הערכת ההשפעה של תרופות נוגדות שלשול ותמציות צמחים על Drosophila melanogaster
Summary
כאן, שיטה מתוארת להאכיל Drosophila melanogaster עם תרופות ותמציות צמחים ולהעריך את השפעתם על מערכת העיכול על ידי ניתוח זבובי פירות צואה פיקדונות. הזבובים שטופלו בתרופות יכולים לשמש כמודל למחקר נוסף.
Abstract
כדי לחקור את הפיזיולוגיה של מערכת העיכול האנושית, מדענים ביו-רפואיים הסתמכו על שימוש באורגניזמים לדוגמה. למרות שחוקרים רבים השתמשו בעכברים כמודל לחקר תפקוד המעי, רק דיווחים מעטים התמקדו בדרוזופילה מלנוגסטר (D. melanogaster). בהשוואה לעכברים, לזבובי הפירות יתרונות רבים, כגון מחזור חיים קצר, תחזוקה חסכונית ופשוטה, וללא בעיות אתיות. יתר על כן, הפיזיולוגיה של מערכת העיכול, האנטומיה ומסלולי האיתות של יונקים שמורים מאוד ב-D. melanogaster. תמציות צמחים שימשו באופן מסורתי לטיפול בשלשולים ועצירות. לדוגמה, Psidium guajava (P. guajava) הוא אחד החומרים נוגדי השלשול הידועים ביותר באזורים הטרופיים. עם זאת, אף מחקר לא העריך את ההשפעה של תרופות נוגדות שלשול ומשלשלות ותמציות צמחים ב- D. melanogaster, ועדיין לא ידוע אם השפעות דומות (למשל, מרבצי צואה קטנים יותר, מרוכזים יותר ושופעים פחות במקרה של תרופות נוגדות שלשול) יכולות להתרחש בזבובי הפירות בהשוואה ליונקים. במחקר זה, השפעה נוגדת שלשולים הנגרמת על ידי P. guajava מודגמת בזן D. melanogaster המציג פנוטיפ שלשול. דגימת צואה המיוצרת על ידי זבובים מנוטרת באמצעות מזון בתוספת צבע. פרוטוקול זה מתאר את השיטה המשמשת להכנת מזון עם תרופות, הערכת מרבצי הצואה של זבובים הניזונים מתכשירי מזון אלה, ופירוש הנתונים המתקבלים.
Introduction
מערכת העיכול (GI), המכונה גם מערכת העיכול, אחראית על העיכול והספיגה של חומרים מזינים והפרשת מוצרים לא מעוכלים1. מערכת העיכול חשופה למגוון הפרעות שעלולות לגרום לאי נוחות, כאב ושיבוש בחיי היומיום. הפרעות במערכת העיכול כוללות כאבי בטן ואי נוחות, נפיחות, צרבת, קלקול קיבה או הפרעות בעיכול, בחילות, הקאות, שלשולים ועצירות2. שלשול הוא התסמין השכיח ביותר של הפרעת GI3, והוא מוגדר כמחלה עם לפחות שלושה צואה רופפת ומימית במהלך תקופה של 24 שעות4. שלשול נגרם על ידי מגוון רחב של פתוגנים, כולל חיידקים, וירוסים, טפילים, פטריות, והוא יכול להיגרם גם על ידי תרופות 5,6. ברחבי העולם, שלשול ממשיך להיות הגורם השני לתמותה בקרב ילדים מתחת לגיל5 7. למרות שלשול יכול לפתור את עצמו, זה יכול גם להצביע על מצב בסיסי חמור יותר אם זה נמשך יותר מכמה ימים.
כדי לחקור את מערכת העיכול, חוקרים פונים למודלים של בעלי חיים כגון עכברים, חולדות וחזירים 8,9. עם זאת, השימוש בבעלי חיים אלה יכול להיות יקר וגוזל זמן מכיוון שהם דורשים מתקנים מיוחדים ושיקולים אתיים. מחקרים אחרונים הראו כי D. melanogaster יכול לשמש כמודל לחקר מערכת העיכול ולחקור כמה מנגנונים כגון שמירה על הומאוסטזיס רגנרטיבי, התפתחות הזדקנות החיסון, אובדן תפקוד מחסום אפיתל, ואת הירידה בהומאוסטזיס מטבולי10,11. D. melanogaster, המכונה זבוב הפירות, חולק רמה גבוהה של הומולוגיה גנטית עם בני אדם; מאמינים כי לכ-75% מהגנים של מחלות אנושיות יש הומולוג פונקציונלי בזבוב12. יש להם גם מערכת עיכול פשוטה המורכבת ממעי קדמי, מעי בינוני ומעי אחורי13. D. melanogaster קל לתרבית במעבדה וניתן להנדס גנטית בדרכים שונות14. לכן, שימוש ב- D. melanogaster לבדיקת in vivo הוא כלי רב עוצמה המאפשר לחוקרים לחקור תהליכים ביולוגיים מורכבים בסביבה מבוקרת.
