评估小鼠浆细胞树突状细胞在淋巴集结的开发利用造血祖细胞的过继转移

在这里，我们展示了一个协议，以评估共同树突状细胞祖细胞（个CDP）是否能够在浆细胞树突状细胞（PDC）人口淋巴集结（PP）引起。使用这种方法的总体目标是评估的pDC的淋巴集结（PP pDCs细胞）的发育调控。的原因，这是很重要的是，聚丙烯的pDCs从其他组织，包括骨髓，血液和脾脏中找到的pDCs不同的，因此，目前还不清楚PP的pDC和其他的pDC群是否发育和/或功能上相关的。具体来说，pDCs细胞被广泛称为是主要的I型干扰素（IFN）生产者造血系统中，响应Toll样受体7和9（TLR7 / 9）快速干扰素分泌^1-3刺激。然而，PP的pDCs是缺乏生产型干扰素响应TLR激动剂刺激^4,5。此外，聚丙烯的pDCs也从发现在骨髓和脾脏中的pDCs不同要求从类型信号I干扰素（IFN）受体（IFNAR1）或干扰素信号分子STAT1为他们的发展和/或积累^5。这些数据表明，不同的监管机制，控制PP的pDCs与其他器官pDCs细胞（ 如骨髓，脾^）5的可能性。

导致这一方法的发展的基本原理是基于在理解树突状细胞（DC）的生物学的最新进展。大多数，如果不是全部，DC亚群从表达该FMS-样酪氨酸激酶3受体（的^Flt3）6-10造血祖细胞派生，但是，直流发展并不局限于经典的髓系和淋巴途径。例如，FLT3 ⁺普通髓系祖细胞（中医师，林^– IL-7R ^–的Sca-1 ^–的c-kit ⁺ CD34 ⁺细胞^{FcγRLO / – ）}来个CDP（林^–的c-kit ^罗 CD115 ⁺的Flt3 ^+）引起，whic率进一步分化成PDC和传统的DC中心^{（CDC）9,10。}相比之下，FLT3 ⁺普通淋巴祖细胞（的CLP，林^– IL-7R ⁺的Sca-1 ^LO的c-kit ^LO），主要发展为pDCs细胞^11。因此，以前的研究表明的pDCs产生下FLT3L的调节至少2个不同的造血祖细胞群体，虽然典型的分析已被限制在骨髓，脾脏和/或血液的pDC亚群。因此，生成聚丙烯的pDCs的祖人口（S）所需的调查。了解PP pDCs细胞的起源将揭示他们是否与其他的pDC人群有着共同的发展途径光线，或者他们这一代人在PP中使用不同的机制。

本文所述的方法的独特优点是使用，显示严重不足的PP pDCs细胞为受体的造血祖细胞的过继转移小鼠。小鼠基因抽动缺失该基因编码的IFNAR1（IFNAR ^{– / –}小鼠）或STAT1（STAT1 ^{– / – ）}揭示了PP的pDCs ⁵一个惊人的消耗。因此，这些菌株提供一种聚丙烯的pDCs被还原的环境，允许继转移研究，在缺少有效的细胞消融制度如致死照射来进行。这里提出的方法的另外一个优势是利用流体力学基因转移（HGT）来刺激FLT3L升高的循环量。这提供了以诱导FLT3L 体内 ，相对于注射重组蛋白的具成本效益的方法。大量的研究，包括那些在我们的实验室中，聘用HGT诱导细胞因子的量在各种实验条件^5,12,13。

劳动和精确的免疫功能区议会的划分是在免疫学的主要兴趣。特别是，pDCs细胞是口服耐受和全身抗病毒的重要介质反应，但它们也似乎有助于自身免疫和癌症^14-17的发展和持续性。本文所述的协议将允许调节聚丙烯的pDCs的发育机制更加充分的探讨。此外，这种方法可能会允许研究，以评估PP pDC的功能，并且可以扩展到理解中的PP其他免疫人群的调节和功能。