라발 림프 선교: 드로소필라 혈청 생성 장기 분리
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: 레이멜스, T. A. 및 Pfleger, C.M. 드로소필라 애벌레의 림프선과 혈구를 검사하는 방법. J. 비스 익스펙. (2016).
이 비디오는 플라이 애벌레에 있는 혈토포이스의 주요 사이트인 Drosophila 림프선에 대해 설명하고 면역 조직 화학 및 형광 화상 진찰을 위해 기관을 해부하고 장착하는 예제 프로토콜을 보여줍니다.
Protocol
이 프로토콜은 레이멜스와 Pfleger에서 발췌, 드로소필라 애벌레에서 림프선과 혈구를 검사하는 방법, J. Vis. Exp. (2016). 1. 라발 림프선 면역 히스토케 참고: 림프선은 등쪽 측의 뇌 아래 약간 아래 애벌레의 전방 끝에서 약 1/3 길이에 위치합니다. (그림 1B에서화살표 참조.) 림프선은 등쪽 ?…
Representative Results
그림 1: 비보 크리스탈 셀 멜라늄화. A) 애벌레는 가열하기 전에 PCR 튜브에 개별적으로 배치되었다. 빨간색 화살표는 튜브의 바닥에없는 애벌레를 나타냅니다. B) 가열 후 전형적인 결정 세포 멜라늄 패턴이 있는데, 이는 때때로 림프선(화살표; 등쪽이 도시됨, 전방이 남습니다)을 드러낸다. …
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| formaldehyde | Fisher | BP531-500 | |
| Triton | Fisher | BP151-500 | |
| Tween 20 | Fisher | BP337-500 | |
| bovine serum albumin | Rocky Mountain Biologicals | BSA-BSH-01K | |
| normal goat serum | Sigma | G9023-10ML | |
| normal donkey serum | Sigma | D9663-10ML | |
| 200 proof ethanol | VWR | V1001 | |
| N-propyl gallate | MP Biomedicals | 102747 | |
| glycerol | VWR | EM-4750 | |
| DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) | Fisher | 62248 | |
| microscope cover glass, 18 mm circular | Fisher | 12-545-100 | |
| glass microscope slides | Fisher | 22-034-980 | |
| 24-well plate | Corning | 351147 | |
| disposable transfer pipet | Fisher | 13-711-9AM | |
| fluorescence microscope | Zeiss | Axio Imager.Z1 |
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Larval Lymph Gland Dissection: Isolating the Drosophila Hemocyte-Producing Organ. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20117, doi: (2023).