על פי ארגון הבריאות העולמי (WHO), כ -80% מהאנשים החיים במדינות מתפתחות משתמשים ברפואה מסורתית לצורכי הבריאות העיקריים שלהם15. השימוש הגבוה בצמחי מרפא יכול להיות מוסבר בכך שהם זמינים בקלות, זולים, ויש להם מעט תופעות לוואי16. חלקי הצמח העיקריים המשמשים בטיפול צמחי כוללים עלים, קליפה, שורשים, זרעים17 בעוד שיטות ההכנה העיקריות הן עירוי, מרתח ו maceration18. תרופות צמחיות אלה מכילות חומרים פיטוכימיים כגון אלקלואידים, טרפנואידים, פלבנואידים, סטרואידים, טאנינים ופחמימות19, שיש להם השפעות טיפוליות על גוף האדם. אנשים משתמשים במגוון צמחי מרפא לטיפול בהפרעות במערכת העיכול כגון שלשולים, כאבי בטן ודיזנטריה20. לדוגמה, Psidium guajava הוא אחד הצמחים הנפוצים ביותר לטיפול בשלשולים בעולם. בדיקות פרמקולוגיות וקליניות שונות כבר הראו את בטיחותו, מה שהופך אותו מועמד טוב נגד שלשולים לחקור21,22. עם זאת, המגבלות העיקריות של תרופות צמחיות הן חוסר יעילות והערכת בטיחות, כמו גם חוסר מידע מוגדר ומלא על הרכב תמציות צמחים בשימוש23. כדי לאמת את היעילות והבטיחות של תרופות צמחיות, נדרשת גישה שיטתית הכוללת תיקוף ניסיוני וקליני והגישה צריכה להיות נתמכת על ידי מספיק נתונים ממחקרי in vivo ו– in vitro.
כדי להעריך תרופות מסורתיות על יעילותן בטיפול בשלשולים, השימוש בעכברים וחולדות היה דומיננטי בעשורים האחרונים24,25. בשל היתרונות העיקריים שהוזכרו קודם לכן, כלומר, קלות שימוש, זול, לשכפל, שמורות פונקציות ספיגה ועיכול בין זבובים ויונקים, אנו מציעים להשתמש D. melanogaster כמודל להערכת פעילות נוגדת שלשולים של צמחים. הפנוטיפ השלשול ב- D. melanogaster יכול להיות מאופיין במספר תכונות, כולל שפע מוגבר של משקעי צואה, גדלי פיקדון גדולים יותר, צבע בהיר יותר (פחות מרוכז), וחומר צואה גבוה יותר26. ניתן לכמת פנוטיפ זה באמצעות פרמטרים שונים: מספר משקעי צואה, שטח כולל של פיקדונות, בהירות ממוצעת, וצפיפות אופטית משולבת כוללת (IOD). סה”כ IOD מוגדר כתכולת הצבע הכוללת של המרבץ, כלומר סך כל החומר הצואתי המופרש27. בעבר, בדיקה פותחה כדי לנתח פיקדונות צואה של ד melanogaster27,28. בבדיקה זו, הקורא האולטימטיבי של גללים (T.U.R.D.) שימש ככלי ניתוח צואה, המאפשר לבדוק את מספר, גודל וקלילות של משקעי צואה ובכך לפקח על הפיזיולוגיה של המעי של זבובי הפירות. עם זאת, שיטה זו מעולם לא יושמה כדי להעריך את הפנוטיפ השלשול בזבובים. הגן Ion Transport Peptide (ITP) הוא מווסת אנדוקריני חשוב של צמא והפרשה ומשלב הומאוסטזיס מים עם הזנה ב-D. melanogaster. במחקר שנערך לאחרונה, הוכח כי מהירות מעבר המזון במערכת העיכול ותדירות אירועי עשיית הצרכים הופחתו על ידי ביטוי יתר של ITP ועלו על ידי הפלה של ITP. הפנוטיפ האחרון תואר כשלשול על ידי מחברי מחקר זה29.
