マウス用高架式十字迷路

マウスのゲノムが配列されているが、遺伝子のほとんどの機能は知られていない。遺伝子組み換え技術は、マウスの特定の遺伝子（。。;相葉ら、2007 Austinら、2004）の欠失または他の操作が可能になります。特定の行動上の特定の遺伝子の影響は、変異マウス（;高尾ら、2007。隆夫と宮川、2006B）の行動解析を行うことによって決定することができます。

（;ローリー2007年ロジャースとDalvi、1997）高架式十字迷路試験は、不安のすべての現在利用​​可能な動物モデルの最も人気のある試験の一つです。不安様行動のためのこのテストは、トランスジェニックやノックアウトマウス（ローリー、1999）スクリーニングと表現型のためにと創薬のために使用されています（。ホッグら1996;ローリー、2007）。高架式十字迷路試験は、抗不安薬（; Mechielコルテとデボーア、2003;ローリー2007年ロジャースとDalvi、1997）、スクリーニングのための強力な予測的妥当性を持って、エントリ数には抗不安薬は、特に増加し、不安惹起薬は特に減少開いた腕と時間がそこに過ごした。総エントリーの得点と総距離は一般的な活動の有用な指標とみなされます。総エントリのスコアはまた、不安のインデックスであり、それぞれの腕に費やさエントリと時間の割合は、主要な不安のインデックス（ロジャースとDalvi、1997、Mechielコルテとデボーア、2003）を構成している。オープンとクローズドアームは同じ探索動因を喚起すると考えられている、従ってオープン腕の回避は、恐怖の高いレベル（ロジャースとDalvi、1997）の誘導の結果であると考えられる。それは迷路のオープンアームを探索するマウスの嫌悪感がオープンし、高架スペースの恐怖によって引き起こされると考えられている。

1984年に、ハンドレーとMithaniは、上記の高架X（プラス）迷​​路試験で予備的作業について報告した。オリジナルの試験装置は、床は70センチ上昇し、10cm幅による長い45センチメートルを測定したそれぞれの閉じた2つ、つのオープンアームを、構成されていた。彼らの初期の研究では、彼らは合計/オープンアームのエントリの比率（ハンドリーとMithani、1984）と報告。とマウス（リスター、1987）、その後、他の指標は閉じた状態と開いた腕とラット（ペローとファイル、1986ペローら、1985）のための閉じた状態と開いた腕の中で費やされる時間にエントリの数を含めるが開発されました。

高架式十字迷路テストへの変更は、オープンアーム（50 × 10センチ）と背の高い周囲の壁とクローズドアーム上で開いている屋根付きクローズドアーム（50 × 10 × 40センチ）の両方が長く、そして全体の迷路が上昇したが含まれて50cmの高さ（;ペローとファイル、1986ペローら、1985）へ。現在、当研究室では、高架式十字迷路試験装置は、互いに間で2つのオープンアーム（非常にわずか、0.5センチ、壁と25 × 5 cmの）で、+の形で設定されており、垂直に2つ真鍋ら、2000;宮川ら、2001;シーガーら、2004;森島ら、2005;クローズドアーム（25 × 5 × 16センチ）、そして床上記50センチメートル（宮川ら、1996発生します宮本ら、2005;アローら、2006;服部ら、2007;ニーマンら、2007;佐野ら、2008;堀井ら、2008;福田ら、2008;池田ら、2008）。マウスは、+（5㎝× 5cm）を中央に配置され、自由に迷路を探索するために許可されています。 5分の録音が一般的ですが、動作は、表現型を検出するための機会を増やすために、我々のプロトコルで10分間記録されます。オープンとクローズド上昇武器は探査の競合（;ローリー2007年Mechielコルテとデボーア、2003）を誘導。

高架式十字迷路試験の対策は、実験中に観察者によって記録されます。当研究室では、テストはコンピュータおよび行動データ（画像EP）取得したと画像のEPのプログラムを使用して分析しているために接続したビデオカメラで記録されます。総アームのエントリ数に対するオープンな武器へのエントリ数、およびクローズドアーム対のオープン腕に費やす時間は、不安のような振る舞いの手段を提供します。

