Summary

Dissection et classification du développement ovarien chez les insectes femelles de type sauvage

Published: July 14, 2023
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Summary

Le protocole démontre une méthode de dissection simple et facile, adaptée aux insectes femelles migrateurs de type sauvage capturés avec des pièges à projecteurs. Cette technique permet d’éclaircir de manière significative la même espèce en comparant les deux tissus reproducteurs, à savoir le sac d’accouplement et le développement ovarien d’insectes femelles de type sauvage.

Abstract

Les insectes migrateurs nuisibles posent de sérieux défis à la production alimentaire et à la sécurité dans le monde entier. Les ravageurs migrateurs peuvent être surveillés et capturés à l’aide de pièges à projecteurs. L’une des techniques les plus importantes pour la prévision des ravageurs migrateurs consiste à identifier les espèces migratrices. Cependant, dans la plupart des cas, il est difficile d’obtenir l’information simplement par l’apparence. Par conséquent, l’utilisation des connaissances acquises par l’analyse systématique de l’appareil reproducteur femelle peut aider à comprendre la morphologie anatomique combinée du sac d’accouplement ovarien et de la classification du développement ovarien des insectes migrateurs de type sauvage capturés avec des pièges à projecteurs. Pour démontrer l’applicabilité de cette méthode, l’état de développement ovarien et les stades de développement des grains d’œuf ont été directement évalués chez Helicoverpa armigera, Mythimna separata, Spodoptera litura et Spodoptera exigua pour l’anatomie ovarienne, et les sacs d’accouplement ovariens ont été étudiés chez Agrotis ipsilon, Spaelotis valida, Helicoverpa armigera, Athetis lepigone, Mythimna separata, Spodoptera litura, Mamestra brassicae et Spodoptera exigua, pour explorer leurs relations. Ce travail montre la méthode de dissection spécifique pour prédire les insectes migrateurs de type sauvage, en comparant le système reproducteur unique de différents insectes migrateurs. Ensuite, les deux tissus, à savoir l’ovaire et les sacs d’accouplement, ont été étudiés plus en détail. Cette méthode permet de prédire la dynamique et le développement structurel des systèmes reproducteurs chez les insectes migrateurs femelles de type sauvage.

Introduction

La migration des insectes joue un rôle essentiel dans la dynamique des populations de la distribution mondiale des insectes comme Helicoverpa armigera – le ver de la capsule du cotonnier, Mythimna separate – la chenille légionnaire orientale, Spodoptera litura – la chenille du taro, Spodoptera exigua – la chenille légionnaire de la betterave, qui ont été signalés comme des ravageurs graves en Chine 1,2,3,4 . Les longues distances parcourues, les déplacements saisonniers, la forte fécondité des ravageurs migrateurs et les facteurs écologiques ont rendu très difficiles la prévision, la prévision et la lutte contre ces ravageurs5. La surveillance de la migration des ravageurs est nécessaire pour révéler l’adaptabilité et les changements de comportement qui facilitent les ravageurs migrateurs en fonction des changements climatiques ou des cycles6. Pour soutenir leur croissance, leur reproduction et leur survie, les insectes ont acquis une adaptabilité séquentielle au cours de l’évolution ; Cette série de vie adaptative a généré de nombreux changements dans le système reproducteur, tels que la stratégie migratoire conduisant au contrôle du développement ovarien dans le long processus migratoire.

Le développement ovarien est fréquent chez les ravageurs migrateurs, ce qui affecte la croissance de leur population7. Par conséquent, le développement ovarien est un sujet brûlant de la recherche sur les ravageurs migrateurs depuis longtemps. Une série d’études a conduit à plusieurs indicateurs de développement ovarien et à des stratégies de classification. Jusqu’à présent, plusieurs méthodes ont été utilisées pour analyser le développement des ovaires, par exemple, Loxostege sticticalis – le développement de l’ovaire de la teigne des prés – qui comprend le stade initial de plumage, le début de la période de frai, la période de frai et la fin de la ponte8. Certains chercheurs divisent les niveaux ovariens sur la base du développement de la couleur du vitellus chez les lépidoptères migrateurs, tels que S. exigua – la chenille légionnaire de la betterave, Pseudaletia unipuncta – la vraie chenille légionnaire, et Cnaphalocrocis medinalis – la plieuse des feuilles de riz, etc.9,10,11,12. Dans des études antérieures, les niveaux de développement ovarien des ravageurs, tels que le ver de la capsule du coton et la tordeuse du riz, ont été divisés en cinq stades : le stade de ponte du vitellus, le stade de maturité du grain d’œuf, l’attente de naissance mature, la période d’ovogenèse maximale et le stade de frai final13,14. Le développement ovarien de la pyrale du maïs a été divisé en six stades de développement : le stade de ponte du vitellus, le stade de maturation des œufs, l’élimination des œufs avant les œufs, le stade de frai maximal et le stade de fraifinal 15.