בפרוטוקול זה, גרסה שונה של בדיקת הפקדת צואה משמשת להערכת ההשפעה של סוכן נוגד שלשולים (כלומר, תמצית עלי גויאבה) על מערכת העיכול של D. melanogaster באמצעות זן ITPi כמודל שלשול. המטרה הכוללת של שיטה זו היא: 1) לספק שיטה קלה ואמינה להערכת ההשפעה נוגדת השלשולים של תרופות ותמציות צמחים, 2) לאפשר גילוי של תרכובות ביו-אקטיביות האחראיות להשפעה נוגדת השלשולים בתמציות צמחים על ידי יישום גישה מונחית ביואקטיביות.
Protocol
Representative Results
Discussion
D. melanogaster מקובל כמודל לתהליכים ביולוגיים שונים בשל הדמיון בגנים בין D. melanogaster לבני אדם36. השימוש ב- D. melanogaster כמודל לחקר מערכת העיכול נפוץ והיישום של T.U.R.D. שימש להערכת מספר, שטח וכמות משקעי צואה. עם זאת, שיטת הזיהוי הפנוטיפית לא שימשה להערכת השלשולים בזבובי פירות. לכן, פרוטוקול זה מציג שיטה חדשה להעריך בערך את נוכחותם של שלשולים על ידי גילוי פיקדונות צואה.
פיקדונות צואה הם אינדיקטור חיוני לתפקוד מערכת העיכול ובריאות37. בהקשר זה, מוצעת שיטה לגידול D. melanogaster על מדיום המכיל תרופות כדי לחקור פרמטרים שונים של משקעי צואה. על ידי מעקב אחר מספר הפיקדונות, ניתן לקבוע את תדירות הצואה ולהעריך אם לתרופה יש השפעה כלשהי על מעבר המעיים. ניתן למדוד את השטח הכולל של הפיקדונות כדי להעריך את הריכוז והדילול של חומר צואתי, שהוא גורם חשוב בקביעת הבריאות הכללית של מערכת העיכול. בנוסף, ניתן להשתמש בצפיפות האופטית המשולבת הכוללת (IOD) כדי לזהות את הכמות הכוללת של חומר צואה הקיים בפיקדונות. פרוטוקול זה מספק שיטה יעילה לסינון והערכה של תרופות, כמו גם תמציות צמחים המשפיעות על מערכת העיכול. כאשר D. melanogaster משמש כאורגניזם מודל, ניתן להעריך את היעילות של תרופות פוטנציאליות, אשר יכול לעזור להאיץ את תהליך גילוי התרופה. על ידי יישום שיטה זו על תמציות צמחים, חוקרים יכולים לעזור לאמת את השימוש בהם כחומרים נוגדי שלשול.
ישנם מספר צעדים קריטיים שיש לקחת בחשבון בעת שימוש בפרוטוקול זה כדי לחקור משקעי צואה ב– D. melanogaster. ראשית, חיוני לחשב את המסה הנדרשת כדי להשיג את הריכוז הרצוי של התרופה בתווך. יתר על כן, חשוב להבטיח מצב הכנה טוב בעת הוספת התרופה למדיום, שכן טמפרטורות גבוהות יכולות לפגוע בתרופה ולהשפיע על עוצמתה. שנית, בחירת נקבות הזבובים חשובה בפרוטוקול זה. חשוב להשתמש בזבובים נקבות בתולות כדי למנוע את ההבדלים בתפוקת הצואה בין נקבות בתולות לנקבות מזווגות. לדוגמה, הכתמים המיוצרים על ידי נקבות בתולות הם עגולים יותר מאשר נקבות מזווגות, ונקבות מזווגות נוטות להפריש יותר חומר צואתי מאשר נקבות בתולות27,28. לכן, מומלץ לאסוף זבובים לפני 8 שעות של eclosion כדי להבטיח כי כל הנקבות שנאספו הן בתולות. בנוסף, הזבובים שנבדקו צריכים להיות חזקים ובריאים, שכן בריאותם יכולה להשפיע על צריכת המזון ותפוקת הצואה. לדוגמה, זבובים בעלי צורה לא תקינה של כנפיים עשויים להתקשות להשיג את המזון. לבסוף, כדי להשתמש ב- T.U.R.D. בהצלחה, גודל הבלוק (פיקסלים) והגדרות ההסטה הם קריטיים. בשל ההבדל בניגודיות האור של התמונות, ייתכן שיהיה צורך לנסות הגדרות שונות כדי להשיג את הזיהוי הטוב ביותר האפשרי של פיקדונות צואה.