我々は映画に示されているプロトコルを使用して、遺伝子組み換え変異マウスの90以上の株を評価し、5000以上のマウス（野生型と変異マウスを含む）のための生データの大きなセットを持っている。我々のテストバッテリーでは、野生型の同腹子は、通常、コントロールとして使用されます。背景の株として、C57BL/6Jマウスが広く用いられている。我々は行動試験でC57BL/6Jマウスのデータを収集した。私たちの高架式十字迷路試験でC57BL/6Jマウスから得られた値は次のとおりです（N = 914、SEMを意味する）、総走行距離：1547.55 14.27センチメートル、費やした時間の長さ：56.49 2.42秒（両手を広げ）、384.02 3.13秒（クローズドアーム）、161.90 2.17の（迷路の中央）、開いた腕に費やされる時間の比率：9.19 0.36パーセント、クローズドアームに費やされる時間の比率：63.82 0.52パーセント、エントリ数：7.64 0.21（開いた腕）、 24.32 0.28（クローズドアーム）;％オープンアームのエントリ：78.1 0.05：21.9 0.05、％は、武器のエントリを閉じた。 C57BL/6Jマウスは、クローズドアームに比べて、オープンの腕の中で少ない時間を費やす（P <0.0001、N = 914、ペア- T TEST）。これは、C57BL/6Jマウスは開いた腕を避ける傾向にあることを示し、そして時間オープンアームで過ごしたが、不安のような振る舞いの有効なインデックスであること。試験番号が開いて腕と中央のプラットフォームに費やされる時間に影響するため、また、臨床試験の順序は、遺伝子型全体で相殺される。つまり、3番目と4番目のマウスの中に、インデックスはすべての増加は、第1マウス（P = 0.0089、N = 476）（未発表データ）と比較。私たちのプロトコルで、以上の1661匹のマウスの解析は、ケージでテストしたマウスの順序が大幅に開いて腕の滞在時間を（未発表データ）に影響しないことを示した。つまり、ケージから取られた最初のマウスの性能は著しく、第二のものから三番目または最後にマウスを違いはありません。

高架式十字迷路試験とダーク/ライト遷移テストは、両方の不安のような動作を評価するために使用され、結果がそれらの間で常に一貫していないですが（ホームズら、2000; Tujimuraら、2008;中島ら、印刷中）例えば、前脳特異的カルシニューリンノックアウトマウスは、光/闇遷移テストに光室での時間の減少量を過ごすが、高架式十字迷路試験（宮川らの開いた腕の中で時間の増加量。 、2003）。私たちの行動テストバッテリーの因子分析では、高架式十字迷路試験とダーク/ライト遷移テストは、そのような不安のような光/闇の遷移テストやオープンスペースで明るい空間不安などの不安のような振る舞いの異なる側面を、評価することを示していますオープンフィールド試験（;山崎ら、2006高尾と宮川、2006B）で動作。したがって、光/闇遷移テストと高架式十字迷路試験の両方は、私たちの行動テストバッテリーに含まれています。

クラッブと同僚は、変異体を特徴づける制御されていない変数との実験は特定の実験室（クラッブら、1999）に固有の結果をもたらす可能性があることを報告した。研究室間に存在する手続き型の違いは難しい複製またはそれらの間で結果を比較すること。プロトコルの視覚的なドキュメントを確立することは研究室間および変異マウスの様々な系統の行動表現型の比較のために使用されるプロトコルの標準化を可能にする、実験手順のより良い理解を促進するこれらのテストを用いて評価。我々は以前にダーク/ライト遷移テスト（高尾と宮川、2006A）の映画のプロトコルを公開。同様に、このようなオープンフィールド試験用など、他のプロトコルの映画、porsoltは水泳試験を強制的に、そして我々は行動テストバッテリーで使用する恐怖条件付け試験は現在、将来のビデオ雑誌記事などの出版物のために作られている。