Modelagem da Esclerose Múltipla em Dois Sexos: Encefalomielite Autoimune Experimental Induzida por MOG_35-55

A esclerose múltipla (EM) é uma doença inflamatória crônica autoimune que afeta o sistema nervoso central (SNC). Mostra a presença de infiltração perivascular de células inflamatórias, desmielinização, perda axonal e gliose¹. Sua etiologia permanece desconhecida e seus aspectos clínicos, radiográficos e patológicos sugerem notável heterogeneidade na^doença2.

Devido à sua etiologia e complexidade desconhecidas, até o momento, nenhum modelo animal recapitula todas as características clínicas e radiológicas apresentadas na EM humana ^3,4. No entanto, vários modelos animais são empregados para estudar diferentes aspectos da SM ^3,4. Nesses modelos, o início da doença é tipicamente extremamente artificial, e o período de tempo do início dos sinais clínicos é diferente entre humanos e camundongos. Por exemplo, em humanos, os processos fisiopatológicos subjacentes à doença não são detectados por anos antes do início das manifestações clínicas. Por outro lado, os experimentadores podem detectar sintomas em modelos animais dentro de semanas ou até dias após a indução da SM⁴.

Três modelos animais básicos produzem as características da desmielinização características da EM: os induzidos por vírus (por exemplo, o vírus da encefalomielite murina de Theiler), os induzidos por agentes tóxicos (por exemplo, cuprizona, lisolecitina) e as diferentes variantes da encefalomielite autoimune experimental (EAE)⁵. Cada modelo ajuda a estudar algumas facetas específicas da doença, mas nenhuma replica todas as características da EM⁶. Assim, é fundamental a escolha do modelo correto considerando as necessidades experimentais específicas e as questões científicas a serem abordadas.

Graças aos procedimentos de imunização contra antígenos derivados da mielina, o EAE é induzido pelo desencadeamento de uma resposta autoimune aos componentes do SNC em camundongos suscetíveis. A interação entre uma ampla gama de mecanismos imunopatológicos e neuropatológicos causa o desenvolvimento das principais características patológicas da EM (isto é, inflamação, desmielinização, perda axonal e gliose) nos camundongos imunizados ^7,8. Os camundongos começam a apresentar sintomas clínicos por volta da segunda semana após a imunização e geralmente apresentam paralisia ascendente da cauda para o membro e membro anterior. O escore clínico (isto é, a quantificação do acúmulo de déficits relacionados à doença) é geralmente avaliado por meio de uma escala de 5^pontos7.

A imunização ativa com proteína ou peptídeo ou a transferência passiva de células T encefalitogênicas podem ser usadas para induzir EAE em camundongos com diferentes origens genéticas (por exemplo, SJL/J, C57BL/6 e camundongos não obesos-diabéticos (NOD). A proteína proteolipídica da mielina (PLP), a proteína básica da mielina (MBP) e a glicoproteína oligodendrócita da mielina (MOG) são exemplos de proteínas do auto-SNC a partir das quais os imunógenos são usualmente produzidos. Particularmente, camundongos SJL/J imunizados com o epítopo imunodominante de PLP (PLP_139−151) desenvolvem um curso de doença remitente-recorrente (RR), enquanto camundongos C57BL/6J imunizados com o peptídeo MOG_35-55 imunodominante apresentam EAE de natureza crônica¹. Apesar de algumas limitações, como fornecer poucas informações sobre a progressão da SM, o papel das células B na doença, os mecanismos de dentro para fora ou dificuldades no estudo da remielinização, os modelos EAE têm contribuído enormemente para a compreensão dos processos autoimunes e neuroinflamatórios, aumentando o conhecimento no campo da EM e, assim, permitindo o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas para essa doença^{4, 6º}.

No presente trabalho, focamos em uma forma particular de EAE ativo, a forma induzida pelo peptídeo glicoproteico 35-55 (MOG_35-55) 9,10,11,12. O EAE induzido pelo MOG_35-55 modela uma forma crônica de EM. Após a imunização, os camundongos passam por uma fase assintomática na primeira semana após a imunização, então a doença geralmente surge durante a segunda semana após a imunização, enquanto entre a terceira e a quarta semanas após a imunização, a doença torna-se crônica, sem possibilidade de recuperação completa dos déficits acumulados ^7,8,13. Curiosamente, não há diferenças entre homens e mulheres na incidência, início, curso ou progressão da doença na maioria dos estudos presentes na^literatura14, mesmo que menos estudos comparem a doença em homens e mulheres.

Em contraste, em humanos, esses parâmetros são conhecidos por serem fortemente dimórficos^sexualmente2. A SM afeta mais mulheres do que homens; no entanto, os homens geralmente desenvolvem uma forma mais agressiva da doença². Essas evidências sugerem um papel essencial, bem como complexo, dos hormônios gonadais¹⁵; No entanto, o papel e o mecanismo de ação dos hormônios sexuais na patologia permanecem obscuros. Além disso, dados de modelos animais apoiam a ideia de que tanto estrógenos quanto andrógenos exercem efeitos positivos em diferentes tratos da patologia de forma específica por sexo^16,17.

Alguns estudos também sugerem efeitos neuroprotetores, promielinizantes e anti-inflamatórios da progesterona¹⁸ e, embora as evidências em pacientes com EM sejam escassas¹⁸, esteroides neuroativos (ou seja, esteroides sintetizados de novo pelo sistema nervoso, como pregnenolona, tetrahidroprogesterona e diidroprogesterona) também podem afetar o curso patológico¹⁹. Coletivamente, esses dados apoiam a ideia de que os hormônios sexuais produzidos tanto perifericamente quanto dentro do SNC têm um papel importante e específico do sexo no início e progressão da doença. Portanto, no presente trabalho, pedimos a coleta de dados separados de animais machos e fêmeas.

Do ponto de vista histopatológico, a substância branca da medula espinhal é o principal sítio de lesão do SNC nesse modelo, que se caracteriza por regiões multifocais e confluentes de infiltrado inflamatório mononuclear e desmielinização8. Assim, ao descrever este protocolo para a indução de EAE induzida por MOG_35-55 em camundongos C57BL/6J, levaremos em consideração o desfecho da doença nos dois sexos e forneceremos alguns insights histopatológicos em relação à medula espinhal.