Imagerie resténose intra-stent: un peu coûteux, modèle fiable et rapide précliniques

Déploiement du stent aortique Des rats Sprague-Dawley pesant 550-600 g sont achetés auprès de Harlan (Indianapolis, IN, USA). Maison des rats dans des conditions classiques, nourris standards pour rats et de l'eau ad libitum. Anesthetize rat avec l'isoflurane (2%) et la kétamine (25 mg / kg). Sous vue microscopique, effectuer une médiane supérieure mini-laparotomie pour exposer l'aorte. Disséquer l'aorte abdominale du tissu environnant, à partir du niveau des artères rénales jusqu'à la bifurcation. ATTENTION: Pas besoin de disséquer l'aorte de la VCI. Utilisez microclamps pour arrêter le flux sanguin aortique. Placez la pince proximale en premier, suivie par la pince distale. Ouvrez l'aorte avec une petite incision transversale et rincer avec de l'héparine de l'aorte (200 unités). L'endothélium aortique est dénudé par le passage d'un cathéter 2-française Fogarty embolectomie artérielle (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA). Utilisez n'importe quelle taille humaine stent entre 8mm et 12mm de longueur et 2,5 mm à 3 mm de diamètre. ATTENTION: Le diamètre du stent ne doit pas dépasser le diamètre du vaisseau de plus de 10% pour éviter une sténose pré-et post-stent. ATTENTION: Ne mettez pas la longueur du stent dans la même étude. Déployer le stent à l'aide de la pression du ballon appropriées pour atteindre le diamètre désiré. L'incision est fermée aortique petits avec des sutures Prolène 9-0 (Ethicon, Norderstedt, Allemagne). Fermer l'incision abdominale en couches avec 4-0 Vicryl sutures course (Ethicon, Norderstedt, Allemagne). Les sutures cutanées devraient encore être supprimés dans les 7-14 jours même quand Viacryl est utilisé. Les animaux ont reçu carprofène (6mg/kg) peropératoire, et Metamizol pendant 7 jours plus dans l'eau potable. Tomographie en cohérence optique (OCT) Imagerie Images OCT sont obtenus avec le système M2 imagerie OCT (LightLab Imaging, Inc, Westford, MA, USA). ImageWire est une sonde d'imagerie pour fournir la lumière pour le tissu et recueillir les signaux. Le ImageWire se compose de 0,006 "(0,15 mm) en fibre optique de base, dans une gaine avec un maximum de 0,019 OD" (0,48 mm). Anesthetize rat avec l'isoflurane (2%) et la kétamine (25 mg / kg). Sous vue microscopique, réaliser une laparotomie médiane de refaire pour exposer l'aorte. Clamp l'aorte proximale et l'artère iliaque deux. Effectuer une artériotomie transversale à l'extrémité distale de l'aorte, rincer avec 1 ml de PBS en utilisant un cathéter 28G et insérer le cathéter OCT et le transmettre dans l'aorte. Motorisé pullback imagerie OCT est effectuée à une vitesse de retrait de 1,0 mm par seconde. Acquérir les images à 15 images par seconde, les images sont affichées avec une couleur look-up table et archivés numériquement. Fermer l'artériotomie. Fermer l'abdomen et des incisions avec des sutures Vicryl 4-0 fonctionnement (Ethicon, Norderstedt, Allemagne). Les sutures cutanées devraient encore être supprimés dans les 7-14 jours même quand Viacryl est utilisé. La formation maximale néointima se développera dans les 6 semaines après l'implantation du stent. Analyser images OCT Mesures PTOM sont effectuées en utilisant l'imagerie OCT de LightLab logiciel propriétaire avec une interface basée sur le rat. Calibrer le système à la réflexion du fil imagerie OCT, qui est la technique standard de calibration pour ce système. Trace lumen et stent section transversale (CSA) manuellement à chaque 1,0 mm d'intervalle. Calcul de la superficie de la Croix-plaque transversale que la CSA stent soustraite de la CSA lumen. Calcul de la superficie de plaque pour cent par CSA plaque divisée par le CSA de stent (%). Calculer la moyenne des zones de plaque pour cent. Validation de la technique octobre Les résultats octobre corrèlent bien avec l'histopathologie (figure 1). CSA plaques histologiques sont calculés comme décrit ci-dessus. Histologie révèle une hyperplasie intimale à forte densité de cellules fusiformes et seulement quelques cellules mononucléaires l'inflammation. Après 6 semaines, les stents sont complètement recouverts de tissu de granulation néointimale et le CSA plaque mesure 1,3 ± 0,4 mm 2 dans un stent de 2,5 mm. Figure 1: OCT (A) et histologiques (B; un grossissement de 16x) des images de la semaine 6 stent après déploiement. Les résultats obtenus à partir de la plaque CSA images OCT corrèlent bien avec l'histopathologie. S'il vous plaît cliquez ici pour voir une version agrandie de la figure 1.