Lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale distale (DIoN-CCI) nei topi per studiare il dolore neuropatico del trigemino
Summary
La lesione cronica da costrizione del nervo infraorbitale distale nei topi induce cambiamenti nel comportamento spontaneo (aumento dell’attività di toelettatura del viso) e nel comportamento nocifensivo in risposta alla stimolazione tattile (iperreattività alla stimolazione dei capelli di von Frey) che sono segni di dolore in corso e allodinia e funge da modello per il dolore neuropatico trigemino.
Abstract
I modelli animali rimangono strumenti necessari per studiare il dolore neuropatico. Questo manoscritto descrive il modello di lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale distale (DIoN-CCI) per studiare il dolore neuropatico trigemino nei topi. Ciò include le procedure chirurgiche per eseguire la lesione da costrizione cronica e i test comportamentali postoperatori per valutare i cambiamenti nel comportamento spontaneo ed evocato che sono segni di dolore in corso e allodinia meccanica. I metodi e le letture comportamentali sono simili al modello di lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale (IoN-CCI) nei ratti. Tuttavia, sono necessari importanti cambiamenti per l’adattamento del modello IoN-CCI ai topi. In primo luogo, l’approccio intra-orbitale è sostituito da un approccio più rostrale con un’incisione tra l’occhio e il cuscinetto dei baffi. L’IoN è quindi legato distalmente al di fuori della cavità orbitale. In secondo luogo, a causa della maggiore attività locomotoria nei topi, consentire ai ratti di muoversi liberamente in piccole gabbie è sostituito dal posizionamento dei topi in dispositivi di contenzione progettati e costruiti su misura. Dopo la legatura DIoN, i topi mostrano cambiamenti nel comportamento spontaneo e in risposta alla stimolazione dei capelli di von Frey che sono simili a quelli dei ratti IoN-CCI, cioè un aumento della toelettatura diretta del viso e iperreattività alla stimolazione dei capelli di von Frey del territorio IoN.
Introduction
Il dolore neuropatico deriva da un danno al sistema nervoso somatosensoriale, che porta a una trasmissione anomala di segnali sensoriali al cervello. Il danno ai nervi somatosensoriali non sempre porta a dolore neuropatico, ma la prevalenza aumenta con la gravità della neuropatia clinica 1,2. I pazienti con dolore neuropatico sperimentano sintomi specifici come sensazioni spontanee (bruciore, formicolio, sensazioni elettriche) e dolore anormalmente intenso o prolungato a stimolazione innocua o nociva che tendono a diventare croniche e resistenti al trattamento con farmaci antidolorifici convenzionali3. Un progresso significativo nel campo della ricerca sul dolore neuropatico deriva dalla scoperta che le legature che si restringono liberamente attorno al nervo sciatico nei ratti portano a comportamenti simili alle condizioni di dolore neuropatico umano4. Gli animali mostrano soglie ridotte al caldo, al freddo e alla stimolazione meccanica e mostrano comportamenti nocifensivi. Nonostante le differenze biologiche intrinseche nell’elaborazione del dolore tra esseri umani e roditori, i modelli animali sono uno strumento prezioso per studiare i meccanismi alla base dello sviluppo del dolore neuropatico e testare le nuove strategie di trattamento proposte.
I paradigmi di test del dolore basati sui riflessi sensoriali sono stati ampiamente utilizzati nei modelli di dolore neuropatico, ma la misurazione del dolore in corso o di altri disturbi frequentemente accompagnati (disturbi del sonno, depressione, ansia) non ha ricevuto sufficiente attenzione considerando che si tratta di sintomi clinici comuni che influenzano la qualità della vita 5,6,7,8 . Il comportamento di toelettatura del viso nei ratti è stato documentato come misura del dolore neuropatico spontaneo a seguito di lesione da costrizione cronica (CCI) del nervo infraorbitale (IoN)9,10. Inoltre, i ratti sviluppano anche iperreattività alla lieve stimolazione tattile del territorio IoN, che è indicativa di allodinia meccanica.
Rispetto ai topi, a causa delle loro dimensioni maggiori, i ratti sono più adatti per le lesioni chirurgiche. Tuttavia, i topi offrono efficienza in termini di costi e spazio e richiedono quantità di farmaci minori. Inoltre, l’avvento della tecnologia transgenica ha ulteriormente incrementato l’uso dei topi11,12. Pertanto, l’obiettivo generale di questa procedura è quello di eseguire una lesione chirurgica del nervo infraorbitale nei topi, simile a quella dei ratti, che induce cambiamenti nel comportamento spontaneo ed evocato per lo studio del dolore neuropatico trigemino.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nei ratti, è stato precedentemente sostenuto che un approccio intra-orbitale all’IoN è preferibile, considerando l’importanza di una muscolatura fine intatta che controlla i complessi modelli di frusta nella discriminazione vibrissotattile e la distanza relativa dell’incisione della linea mediana al territorio del nervo infraorbitale cutaneo10. Altri hanno sostenuto che un approccio distale attraverso un’incisione nella pelle pelosa caudale al cuscinetto vibriss…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gli autori non hanno riconoscimenti.
Materials
| Chromic catgut (6-0) | Dynek | CG602D | ligatures |
| Cotton applicator | Pharmacy | ||
| Digital video camera | Sony | HDR-CX330E | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Duratears | Alcon | 0037-820 | ophthalmic ointment |
| Hooked ligation aid | Fine Science Tools | 18062-12 | |
| Ketalar | Pfizer | ketamine (50 mg/mL) | |
| Operation microscope | Kaps | SOM 62 | |
| Precision cotton swab | Qosina | 10225 | |
| Precision trimmer | Philips | HP6392/00 | |
| Rompun | Bayer | xylazine (2%) | |
| Scissors – blunt tips | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit | Stoelting | 58011 | |
| Vicryl Rapide | Ethicon | MPVR489H | sutures |
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