Özet

赤血球凝集アッセイを用いて血清の反応性と力価の決定

Published: January 29, 2010
doi:

Özet

赤血球凝集は、抗体が赤血球に結合凝集の形式です。赤血球は、両方とも容易に入手可能であり、結果は容易に肉眼を使って観測している。このビデオでは、結果を解釈し、力価を決定する、赤血球凝集アッセイに必要な手順を示しています。

Abstract

赤血球凝集は凝集の特定の形式であり、抗体が粒子状抗原として​​機能する赤血球、にバインドするときに使用されます。赤血球は、容易に入手できるように特に有用な標的であると凝集は肉眼を用いて観測される。この手法は、一般的に血液型判定およびウイルス定量のために、抗体(Ab)の力価を決定するために使用されます。このビデオでは、赤血球凝集アッセイの準備と実行に必要なステップは、血液型抗原は、赤血球(Revercells)に追加するに特異的な抗体を用いて示されています。抗血清は、シリアルRevercellsの懸濁液を添加された96ウェルU底マイクロタイタートレイ、中に希釈される。サンプルを混合し、その後60分間37℃でインキュベートする。この時間後、次いで、試料を容易にVE、+ VEと中間(-/+)の赤血球凝集反応のために得点することができます。このアプローチは、迅速かつ簡単な手法を用いて評価される血清サンプルの反応性と力価が可能になります。ビデオは、アッセイを変更する方法、力価が決定される方法、結果を読み、どのように解釈されるか、分析の背後にある理論をカバーし、この技術の使用に関連するあらゆる問題になります。

Protocol

5倍のベロナール緩衝生理食塩水の調製(VBS) ベロナール緩衝生理食塩水(VBS)を準備するには、3つの別々のソリューションが用意する必要があります。 蒸留水の350ミリリットルでナトリウムBarbitoneのNaClおよび0.94gmの21.25gmを溶解して溶液1を準備します。 NaClおよびナトリウムBarbitoneの最終濃度は、それぞれ1.02Mと13mmです。 ホット蒸留水の125​​ミリリットルでBarbitone?…

Discussion

赤血球凝集アッセイは、時間の短い期間内に評価される血清サンプルの多数を可能にするとても簡単なテクニックです。それが適している目で、特殊な装置を必要とせずに読み取られるという利点もあります。この手法はまた、赤血球凝集阻害試験の一環として、尿中のヒト絨毛性ゴナドトロピンホルモンの存在の検出のため変更することができます。標準血球凝集試験に関連して、ケアが?…

Acknowledgements

著者は、映画撮影のためのテクニックと氏ポールシェパードを実行するためのミスローラマシューズに感謝したいと思います。このプロジェクトは、南オーストラリア大学、研究室医学のプログラムによって資金を供給された。

Materials

Material Name Tip Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

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Bu Makaleden Alıntı Yapın
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

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