실험 전이 및 CTL 입양 전송 Immunotherapy 마우스 모델
Özet
종양 세포 – T 세포 상호 작용의 분석을 위해 실험적인 폐 전이와 CTL immunotherapy 마우스 모델<em> 생체내에</em>.
Abstract
실험 전이 마우스 모델은 생리학 관련 아직 간단하고 전이 모델입니다. 종양 세포는 마우스 꼬리 정맥에 (4) 정맥 주사하고 종양 세포 자발적인 전이의 마지막 단계를 닮은, 따라서, 폐 이식과 같습니다 말초 장기의 순환, 넘쳐 흐름과 식민지에서 생존합니다. 말초 기관에서 설립 전이성 종양 : 요법의 목표는 종종 전이의 끝 지점이기 때문에보기의 치료 시점에서 실험적 전이 모델은 가장 간단한 이상적 모델입니다. 이 모델에서, 종양 세포는 마우스 꼬리 정맥에 주입 IV 및 폐의 이식과 성장을 사용할 수 있습니다. 종양 특정 CTLs은 다음 metastases 베어링 마우스에 IV를 주입하고 있습니다. 폐 metastases의 번호와 크기는 주입으로 종양 세포의 수와 종양 성장의 시간에 의해 제어하실 수 있습니다. 따라서, 전이의 여러 단계, 광범위한 전이에 최소한의 전이에서 모델 수 있습니다. 룽 metastases 따라서 쉽게 시각 관측 및 부량를 허용, 잉크와 인플레이션에 의해 분석됩니다.
Protocol
1. 실험 전이 마우스 모델 당일 전에 종양 세포 주사, 최대 1과 씨앗 하나 T75 플라스크 X 10 7 CMS4 – 메트 빠르게 성장하는 종양 세포를 얻기 위해 혈청 10 %를 포함하는 RPMI 매체의 10 ML에 세포를. 37 밤새 품어 ° C. 주사 당일, 미디어를 제거하고 PBS로 세포를 한 번 씻어 후 37 0.05 % 트립신 – EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산)으로 종양 세포를 수확 ° C를 5 분. 10 % 혈청이 포함된 RP…
Açıklamalar
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
국립 보건원 (KL에 CA133085)와 미국 암 협회에서 부여 (KL에 RSG – 09 – 209-01 – TBG) 지원.
Materials
Solutions:
India Ink Solution (17):
- Pour 150 ml of distilled water into a 250 ml flask.
- Add 4 drops ammonium hydroxide to the distilled water.
- Add 30 ml India Ink stock (i.e. Sanford Black Magic Waterproof Drawing Ink 4465 Item 44011) to the ammonia and water mixture.
- Top off with distilled water to a volume of 200 ml. Solution is ready for injection.
Fekete’s Solution (17):
Fekete’s solution is used to bleach India ink-inflated tumor-bearing lungs to distinguish white tumor nodules from the black background of normal tissues.
- Add 350ml 95% EtOH to 1L glass bottle.
- Add 150ml distilled water
- Add 50ml formaldehyde
- Add 25ml glacial acidic acid
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Etiketler
Experimental MetastasisMouse ModelCTL Adoptive Transfer ImmunotherapyTumor CellsIntravenous InjectionTail VeinsLungsMetastasis ModelTherapeutic Point Of ViewEstablished Metastatic TumorDistal OrganLung MetastasesTumor-specific CTLsInjectionColonization And GrowthNumber And Size ControlStages Of MetastasisMinimal MetastasisExtensive MetastasisInk Inflation Analysis
Bu Makaleden Alıntı Yapın
Zimmerman, M., Hu, X., Liu, K. Experimental Metastasis and CTL Adoptive Transfer Immunotherapy Mouse Model. J. Vis. Exp. (45), e2077, doi:10.3791/2077 (2010).