Drosophila Aktivite Monitörü (DAM): Sineklerde Lokomotor Aktivitesini Ölçme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Chiu, J.C., vd. Drosophila’daSirkadiyen Ritimleri ve Uyku Parametrelerini Incelemek için Locomotor Aktivitesini Test Etmek. J. Vis. Exp. (2010).
Bu videoda, lokomotor aktivitesini izlemek için kullanılan Drosophila etkinlik monitörü (DAM) sistemi açıklanmaktadır. Araştırmacılar, meyve sineklerindeki sirkadiyen ritimleri incelemek için DAM’dan toplanan aktivite verilerini kullanırlar. Öne çıkan protokol klibi, cihaza sineklerin nasıl yüklendiğini ve sirkadiyen deneyler için etkinlik verilerinin nasıl kaydedildiğini gösterir.
Protocol
Bu protokol, Drosophila,J. Vis. Exp.’de (2010) Sirkadiyen Ritimleri ve Uyku Parametrelerini Incelemek için Locomotor Aktivitesini Test Etmek için Chiu ve ark.’danbir alıntıdır. 1. Sineklerin Aktivite Tüplerine ve Lokomotor Aktivite İzleme Sistemine Yüklenmesi Sinekleri aktivite tüplerine yüklemeden önce, aktivite monitörlerini barındırmak için kullanılacak inkübatörleri açın. İnkübatör kontrollerini kullanarak sıcaklığı ayarlay?…
Representative Results
Şekil 1: Ritmik vahşi tip sineklerin günlük lokomotor aktivite ritimlerini gösteren FaasX kullanılarak oluşturulan baştan çıkarma grafikleri (her bir transgene taşıyan 0 sinek başına w) (A ve B) ve 0 mutant başına aritmik w (C ve D). Erkek sinekler 25 ° C’de tutuldu ve 12:12 LD (açık: karanlık) döngülerinde 4 gün boyunca eğitildi ve ardından DD’de yedi gü…
Materials
| Drosophila activity monitor (DAM) | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | DAM2 or DAM5 | DAM2 monitors are more compact, and more can fit into a single incubator |
| Power supply interface unit (for DAM system) | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | PSIU9 | Includes PS9-1 AC Power Supply |
| Light controller | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | LC6 | |
| Pyrex glass tubes | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | PGT5, PGT7, and PGT10 | |
| Plastic activity tube caps | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | CAP5 | Yarn can be used instead of plastic caps. |
| DAM System data collection software | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | Versions available for both Mac and PC | |
| FaasX software | Centre National de la Recherche Scientifique | Only for Mac | |
| Insomniac 2.0 software | University of Pittsburgh School of Medicine | Runs on Matlab. Can be used on both PC and Macintosh. | |
| Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. Percival incubator | Percival Scientific, Inc. | I-30BLL | Interior space dimension:Width: 65cm;Height: 86cm;Depth: 55cm |
| Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. DigiTherm Heating/Cooling Incubator with Circadian Timed Lighting and Timed Temperature | Tritech Research, Inc. | 05DT2CIRC001 | Interior space dimension:Width: 36m;Height: 56m;Depth: 28cm |
| APC Smart-UPS 2200VA 120V (Emergency power backup unit) | APC | SU2200NET | Output Power Capacity of 1600 Watts |
| Sucrose | Sigma-Aldrich | S7903 | |
| Bacto Agar | BD Biosciences | 214010 | |
| TissuePrep Paraffin pellets | Fisher Scientific | T565 | Melting point 56 °C-57 °C |
| Block heater | VWR international | 12621-014 |
Bu Makaleden Alıntı Yapın
Drosophila Activity Monitor (DAM): A Method to Measure Locomotor Activity in Flies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20148, doi: (2023).