형광 현미경 검사법을 위한 곤충 다리 처리: 화상 진찰을 위한 신경 근육 구조물을 보존하는 방법
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: 관, W., 외. 성인 큐티클을 통해 드로소필라 다리 운동 신경 축삭을 시각화. J. 비스 익스펙. (2018).
이 비디오는 이미징 분석을 위해 신경 근육을 그대로 유지하면서 Drosophila 성인 다리를 해부, 수정 및 장착하는 방법을 설명합니다.
Protocol
이 프로토콜은 Guan 외에서발췌한 것입니다., 성인 큐티클을 통해 드로소필라 다리 운동 신경 축삭을 시각화, J. Vis. Exp. (2018). 1. 다리 해부 및 고정 유리 멀티 웰 플레이트를 가지고 70 %의 에탄올로 우물의 적절한 수를 채웁니다. 각 우물에 15-20 CO2-마취파리 (남녀 및 모든 연령)를 추가하고 브러시를 사용하여 파리가 완전히 잠길 때까지 에탄?…
Representative Results
그림 1: 현미경 슬라이드에 다리를 장착하는 절차. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
Materials
| Ethanol absolute | Fisher | E/6550DF/17 | Absolute analytical reagent grade |
| nonionic surfactant detergent | Sigma-Aldrich | T8787 | Triton X-100, for molecular biology |
| Fine forceps | Sigma-Aldrich | F6521 | Jewelers forceps, Dumont No. 5 |
| Glass multi-well plate | Electron Microscopy Sciences | 71563-01 | 9 cavity Pyrex, 100 mm x 85 mm |
| PFA | Thermofisher | 28908 | Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free |
| Glycerol | Fisher BioReagents | BP 229-1 | Glycerol (Molecular Biology) |
| Spacers | Sun Jin Lab Co | IS006 | iSpacer, four wells, around 12 μL working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep |
| Square 22 mm x 22 mm coverslips | Fisher Scientific | FIS#12-541-B | No. 1.5-0.16 to 0.19 mm thick |
| Mounting Medium | Vector Laboratories | H-1000 | Vectashield Antifade Mounting Medium |
Bu Makaleden Alıntı Yapın
Processing Insect Legs for Fluorescence Microscopy: A Method to Preserve Neuromuscular Structures for Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20121, doi: (2023).