למרות שהשיטה המוצגת יעילה, ישנן מספר מגבלות. האחד הוא דיוק ריכוז התרופה בתווך. כמו המדיום מחומם במהלך ההכנה, כמה מים עשויים להתאדות, אשר יכול להשפיע על ריכוז התרופה. מגבלה נוספת היא סריקת צלחות הפטרי. חלקים מסוימים של צלחות פטרי (כלומר, קצוות) אינם נסרקים, וזה עלול לגרום לחישוב שגוי של סך משקעי הצואה. בנוסף, הזבובים אינם מייצרים את אותה כמות של משקעי צואה על הכיסויים העליונים והתחתונים של צלחות הפטרי. מכיוון שהם נוטים לייצר יותר פיקדונות על הכריכה התחתונה, סטיית התקן של הניתוח בין הכריכה העליונה והתחתונה עשויה להיות גבוהה, מה שעשוי להשפיע על דיוק התוצאות.
באמצעות פרוטוקול זה, חוקרים יכולים לחקור שלשולים ב – D. melanogaster. על ידי שינוי המדיום המכיל תרופה, שיטה זו יכולה לשמש לסינון צמחים נוגדי שלשול, אשר מספק גישה חדשנית לגילוי תרופות. רפואה מסורתית ומוצרים טבעיים שימשו במשך מאות שנים לטיפול במחלות שונות, כולל הפרעות במערכת העיכול. על ידי שימוש בפרוטוקול זה כדי להעריך את היעילות של תמציות צמחים על משקעי צואה, ניתן לזהות טיפולים חדשים פוטנציאליים להפרעות בדרכי העיכול ולספק רציונל מדעי לשימוש בהם כתרופות נוגדות שלשול. גישה זו יכולה לספק תרומה רבת ערך לתחום גילוי תרופות ואתנופרמקולוגיה.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים לד”ר מרטינה גליקובה על שסיפקה לנו את זני הדרוזופילה . אנו אסירי תודה לצוות של מישל קרוזטייה-בורדה ומארק האנלין שנתנו משוב על המחקר שלנו ועזרו לנו לשפר את המודל שלנו. ברצוננו להודות לחברת התרופות Napo על שסיפקה לנו את התרופה Crofelemer. המחברים מודים גם לעורך האורח ד”ר Hugues Petitjean על שנתן לנו את ההזדמנות לפרסם פרוטוקול זה. מחקר זה מומן על ידי Agence Nationale de la Recherche (ANR) במסגרת הפרויקט ANR-22-CE03-0001-01.
Materials
| Chemical & Food medium | |||
| Agar | Sigma Aldrich | A7002 | 5 Kg bucket |
| Bromophenol blue | Sigma Aldrich | 34725-61-6 | B5525-25G |
| Corn flour | Nature et Cie | *910007 | 25 Kg bag |
| Crofelemer | Napo pharmaceuticals | – | – |
| Ethanol 96% | – | – | – |
| Loperamide | Sigma Aldrich | L4762 | 5 grams |
| Moldex | VWR | 1.06757.5000 | 5 Kg bag |
| Propionic acid | Dutscher | 409553-CER | 1 Liter bottle |
| Sugar | Pomona EpiSaveurs | 52705 | 1 Kg bag |
| Yeast | Dutscher | 789195 | 10 Kg bag |
| Materials | |||
| Beaker | DWK LIFE SCIENCE | – | 250 mL |
| Centrifugation tube | Eppendorf | 30119401 | Eppendorf tubes 5.0 mL |
| CO2 tank | – | – | – |
| Erlen Meyer flask | – | – | 500 mL (for extraction) |
| Filter paper grade | Whatman | – | 3 mm chr. |
| Flowbuddy socle | Genesis | – | – |
| Flugs Narrow Plastic vials | Genesis | 49-102 | – |
| Flystuff Blow gun | Genesis | – | – |
| Flystuff Ultimate Flypad | Genesis | – | – |
| Flystuff Foot pedal | Genesis | – | – |
| Forceps | Dumostar | 11295-51 | – |
| Graduated cylinder | – | – | 100 mL |
| Inox spatula | – | – | – |
| Micropipette | Eppendorf | 4924000088 | Eppendorf Reference 2 |
| Micropipette tip | Eppendorf | 30000919 | epT.I.P.S. Standard |
| Narrow Drosophila vials | Genesis | 32-120 | – |
| Paintbrush | – | – | – |
| Petri dish | Greiner | 628162 | Size: 60 x 15mm |
| Round-bottom flask | – | – | 500 mL (for evaporation) |
