リフトバレー熱ウイルスワクチンの安全性および有効性を改善するためのMP - 12株のNSS遺伝子を操作する逆遺伝学を使用して

出血熱、神経疾患やヒトの失明、そして高レートの中絶と反芻動物¹の胎児の奇形を引き起こすリフトバレー熱ウイルス（RVFV）は、選択剤とリスクグループ3の病原体を重ねるHHS / USDAとして分類されている。それは、ブニヤウイルス科の属Phlebovirusに属し、このファミリーの中で最も毒性の強いメンバーの一人です。 RVFV MP – 12ワクチン株^2,3だけでなく、ZH548とZH501を含む野生型RVFV株^4-6、、のためのいくつかのリバースジェネティクスシステムが2006年から開発されている。 MP – 12株は、（リスクグループ2病原体および非選択剤である）のM -およびL -セグメントでいくつかの変異によって高度に弱毒化ですが、それでも機能的な病原性をコード病原性S -セグメントRNA ^3を 、運ぶ要因、NSS。それはとしてeffic複製しながらNSS ORFの欠失、フレームの69％を運ぶrMP12 – C13type（C13type）は、すべての既知のNSSの機能を欠いているIENTは、VeroE6細胞におけるMP – 12は、タイプ- I IFNを欠いていません。 NSSは、インターフェロン（IFN）-βmRNAの^7,8を含むホストの転写のシャットオフを誘導し、翻訳後レベルでの二本鎖RNA依存性プロテインキナーゼ（PKR）の分解を促進する^。9,10 IFN -βの転写であるインターフェロン調節因子3（IRF – 3）、NF – kBからアクチベーター蛋白質1（AP – 1）、およびIFN-alpha/beta受容体へのIFN -βの結合（IFNAR）によって上方制御は、IFN -αの転写を刺激するNSSによるIFN -β遺伝子を含むホストの転写抑制はウイルス複製に応答してそれらのISGsの遺伝子のupregulationsを防ぐ一方で、宿主の抗ウイルス活性を誘導する遺伝子または他のインターフェロン刺激遺伝子^{（ISGs）11、}もののIRF – 3、NF – kBから活性化因子タンパク質- 1（AP – 1）RVFV7によって活性化することができます。 。このように、NSSはさらにMP – 12を減衰させる、およびIFN -β抑制機能を廃止することによって宿主自然免疫応答を高めるために優秀なターゲットです。ここ、我々は組換えMP – 12エンコーディング変異NSSを生成するためのプロトコルを記述し、IFN -βmRNAの合成を抑制する機能を欠いているNSS変異体を同定するためのスクリーニング方法の例を提供しています。自然免疫におけるその重要な役割に加えて、I型IFNは、樹状細胞と適応免疫応答^12-14誘導の成熟にとって重要です。従って、I型IFNを誘導するNSSの変異体は、さらに減衰されますが、同時にそれらのワクチン接種のアプローチのための理想的な候補になる野生型MP – 12、より宿主の免疫応答を刺激するより効率的です。