Temperaturgradient assay: Eine Methode, um Temperaturpräferenz in Drosophila Larven zu testen
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. (2018).
Drosophila Fruchtfliegen können kleine Temperaturänderungen unterscheiden und daher Umgebungen mit günstigen thermischen Bedingungen auswählen. Dieses Video beschreibt einen Verhaltenstest, der die Temperaturpräferenz von Drosophila-Larven auf einem linearen thermischen Gradienten testet.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Liu et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Temperaturgradienten-Setup Vorbereiten eines einseitigen Farbverlaufs Um während der Tests eine feuchte Umgebung zu schaffen, legen Sie die beiden Aluminiumblöcke, die mit zwei Wasserbädern verbunden sind, auf nassen Papiertüchern, getrennt durch 10 cm(Abbildung 1…
Representative Results
Abbildung 1: Einzel- und bidirektionale Gradienten-Assay-Setups. (A) Einseitiges Gradienten-Setup mit zwei Aluminium-Assayplatten auf zwei Aluminiumblöcken. Die Temperaturen der Aluminiumblöcke werden durch zirkulierendes Wasser aus zwei Wasserbädern gesteuert. (B) Die Anordnung der drei Aluminiumblöcke, Wasserbäder und einer Aluminiumplatte (250 x 220 mm) für einen bidirektionalen …
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Yorumlar |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Bu Makaleden Alıntı Yapın
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).