| Thermometer | Avantor | 620-0916 | |
| Whisk | – | – | – |
| Equipments | |||
| Chiller | HUBER | Minichiller | – |
| Heating bath | BÜCHI | B-490 | – |
| Heating plate | BIOBLOCK SCIENTIFIC | – | Magnetic stirrer hot plate |
| Incubator | Memmert | – | HPP110eco |
| Rotary evaporator | BÜCHI | R-200 | – |
| Scanner | Epson | V850 pro | – |
| Shaker | Edmund Bühle | KS 10 | – |
| Stereomicroscope binocular | Zeiss | Stemi 305 | – |
| Vacuum pump | VACUUBRAND | PC500 series | – |
| Vortex mixer | Sigma Aldrich | CLS6776-1EA | Corning LSE vortex mixers |
| Weighing scale | OHAUS Scout | SKX622 | – |
References
- Cheng, L. K., et al. Gastrointestinal system. WIREs Sys Bio Med. 2 (1), 65-79 (2010).
- Greenwood-Van Meerveld, B., Johnson, A. C., Grundy, D. Gastrointestinal physiology and function. Handb Exp Pharmacol. 239, 1-16 (2017).
- Doyle, L. A., et al. A clinicopathologic study of 24 cases of systemic mastocytosis involving the gastrointestinal tract and assessment of mucosal mast cell density in irritable bowel syndrome and asymptomatic patients. Am J Surg Pathol. 38 (6), 832-843 (2014).
- Levine, G. A., Walson, J. L., Atlas, H. E., Lamberti, L. M., Pavlinac, P. B. Defining pediatric diarrhea in low-resource settings. J Pediatric Infect Dis Soc. 6 (3), 289-293 (2017).
- Abraham, B., Sellin, J. H. Drug-induced diarrhea. Curr Gastroenterol Rep. 9 (5), 365-372 (2007).
- Badry, A. H. H., Jameel, A. Y., Mero, W. M. S. Pathogenic microorganisms associated with arrhea in infants and children in Duhok Province, Kurdistan Region / Iraq. Sci J Uni Zakho. 2 (2), 266-275 (2014).
- Manetu, W. M., M’masi, S., Recha, C. W. Diarrhea disease among children under 5 years of age: A global systematic review. Open J Epidemiol. 11 (3), 207-221 (2021).
- Fu, J., et al. Aquatic animals promote antibiotic resistance gene dissemination in water via conjugation: Role of different regions within the zebra fish intestinal tract, and impact on fish intestinal microbiota. Mol Ecol. 26 (19), 5318-5333 (2017).
- Zhang, Q., Widmer, G., Tzipori, S. A pig model of the human gastrointestinal tract. Gut Microbes. 4 (3), 193-200 (2013).
- Cox, C. R., Gilmore, M. S. Native microbial colonization of Drosophila melanogaster and its use as a model of Enterococcus faecalis pathogenesis. Infect Immun. 75 (4), 1565-1576 (2007).
- Jasper, H. Exploring the physiology and pathology of aging in the intestine of Drosophila melanogaster. Invertebr Reprod Dev. 59, 51-58 (2015).
- Pandey, U. B., Nichols, C. D. Human disease models in Drosophila melanogaster and the role of the fly in therapeutic drug discovery. Pharmacol Rev. 63 (2), 411-436 (2011).
- Miguel-Aliaga, I., Jasper, H., Lemaitre, B. Anatomy and physiology of the digestive tract of Drosophila melanogaster. Genetics. 210 (2), 357-396 (2018).
- Jennings, B. H. Drosophila- a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- Kumar, V. S., Navaratnam, V. Neem (Azadirachta indica): Prehistory to contemporary medicinal uses to humankind. Asian Pac J Trop Biomed. 3 (7), 505-514 (2013).
