במאמר זה יתאר וידאו השימוש חדש<em> Vivo לשעבר</em> מודל של הרפס סימפלקס סוג וירוס האקוטי אני זיהום האפיתל של קרנית.
keratitis הרפס הוא האחת הפתולוגיות החמורות ביותר הקשורות לוירוסים מסוג 1 (HSV-1) הרפס סימפלקס. keratitis הרפס הוא כיום הגורם המוביל לשניהם נגזרו קרנית וזיהום הקשור בעיוורון בעולם המפותח. מצגת טיפוסית של הרפס קרטיטיס כוללת דלקת של האפיתל של הקרנית ולפעמים עמוקים יותר סטרומה ואנדותל בקרנית, מה שמוביל למחל קרנית קבועות כגון צלקות, דלילים, ואטימות 1.
זיהום קרני HSV-1 הוא למד באופן מסורתי בשני סוגים של מודלי ניסויים. במבחנת מודל, שבי monolayers תרבית של תאי אפיתל קרניים נגוע בצלחת פטרי, מציע פשטות רמה גבוהה של replicability, ניסויים מהירים, ועלויות נמוכות יחסית. מצד השני, in vivo מודל, שבי חיות כמו ארנבים או עכברים מחוסנות באופן ישיר בקרנית, מציע פיסיולוגי מתוחכם ביותרמערכת, אבל יש עלויות גבוהות יותר, ניסויים ארוכים יותר, טיפול בבעלי חיים הכרחיים, ובמידה רבה יותר של השתנות.
במאמר זה וידאו, אנו מספקים הדגמה מפורטת של דגם חדש vivo לשעבר של זיהום HSV-1 אפיתל קרני, המשלב את היתרונות של שניהם במבחנה במודלי vivo. מודל vivo לשעבר מנצל קרניות שלמות שמרו organotypically בתרבות ונגועה בHSV-1. השימוש במודל vivo לשעבר מאפשר למסקנות מאוד מבוססות מבחינה פיזיולוגית, ובכל זאת היא לא זולה ודורשת מחויבות זמן דומים לזה של מודל במבחנה.
במאמר זה יתאר וידאו שיטה ללימוד הזיהום חריף בקרנית אפיתל HSV-1 במודל vivo לשעבר. המודל הזה הוא קרש קפיצה שימושית בין במבחנה במודלי vivo, משום שהיא מאפשרת לאימות פיזיולוגית מדויקת-תוצאות תרביות תאים, ובכך מגבילה את כמות הניסויים בבעלי חיים שהם צריכים לבצע. בנוסף, מ?…
The authors have nothing to disclose.
התמיכה של בנק עין אריות דלאוור העמק הייתה רבה ערך עבור עבודה זו. נוגדן חד שבטי עכבר העיקרי נגד ICP8 היה מתנה מסוג ד"ר דוד Knipe (הספר לרפואת הארוורד). אנו מודים גם לד"ר סטיבן ג'נינגס (דרקסל מכללה לרפואה של אוניברסיטה) ופיטר ד"ר Laibson (צוואות Eye Institute) לדיונים מועילים ואת המומחיות.
Reagents/Supplies | Company | Catalogue # |
Minimum Essential Medium (MEM) | Mediatech | 10-010-CV |
Non-Essential Amino Acids (100x solution) | Mediatech | 25-025-CI |
L-Glutamine | Mediatech | 25-005-CI |
Penicillin G Sodium Salt | Sigma | P3032 |
Streptomycin Sulfate Salt | Sigma | S9137 |
Agarose | Invitrogen | 15510-027 |
Phosphate Buffered Saline (PBS) | Prepared in lab | N/A |
Trypsin EDTA (1x) | Mediatech | 25-053-CI |
DNeasy Blood & Tissue Kit | QIAGEN | 69504 |
RNeasy Mini Kit | QIAGEN | 74104 |
Laemmli Buffer | Prepared in lab | N/A |
Optimal Cutting Temperature (OCT) Compound | Tissue-Tek | 4583 |
Whole Rabbit Eyes (Young) | Pel-Freez | 41211-2 |
Human Corneas and Whole Eyes | Local Eye Bank | N/A |
12 Well Porcelain Spot Plate | Avogadro’s Lab Supply | 1877 |
35 mm Tissue Culture Dish | Falcon | 353001 |
6 Well Cell Culture Plate | Greiner Bio-One | 657160 |
Cryomold Intermediate | Tissue-Tek | 4566 |