리는 수생 생물의 주파수의 움직임을 조사하고 특성을 플라즈몬 나노 입자의 광학 추적을 사용합니다.

Abstract

우리는 광 핀셋 작은 수생 생물의 이동에 의해 생성 된 유체 진동을 분석하는 중요한 도구를 제공 할 수있는 방법을 보여준다. 광학 트위터로 개최 한 금 나노 입자는 물 샘플에서 Nauplius 유충 (아테 살리나)의 리드미컬 한 움직임을 정량화 할 수있는 센서로 사용된다. 이것은 Nauplius 활동의 결과로 나노 입자의 포획 시간 종속 변위를 모니터링함으로써 이루어진다. 나노 입자의 위치의 푸리에 분석 후 관찰 된 종의 움직임에 대한 특징적인 주파수 스펙트럼을 산출한다. 이 실험은 직접 관찰하고 포획 된 입자에 대한 유충의 위치에 대한 정보를 얻기 위해 필요없이 작은 수생 유충의 활동을 측정하고 특징이 방법의 능력을 보여줍니다. 전반적으로,이 방법은 수중 전자에서 발견 된 특정 종의 생명력에 대한 통찰력을 줄 수cosystem 물 샘플을 분석하는 기존의 방법의 범위를 확장 할 수 있습니다.

Introduction

화학 및 생물 학적 지표에 따라 수질 평가는 수생 생태계 1-3의 상태 및 환경 조건에 대한 통찰력을 얻기 위해 근본적인 중요하다. 화학 물 분석 용 고전 방법은 관능 특성이나 물리 화학적 파라미터의 결정에 기초한다. 생물 지표는, 다른 한편으로는, 그 존재 및 생존 환경 조건들이 bioindicators 대한 전형적인 예 인치 발생할 생태계에 대한 오염 물질의 효과에 대한 통찰력을 제공 동물 종은 요각류, 작은 물 갑각류 기, 수있다 아르 거의 모든 물 서식지 4,5에서 발견 될 수있다. 물 샘플에서 이러한 종의 활성 및 생존을 관찰하는 것은, 따라서 생태계 5 전체적인 조건에 대한 정보를 얻기 위해 사용될 수있다. 노 플리 우스라고 요각류의 유충,, (각 유충은 appenda 세 켤레가 자신의 안테나의 리듬 스트로크를 사용하여그들의 머리 지역에서 GES)는 물 6에서 수영. 이러한 스트로크의 빈도와 강도함으로써 연령, 적합하고, 동물 7-10의 환경 조건의 직접적인 지표이다. 이 표본에 대한 조사는 일반적으로 관찰하고 직접 노 플리 우스의 안테나 선을 계산하여 현미경으로 수행됩니다. 크기 때문에 (~ 100 ~ 500 μm의) 11, 이것은 종종 하나 하나 또는 기판에 단일 Nauplius를 해결하는 하나의 측정을 수행해야합니다.

여기, 우리는 초 고감도 탐지기로 광학 포획 금 나노 입자를 사용하여 물 샘플에서 요각류 유생의 활동을 관찰하기 위해 새로운 접근 방식을 보여줍니다. 광 핀셋은 일반적으로 piconewton 범위 12 ~ 14까지 분자 사이의 힘을 적용하거나 측정 할 수있는 정밀한 실험 도구로 여러 그룹에 의해 사용됩니다. 최근 광 핀셋에 대한 응용 프로그램의 범위는 음향 진동을 관찰하고 해결하기 위해 확장되었습니다광학 트랩 (15)에 국한되어 나노 및 마이크로 입자의 움직임을 모니터링하여 액체 미디어에 NT 변동. 액체에 몰입 입자는 브라운 운동을 실시한다. 광학 트랩 내부, 그러나,이 운동은 부분적으로 강한 레이저 유도, 그라데이션 힘에 의해 감쇠된다. 따라서, 광 트랩의 강성과 레이저 빔의 초점 내의 입자의 지역화는 레이저 파워에 의해 조정될 수있다. 동시에, 그것은 트래핑 대한 잠재적 특성을 공개하고 트랩에서 시간 의존적 입자 운동을 모니터링하여 입자와 분자의 상호 작용을 분석하는 것이 가능하다. 이 접근법은 가능한 주파수, 강도, 그 액체 환경에서 움직이는 물체에 의해 생성되는 유체의 운동 방향을 태우기 위해 렌더링한다. 우리는이 일반적인 아이디어가 필요없이 개별 Nauplius의 움직임의 주파수 스펙트럼을 얻기 위해 적용될 수 있는지 보여직접 표본을 방해합니다. 이 실험 방법은 매우 민감한 방법으로 수생 표본의 운동성 행동의 관찰을위한 새로운 일반적인 개념을 소개합니다. 생물 지표 종에 대한 관측의 경우, 이것은 물 분석을위한 현재의 방법론을 확장 할 수 있고, 건강과 생태계의 완전성에 대한 정보를 얻기 위해 적용될 수있다.