- Shrestha, P., Adhikari, S., Lamichhane, B., Shrestha, B. G. Phytochemical screening of the medicinal plants of Nepal. J Environ Sci Tech Food Tech. 1 (6), 11-17 (2015).
- Perveen, S., Al-Taweel, A. Pharmacognosy: Medicinal Plants. IntechOpen. , (2019).
- Noumi, E., Yomi, A. Medicinal plants used for intestinal diseases in Mbalmayo Region, Central Province, Cameroon. Fitoterapia. 72 (3), 246-254 (2001).
- Njoku, V. O., Obi, C., Onyema, O. M. Phytochemical constituents of some selected medicinal plants. African J Biotechnol. 10 (66), (2011).
- Rokaya, M. B., et al. Traditional uses of medicinal plants in gastrointestinal disorders in. Nepal. J Ethnopharmacol. 158, 221-229 (2014).
- Birdi, T., Krishnan, G. G., Kataria, S., Gholkar, M., Daswani, P. A randomized open label efficacy clinical trial of oral guava leaf decoction in patients with acute infectious diarrhoea). J Ayurveda Integr Med. 11 (2), 163-172 (2020).
- van Vuuren, S. F., Nkwanyana, M. N., de Wet, H. Antimicrobial evaluation of plants used for the treatment of diarrhoea in a rural community in northern Maputaland, KwaZulu-Natal, South Africa. BMC Complement Altern Med. 15, 53 (2015).
- Firenzuoli, F., Gori, L. Herbal medicine today: Clinical and research issues. Evid Based Complement Alternat Med. 4, 37-40 (2007).
- Rawat, P., Singh, P. K., Kumar, V. Evidence based traditional anti-diarrheal medicinal plants and their phytocompounds. Biomed Pharmacother. 96, 1453-1464 (2017).
- Palombo, E. A. Phytochemicals from traditional medicinal plants used in the treatment of diarrhoea: modes of action and effects on intestinal function. Phytother Res. 20 (9), 717-724 (2006).
- Koyama, T., et al. A nutrient-responsive hormonal circuit mediates an inter-tissue program regulating metabolic homeostasis in adult Drosophila. Nat Commun. 12 (1), 5178 (2021).
- Wayland, M. T., et al. Spotting the differences: Probing host/microbiota interactions with a dedicated software tool for the analysis of faecal outputs in Drosophila. J Insect Physiol. 69, 126-135 (2014).
- Cognigni, P., Bailey, A. P., Miguel-Aliaga, I. Enteric neurons and systemic signals couple nutritional and reproductive status with intestinal homeostasis. Cell Metab. 13 (1), 92-104 (2011).
- Gáliková, M., Dircksen, H., Nässel, D. R. The thirsty fly: Ion transport peptide (ITP) is a novel endocrine regulator of water homeostasis in Drosophila. PLoS Genet. 14 (8), 1007618 (2018).
- Chassagne, F., Quave, C. L. Collection, extraction, and in vitro antibacterial evaluation of plants used in traditional medicine. Methods Mol Biol. 2296, 19-41 (2021).
- Patel, T. S., Crutchley, R. D., Tucker, A. M., Cottreau, J., Garey, K. W. Crofelemer for the treatment of chronic diarrhea in patients living with HIV/AIDS. HIVAIDS. 5, 153-162 (2013).
- Cottreau, J., Tucker, A., Crutchley, R., Garey, K. W. Crofelemer for the treatment of secretory diarrhea. Expert Rev Gastroenterol Hepatol. 6 (1), 17-23 (2012).
- Wu, P. E., Juurlink, D. N. Loperamide cardiac toxicity: Pathophysiology, presentation, and management. Can J Cardiol. 38 (9), 1378-1383 (2022).
- Benguettat, O., et al. The DH31/CGRP enteroendocrine peptide triggers intestinal contractions favoring the elimination of opportunistic bacteria. PLoS Pathog. 14 (9), 1007279 (2018).
- Thakare, M. R., et al. Direct intake estimation and longitudinal tracking of solid-food consumption (DIETS) in Drosophila. bioRxiv. , 543033 (2023).
- Miller, J., et al. Drosophila melanogaster as an emerging translational model of human nephrolithiasis. J Urol. 190 (5), 1648-1656 (2013).
- Zierer, J., et al. The fecal metabolome as a functional readout of the gut microbiome. Nat Genet. 50 (6), 790-795 (2018).
