Summary

小鼠海马体和前额叶皮层中的双重细胞外记录

Published: February 16, 2024
doi:

Summary

该协议概述了使用定制设计的记录设备和电极来记录局部场电位并研究小鼠海马体和前额叶皮层中的信息流。

Abstract

记录局部场电位 (LFP) 的技术是一种电生理学方法,用于测量局部神经元群的电活动。它是认知研究的重要工具,特别是在海马体和前额叶皮层等大脑区域。这些区域之间的双LFP记录特别令人感兴趣,因为它们允许探索区域间信号通信。然而,执行这些记录的方法很少被描述,大多数商业记录设备要么价格昂贵,要么缺乏适应特定实验设计的适应性。本研究提出了一种在小鼠海马体和前额叶皮层中执行双电极 LFP 记录的综合方案,以研究抗精神病药物和钾通道调节剂对这些区域的 LFP 特性的影响。该技术可以测量LFP的特性,包括每个大脑区域内的功率谱以及两者之间的相干性。此外,还为这些实验开发了一种低成本、定制设计的记录设备。总之,该协议提供了一种在不同大脑区域记录高信噪比信号的方法,有助于研究大脑内的区域间信息通信。

Introduction

局部场电位 (LFP) 是指从细胞外空间记录的电活动,反映了一组局部神经元的集体活动。它们表现出多种频率范围,从 1 Hz 的慢波到 100 Hz 或 200 Hz 的快速振荡。 特定频段与学习、记忆和决策等认知功能有关 1,2。LFP 特性的变化已被用作各种神经系统疾病的生物标志物,包括痴呆和精神分裂症 3,4。分析 LFP 记录可以为与这些疾病相关的潜在病理机制和潜在的治疗策略提供有价值的见解。

双 LFP 记录是一种用于测量两个特定大脑区域内部和之间的局部电活动的技术。这种技术提供了一个宝贵的机会来研究不同大脑区域内部和之间发生的错综复杂的神经动力学和信号通信。先前的研究表明,检测单个大脑区域神经元特性的改变可能很复杂,但可以观察到区域间皮层通信的变化 5,6。因此,利用双LFP记录为解决这个问题提供了一种有效的方法。

海马-前额叶连接在调节认知功能方面起着至关重要的作用,功能障碍与各种神经系统疾病有关 7,8。这些区域的双电极记录可以提供有关这些相互作用的信息。不幸的是,关于在这些区域之间执行双电极LFP记录的方法的信息有限。此外,市售的记录设备通常价格昂贵,并且缺乏对特定实验设计的适应性。记录LFP的传统方法涉及使用屏蔽电缆将记录设备连接到植入动物大脑的电极。然而,这种方法容易受到运动伪影和环境噪声的影响,从而影响录制信号的质量和可靠性。

该协议描述了一种在小鼠海马体和前额叶皮层中执行双电极LFP记录的综合程序,使用可以放置在动物头部的低成本定制设计的头部。这些方法使研究人员能够研究两个离散大脑区域内的特定区域振荡模式,并探索这些区域之间的区域间信息交换和连通性。

Protocol

本研究由弗洛里动物伦理委员会(墨尔本大学,编号 22-025UM)根据澳大利亚科学目的动物护理和使用规范批准。从动物资源中心(澳大利亚)获得的 C57BL/6 雄性小鼠(8 周)用于本研究。 1. Headstage设计与制造 注意: 头部舞台 PCB 板是一个紧凑的 14 毫米 x 12 毫米四层板,设计用于直接放置在动物的头部。它使用商用放大器芯片(参见 材料…

Representative Results

此处显示的结果表明,在四组C57BL / 6雄性小鼠(每组n = 8;年龄:8周;体重:24.0±0.42g)中测试的几种药物对局部场电位(LFPs)特性的影响。测试的药物包括抗精神病药物氯氮平、钾通道调节剂 4-氨基吡啶 (4-AP) 和瑞替加滨,以及对照载体生理盐水。 如图 1 所示,将小鼠放置在一个小记录室中,并使用定制设计的头部舞台从海马体 (HIP) 和前额叶皮层 …

Discussion

这里介绍的协议概述了构建定制头台的过程,该头台专门设计用于同时记录海马体(HIP)和前额叶皮层(PFC)中的双重局部场电位(LFP)。该协议中提供的详细步骤为研究人员提供了足够的信息,以彻底检查每个区域内以及HIP和PFC之间的信号通信。

定制设计的头级采用商用放大器芯片。虽然目前的配置支持 8 个通道的记录,但头级可以很容易地适应整个 32 个通道的容量,从?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

这项工作得到了皇家墨尔本医院神经科学基金会(A2087)的支持。

Materials

Brass tube  Albion Alloys, USA Inside diameter of 0.45 mm
Carprofen  Rimadyl, Pfizer Animal Health 
Commercial amplifier chip Intantech RHD 2132
Control board Intantech RHD recording system
Dental cement  Paladur
Heat shrinks Panduit 0.8 mm diameter
M1.2 stainless steel screw Watch tools Clock and watch screw
Multichannel socket connector  Harwin, AU 1.27 mm pitch, PCB socket
PFA-coated tungsten wires  A-M SYSTEMS, USA Inside diameter of 150 µm 
Phosphoric acid-based flux Chip Quik CQ4LF-0.5
Recording software Intantech RHX recording software
Stereotactic Frame World Precision Instruments Mouse stereotactic instrument
Super glue UHU Ultra fast

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Cite This Article
Sun, D., Amiri, M., Weston, L., French, C. Dual Extracellular Recordings in the Mouse Hippocampus and Prefrontal Cortex. J. Vis. Exp. (204), e66003, doi:10.3791/66003 (2024).

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