ライトシート顕微鏡サンプル調製:長期イメージングのための生きたゼブラフィッシュ胚の取り付け
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:Icha J.、他の画像 ゼブラフィッシュアイ開発に光シート蛍光顕微鏡を使用して. J. ヴィス・エクス .(2016).
本稿では、光シート蛍光顕微鏡のサンプル調製について説明します。また、生理学的に近い状態で生きている胚の長いタイムラプス映画を記録することを可能にする、長期的なイメージングのために生きているゼブラフィッシュ胚を取り付ける方法を示している。
Protocol
1. サンプルの準備 アガロースミックスの準備 アガロースミックスを作る前の15分、1%低融点アガロース(E3培地に溶解)の1mlアリコートを70°Cに設定した加熱ブロックに溶かします。 アガロースが完全に溶融したら、600 μlを新しい1.5 mlチューブに移し、250 μlのE3培地、0.4%MS-222の50 μl、渦ビーズストック溶液の25 μlを加えます。注: これは混合の925 μlを?…
Materials
| Lightsheet Z.1 microscope | Carl Zeiss Microscopy | ||
| Low melting point agarose | Roth | 6351.1 | |
| Low melting point agarose | Sigma | A4018 or A9414 | |
| Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate (MESAB/ MS-222/Tricaine) | Sigma | E10521 | |
| 20 μl (1 mm inner diameter, marked black) capilllaries | Brand | 701904 | sold as spare part for transferpettor |
| Teflon tip plungers for 20 μl capillarie | Brand | 701932 | sold as spare part for transferpettor |
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Light Sheet Microscopy Sample Preparation: Mounting Live Zebrafish Embryos for Long-Term Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20185, doi: (2023).