VisioTracker，创新的自动化到动眼神经分析方法

1。鱼的选育的胚胎被保留，并提出在标准条件下（品牌2002年）和天受精后（DPF）上演根据发展。成虫和幼虫在5 DPF用于测量。 2。实验过程制备仪器幼虫仔稚鱼被嵌入在3％预温（28°C），甲基纤维素，以防止身体动作。胚胎放在背侧在VisioTracker，面临的投影屏幕。成人鱼：鱼简要地在300毫克/升的MS-222麻醉，装入固定装置和对在VisioTracker下的。在开始测量之前，他们离开，恢复1-2分钟。 产生的刺激模式创建刺激模式由垂直的黑色和白色的正弦波光栅旋转周围的鱼使用专有的软件套件。它们可以是通过软件包调制根据波形，对比度，强度，角速度和空间频率。预计到使用数字光投影机在VisioTracker的，屏幕的模式。鱼的眼睛和屏幕之间的大致距离为4.5厘米，和投影尺寸屏幕上的水平方向360度和55度垂直。仔鱼，刺激方向与0.33赫兹的频率被改变，以减少扫视频率。成人鱼刺激，单向只眼睛的刺激颞鼻方向考虑，因为一般是鼻，颞眼速度显着降低和恒定的参考，以穆勒和Neuhauss的2010年。 记录眼球运动一个明场像鱼的头被送入红外线摄像机。红外照明鱼类的影响fROM如下。相机记录的影像在5帧/秒（幼虫）或12.5帧/秒（成人）的速度。图像自动处理，纠正眼睛的形状和平滑。眼睛有关的水平轴线上的方向，然后自动确定眼速度计算由专有软件套件。小运动的鱼被自动校正的软件。所有的记录和分析，实时完成。 3。实验后的数据处理眼睛的速度的信息的测量，过滤扫视，以便提取相缓慢的速度。 扫视过滤眼速度曲线平滑的平均7帧的滑动窗口。 眼睛的速度是相同的刺激条件下平均帧。 仔鱼，双眼眼速度的平均值。 4。代表性的成果： <p c姑娘="“jove_content”">为了评估幼虫和成虫鱼VisioTracker的能力，实验进行5的dpf和成年斑马鱼与斑马鱼幼虫。 对于仔鱼斑马鱼， 保险杠突变的选择。在此突变，晶状体上皮细胞hyperproliferate，导致减少的透镜尺寸和异位的镜头位置。这些形态学改变反映由对比敏感度的显着减少和视力（Schonthaler 等人，2010）。图1显示了差异对比敏感度的保险杠突变体与野生型的兄弟姐妹。 保险杠的突变越来越无法调整眼睛的刺激对比度下降的速度为。通过类推，当刺激空间频率的增加，即降低的刺激条纹宽度， 保险杠的突变体同样演示视力降低（图2） 成年斑马鱼visua的依赖升性能对环境条件的影响通过鱼经受不同的浓度的酒精，在他们的坦克水30分钟，并随后根据不同刺激条件下测量的视动响应。成人斑马鱼显示对比敏感度显着减少时，保持在体内酒精浓度增加（图3）。随着酒精浓度（图4）处理的鱼时，可观察到在很宽的范围内的空间频率类似的剂量依赖性降低眼睛的整体速度。此外，酒精治疗剂量依赖性地减少眼球运动性能更苛刻的任务，例如刺激的速度增加（图5）。 图1。眼睛斑马鱼幼虫的速度是依赖于刺激的对比。 10 保险杠突变体和野生型同胞10分析了在不同s 5的dpf timulus条纹对比度的条件下。图表显示平均眼速度±1 SEM。 图2。斑马鱼幼体眼速度依赖于空间频率。进行10 保险杠突变体和野生型同胞10单丝旦数在5至不同的刺激条纹宽度，并分析所描述。图表显示平均眼速度±1 SEM。 图3。成人斑马鱼显示酒精浓度依赖性降低对比敏感度。成人斑马鱼保持在不同的酒精浓度为30分钟，并表示在不同的刺激条纹对比度条件分析。图表显示的平均时间鼻眼速度±1 SEM组（对照组除外：N = 11）9鱼。 E 4“SRC =”/ files/ftp_upload/3556/3556fig4.jpg“/> 图4。成年斑马鱼秀酒精浓度依赖性降低整体的眼球运动的刺激条纹宽度在很宽的范围内。成人斑马鱼保持在不同的酒精浓度为30分钟，并表示在不同刺激的条的宽​​度条件分析。图表显示的平均时间鼻眼速度±1 SEM组（对照组除外：N = 11）9鱼。 图5。成人斑马鱼秀酒精的刺激速度的宽范围内的整体的眼球运动的浓度依赖性的降低。成人斑马鱼保持在不同的酒精浓度为30分钟，并表示根据不同刺激速度条件下进行分析。图表显示的平均时间鼻眼速度±1 SEM 9鱼组（对照组除外：N = 11）。