成体マウスからの網膜色素上皮細胞の単離および培養のための簡易法

網膜色素上皮(RPE)は、光受容体と^脈絡膜の間に位置するブルッフ膜の内側を覆う特殊な細胞単層です1。RPE細胞は、網膜の適切な機能に重要な役割を果たします。RPE細胞は、グルコースとビタミンAを光受容体に輸送し、全トランス網膜の11-cis網膜への再異性化によって視力を促進し、脱落した外側セグメントの食作用を通じて光受容体の外側セグメントを維持し、網膜下空間から水分を除去し、タイトジャンクションの存在を通じて外側の血液網膜バリアを形成し、神経向性成長因子(色素上皮由来因子など)を分泌します。 および基本的な線維芽細胞成長因子)は、光受容体^{をサポートします2}。RPE細胞の機能不全は、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症、糖尿病性網膜症など、さまざまな網膜症の病因に関与しています^3,4,5。RPE細胞を用いたin vitro研究は、これらの疾患の病因の理解を深めるために重要です。RPE細胞株は容易に入手可能ですが、初代RPE細胞の主要な特性を欠いているため、これらの研究には初代RPE細胞が非常に好まれます。

初代RPE細胞の供給源として様々な種が利用されてきたのに対し、マウスには遺伝子改変を利用して網膜症の病因を解明できるという利点があります。げっ歯類からRPE細胞を単離するための前述のプロトコルは、新生児動物の使用を必要とするか、時間がかかるか、技術的なスキルを必要とするか、または培養に適していないかのいずれかである6,7,8,9,10,11,12。私たちは、これらの細胞の高純度培養物を生成する成体マウスからRPE細胞を単離するための簡単で迅速な方法を説明します。