在单个水箱中使用一系列行为测试对成年 Danio rerio 进行神经毒性评估

斑马鱼 （Danio rerio） 是一种流行的模式脊椎动物物种，用于生态毒理学、药物发现和安全药理学研究。斑马鱼成本低廉，分子遗传工具完善，对神经系统形态发生和维持的关键生理过程的保护，使斑马鱼成为神经科学研究的理想动物模型，包括神经行为毒理学^1,2。直到最近，评估化学品神经毒性的主要终点是神经病理学效应的存在。然而，最近，行为终点已被纳入神经毒理学筛查方案，这些功能结果现在通常用于识别和确定化学品的潜在神经毒性 ^3,4。此外，从生态学的角度来看，行为终点具有高度相关性，因为即使是鱼类非常轻微的行为变化也可能危及动物在自然条件下的生存⁵.

成年斑马鱼研究中最常用的行为测定之一是新型水箱测试 （NTT），它测量焦虑样行为 ^6,7。在这种测定中，鱼暴露于新奇事物（鱼被放置在不熟悉的水箱中），轻微的厌恶刺激并观察它们的行为反应。NTT 主要用于评估鱼类的基础运动活动、地质趋向性、冻结和不稳定的运动。飘忽不定的⁸ 的特征是方向的突然变化（锯齿形）和反复的加速（飞镖）。这是一种警报反应，通常在冻结事件之前或之后观察到。冷冻行为对应于鱼在水箱底部时完全停止运动（鳃盖和眼部运动除外），这与镇静引起的不动不同，镇静引起的不动会导致运动减退、运动不能和下沉⁸.冻结通常与高度压力和焦虑状态有关，也是顺从行为的一部分。複雜行為是動物焦慮狀態的极好指標。NTT 已被证明对药理学和遗传操作敏感⁹，使其成为研究焦虑和相关疾病的神经基础的宝贵工具。

斑马鱼是一种高度社会化的物种，因此我们可以测量广泛的社会行为。浅滩试验 （ST） 和社会偏好试验 （SPT） 是评估社会行为最常用的检测方法¹⁰.ST 通过量化鱼类的空间行为和运动模式来测量鱼类组合在一起的趋势¹¹。ST 可用于研究群体动态、领导力、社会学习和理解许多鱼类的社会行为¹².成年斑马鱼的SPT改编自Crawley对小鼠¹³的社交新奇性测试的偏好，并迅速成为研究该模型物种¹⁴中社会互动的流行行为测定。这两种测试也适用于药物筛选分析，并显示出识别调节社会行为的新化合物的希望^15,16。

一般来说，成年斑马鱼的行为测定是强大的工具，可以提供有关活性化合物和滥用药物的行为机制或神经表型的宝贵信息¹⁷。该协议详细说明了如何使用基本材料资源实现这些行为工具⁷ ，以及如何将它们应用于毒性测定以表征各种神经活性化合物的作用。此外，我们将看到，相同的测试可用于评估急性暴露于神经活性化合物（甲基苯丙胺）的神经行为影响，也可以表征长期暴露于环境浓度的杀虫剂（草甘膦）后的这些影响。