Protocol

1. 실험 설정 암시 야 조명을위한 개구 수 (NA) = 1.2로 업 오른쪽 현미경 및 암 필드 오일 콘덴서를 사용한다. 입자의 관찰과 트래핑 100X 배율 및 NA = 1.0 침수 목표를 사용합니다. Nauplius의 움직임을 따라 10 배 배율 NA = 0.2으로 공기 목적을 사용합니다. 위쪽 오른쪽 현미경으로 결합 된 1,064 nm의 연속파 레이저 광 핀셋 설정을 사용하십시오. (대물 후 파워 미터로 측정) 100 mW의 광을 트랩?…

Representative Results

실험 장치의 개략도는 그림 1A에 표시됩니다. 암 필드 구성은 광학적으로 광 트랩 (15)에 60 nm의 금 입자의 변위를 검출 할 필요가있다. 트래핑 레이저 1064 ㎚의 파장은 검출기 금 입자 (12, 14)의 안정적인 협착을 보장하도록 선택된다. 현미경에서 빔 스플리터는 대물 통해 포착 된 빔을 집중하는 데 및 노치 필터는 실험의 검출 장치에 유입 트래핑 레이저를 방지한다. Naup…

Discussion

암시 야 현미경은 금속 나노 입자의 산란 단면적이 그들의 형상 단면 (info 참조도 2A) (18)을 초과하기 때문에, 광 회절 한계 이하 치수의 금 나노 입자를 시각화하기위한 강력한 도구이다. 족집게 설정에서,이 접근 방법도 입자 사이 플라즈몬 커플 링 플라즈몬 공진 주파수 (15)의 적색 – 시프트의 원인이되기 때문에 단지 하나 또는 여러 개의 금 나노 입자가 레이저 광에…

Açıklamalar

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

나노 시스템 이니셔티브 뮌헨 (NIM)를 통해 DFG에 의해 고급 탐정 그랜트 HYMEM 통해하고 Sonderforschungsbereich (SFB1032)를 통해 ERC에 의해 재정 지원, 프로젝트 A8은 기꺼이 인정 받고 있습니다. 우리는 알렉산더 박사 Ohlinger 박사 솔 Carretero – 팔라시오 스 및 지원 유익한 토론 스파 Nedev에 감사드립니다.

Materials

Microscope Zeiss Axio Scope.A1 Carl Zeiss 490035-0012-000 dark field illumination
Water objective Achroplan Carl Zeiss 440087 100x magnification, NA=1.0
Air objective Epiplan Carl Zeiss 442934 10x magnification, NA=0.2
Dark field oil condenser Carl Zeiss 445323 NA=1.2
Cobolt Rumba CW 1064 nm DPSSL Cobolt  1064-05-01-2000-500 1064nm, CW, λ=1064nm, 2 Watt, TEM00
Beam expander Edmund Optics Part no. 1064 2-8X 64414
High Speed Camera Dimax HD PCO. Germany
Color Camera Canon EOS 500 D  Canon FAQ-ID: 8201395700
Notch filter StopLine 532/1064 Semrock A11149-711265 Part no. NF01-532U
Water 
Nauplius Artemia Salina
Gold colloid BBInternational Batch 13741  Diameter 60nm
MQMie Version 3.2  r. Michael Quinten
Mathematica 8.0 Wolfram
Comsol Multiphysics 4.0  COMSOL, Inc.

Referanslar

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Bu Makaleden Alıntı Yapın
Kirchner, S. R., Fedoruk, M., Lohmüller, T., Feldmann, J. Analyzing the Movement of the Nauplius ‘Artemia salina‘ by Optical Tracking of Plasmonic Nanoparticles. J. Vis. Exp. (89), e51502, doi:10.3791/51502 (2014).

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