De plus, les insectes d’un même genre ont différents stades de développement, tels que les niveaux de développement ovarien de Spodoptera frugiperda – la chenille légionnaire d’automne – se répartissent en quatre niveaux : le stade de ponte vitellin, l’attente mature de la livraison, le pic de ovi-positivité et le stade de frai final16. D’autre part, le développement ovarien chez Spodoptera exigua – la teigne de la betterave – comporte cinq niveaux : transparent, vitellogenèse, maturation des œufs, libération des œufs et ponte tardive17.

Les études antérieures ne peuvent classer le développement d’un seul à plusieurs niveaux de développement ovarien qu’en utilisant la maturité de la couleur du vitellus, de la ponte et du développement des œufs, mais la classification ne peut pas être effectuée sur la base de l’anatomie du système reproducteur. Le développement d’un ovaire basé sur l’anatomie de la morphogenèse est un domaine moins étudié. Ici, la méthode de dissection a été conçue pour prédire les femelles migratrices dans la population à l’aide de deux types de tissus ovariens, afin d’élaborer leur dynamique de reproduction en fonction de la morphogenèse anatomique du stade de développement ovarien et du sac nuptial, fournissant des preuves directes pour distinguer les femelles migratrices de type sauvage.

Certaines études ont montré que les espèces migratrices d’insectes Noctuidae étaient fréquemment capturées par les projecteurs18. L’ovaire de la plupart des espèces migratrices d’insectes Noctuidae est aux premiers stades de développement au cours de la phase initiale de migration et le niveau ovarien augmente avec les progrès migratoires. Dans cette étude, la méthode de dissection pour les grades de développement ovarien est décrite, afin d’étudier les deux tissus reproducteurs de différents ravageurs de la population femelle, capturés par la lumière de recherche. Cette méthode permet non seulement de faire progresser la recherche pour comprendre la dynamique migratoire, mais aussi de faciliter la classification des insectes, l’étude de la physiologie des insectes, la prédiction des ravageurs et la prévision des espèces de ravageurs femelles.

Protocol

REMARQUE : Faites attention aux mesures de sécurité avant de piéger des insectes migrateurs de type sauvage, il est suggéré de porter un équipement de sécurité (gants, chemises à manches longues et lunettes de protection). Éteignez également le piège lorsqu’il n’est pas utilisé pour éviter d’autres risques pour la sécurité et la surchauffe de la lumière. Il est important de suivre les protocoles de sécurité avant la dissection, tels que le port de gants, de lunettes de protection et de blouse de…

Representative Results

Développement des oeufsLe protocole ci-dessus a été appliqué pour analyser le développement des ovules dans l’ovaire. À cette fin, tout d’abord, les œufs ont été classés en quatre stades afin de distinguer les stades précoces et matures du développement des œufs parmi toutes les espèces, par exemple le ver de la capsule, la chenille légionnaire, la chenille du taro et la teigne de la betterave. Ici, le stade précoce du plumage (stade transparent blanc laiteux) a été observé. <s…

Discussion

Les méthodes d’analyse ovarienne sont couramment utilisées dans la protection des plantes, pour élucider le mouvement du vol et de la population d’insectes afin de prévoir 19,20,21 et pour élaborer sur les variations physiologiques chez les insectes. Il a été remarqué que la migration unique et la capacité de dispersion rapide des ravageurs agricoles courants, tels que le ver de la capsule, la chenille légionnaire,…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette étude a été soutenue par le grand projet d’innovation scientifique et technologique (2020CXGC010802).

Materials

Digital camera Canon ( China ) co., LTD EOS 800D
Dropper Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Ethanol absolute (99.7%) Shanghai Hushi Laboratory Equipmentco., LTD
Forceps  Vetus Tools co., LTD ST-14
GT75 type halogen headlamp (1000 W) Shanghai Yadeng Industry co., LTD
Helicoverpa armigera, Mythimna separate, Spodoptera litura, Spodoptera exigua Jiyang district, Jinan city, Shandong province, China
Measuring cylinder, beaker, flask Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Net bag  Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD 0.5 m 
Net cages  Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD 30 cm x 30 cm
Petri dishes Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD  60 mm diameter

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Sindhu, L., Guo, S., Song, Y., Li, L., Cui, H., Guo, W., Lv, S., Yu, Y., Men, X. Dissection and Grading of Ovarian Development in Wild-Type Female Insects. J. Vis. Exp. (197), e65644, doi:10.3791/65644 (2023).

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