Özet

确定使用血凝检测血清中的反应和滴度

Published: January 29, 2010
doi:

Özet

血凝是抗体结合到红细胞的凝集形成。红血细胞都是现成的,结果很容易用肉眼观察。本视频演示了在血凝实验所涉及的步骤,解释的结果,并确定滴度。

Abstract

血凝是一种特定的凝集的形式,使用时红血细胞,它作为颗粒性抗原抗体结合。红血细胞是特别有用的目标,因为他们都是现成的,是用肉眼观察凝集。这种技术常用来确定的抗体滴度(AB),血型和病毒定量。在这个视频,在编制和执行血凝检测所涉及的步骤演示使用一个抗原添加到红血细胞(Revercells)血型特异性抗体。抗血清稀释96以及U型底酶标托盘,这是增加了一个悬挂的Revercells的。样本混合在一起,然后在37 ° C孵育60分钟。过了这段时间,样品可以很容易地取得VE,+ ve和中间的(-/+)血凝反应。此方法允许使用一个快速和简单的的技术进行评估血清样品的活性和滴度。视频将覆盖检测背后的理论,如何理解和解释的结果是,如何确定滴度是可以修改,如何检测和使用这项技术与相关的任何问题。

Protocol

制备的5倍Veronal缓冲液(VBS) 要准备Veronal缓冲液(VBS),3个单独的解决方案都需要做好准备。 准备通过溶解在蒸馏水350毫升NaCl和0.94gm钠巴比妥21.25gm溶液1。氯化钠和钠巴比妥终浓度分别为1.02M和13MM。 准备通过溶解在热蒸馏水125毫升巴比妥1.44gm溶液2。巴比妥最终浓度62.5mM。 准备通过溶解在蒸馏水100ml 氯化钙氯化镁2和4.41gm 20.33gm溶液3。 2氯化镁…

Discussion

血凝检测是一个非常简单的的技术,允许大量的血清样本,将在很短的时间内评估。它还具有无需要专门的设备读取的优势,与合适的眼睛。这种技术也被修改为检测尿中的人绒毛膜促性腺激素激素,作为一个血凝抑制试验的一部分。在有关标准的血凝试验,有一个需要注意的是为了正确执行检测的几个领域。首先,这项技术是基于一个凹面上的细胞沉淀。因此,至关重要的是,使用一个U型或圆…

Acknowledgements

笔者想感谢劳拉马修斯小姐表演的技巧和摄影郑明牧羊犬。这个项目是由南澳大学,实验室医学程序。

Materials

Material Name Tip Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

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Bu Makaleden Alıntı Yapın
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

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