El presente protocolo describe una visión paraesternal modificada de eje largo para una localización rápida y precisa de la arteria descendente anterior izquierda. Este enfoque está diseñado para ser más simple y fácil de usar, al tiempo que facilita el examen de los cambios dinámicos en la reserva de flujo coronario después de la isquemia-reperfusión miocárdica en ratones.
Después de la isquemia cardíaca, a menudo no hay suficiente perfusión miocárdica, incluso si el flujo se ha restablecido con éxito y por completo en una arteria aguas arriba. Este fenómeno, conocido como “fenómeno sin reflujo”, se atribuye a la disfunción microvascular coronaria y se ha asociado con malos resultados clínicos. En la práctica clínica, la reducción de la reserva de flujo coronario (CFR) se utiliza con frecuencia como indicador de enfermedad de las arterias coronarias. La CFR se define como la relación entre la velocidad máxima del flujo inducida por factores farmacológicos o metabólicos y la velocidad del flujo en reposo.
Este protocolo se centró en evaluar los cambios dinámicos en la CFR antes y después de la isquemia-reperfusión (IR) mediante mediciones Doppler de ondas de pulso. En este estudio, los ratones normales mostraron la capacidad de aumentar la velocidad máxima del flujo sanguíneo coronario hasta dos veces más que los valores en reposo bajo la estimulación con isoflurano. Sin embargo, después de la isquemia-reperfusión, la CFR a 1 h disminuyó significativamente en comparación con el valor basal preoperatorio. Con el tiempo, el CFR mostró una recuperación gradual, pero se mantuvo por debajo del nivel normal. A pesar de la preservación de la función sistólica, la detección precoz de la disfunción microvascular es crucial, y el establecimiento de una guía práctica podría ayudar a los médicos en esta tarea, al tiempo que facilita el estudio de la progresión de la enfermedad cardiovascular a lo largo del tiempo.
La enfermedad coronaria es una de las principales causas de mortalidad en todo el mundo1. Incluso cuando la arteria coronaria culpable se reabre a través de una intervención coronaria percutánea primaria (ICP) después de la isquemia cardíaca, la perfusión microvascular coronaria a menudo permanece disminuida. Además, no hay garantía de reperfusión en los capilares posteriores que irrigan el miocardio1. Este fenómeno, conocido como “fenómeno sin reflujo”, está relacionado con la progresión clínica y un mal pronóstico. En consecuencia, lograr un reflujo microvascular adecuado después de una terapia de reperfusión exitosa se vuelve crítico para el rescate miocárdico. Por lo tanto, la evaluación temprana de la función microvascular después de la revascularización es crucial para las prácticas clínicas.
Para evaluar la función microvascular se pueden emplear diversas técnicas, como la guía invasiva de temperatura/presión intracoronaria para el índice de resistencia microcirculatoria (IMR) y resistencia microvascular hiperémica (HMR), la resonancia magnética cardiovascular (RMC) no invasiva, la tomografía computarizada por emisión de fotón único (SPECT) y la tomografía por emisión de positrones (PET)2. Sin embargo, estos métodos son invasivos o semiinvasivos, caros y, a menudo, no están fácilmente disponibles, lo que limita su utilidad clínica. Por otro lado, la evaluación de la reserva de flujo coronario (RCF) mediante ecocardiografía Doppler transtorácica ofrece un abordaje no invasivo, relativamente sencillo y costo-efectivo sin exponer a los pacientes a radiaciones ionizantes, como se observa en otros métodos3.
Aunque estudios anteriores han empleado la ecocardiografía Doppler transtorácica para medir la CFR en ratones y ratas, los operadores siguen teniendo dificultades para localizar los complejos ángulos entre la plataforma, los ratones y la sonda. Este protocolo supera este problema al proporcionar un método más fácil para localizar la arteria coronaria descendente anterior (LAD) izquierda y medir la CFR rápidamente utilizando la vista paraesternal modificada de eje largo (PLAX).
Además, la CFR obtenida en la arteria relacionada con el infarto (IRA) distal a la lesión culpable ha mostrado una fuerte correlación con el estado de perfusión evaluado por ecocardiografía con contraste miocárdico (ECM)4. También se ha identificado como un marcador predictivo de viabilidad y recuperación de la función ventricular izquierda (VI) después de un infarto agudo de miocardio (IAM)5. Además, se ha establecido que la CFR es un marcador fiable de mortalidad por todas las causas y resultados cardiovasculares adversos 6,7. Informes previos han descrito el uso de la ecocardiografía para evaluar la CFR en modelos de infarto de miocardio en ratas8. Sin embargo, la CFR en la etapa temprana de la isquemia-reperfusión no ha sido estudiada a fondo. Por lo tanto, este estudio proporciona un valor de referencia para el diagnóstico de la disfunción microvascular y la evaluación del efecto terapéutico de la isquemia-reperfusión mediante pruebas dinámicas en ratones IR en la etapa temprana de la reperfusión.
Este estudio presenta un protocolo que utiliza una vista de eje largo paraesternal modificada para evaluar dinámicamente la CFR después de la isquemia-reperfusión. Los principales hallazgos indican una disminución significativa de la CFR en ratones IR, con la reducción más pronunciada observada 1 h después de la reperfusión. Sin embargo, la función cardíaca no se vio afectada en 48 h.
La CFR sirve como indicador del suministro de sangre miocárdica, ofreciendo un enfoque no invasivo para evaluar tanto la estenosis de las arterias coronarias como la circulación microvascular coronaria. Estudios clínicos han demostrado que valores más bajos de CFR se asocian con peores pronósticos 14,15,16, y se ha establecido un valor de corte de CFR de 1,75 como óptimo para la estratificación del riesgo 14. Un metaanálisis reciente mostró además que el riesgo de muerte aumenta en un 16% por cada disminución de 0,1 unidades en la CFR, lo que indica que la CFR representa un continuo de riesgo, con niveles más bajos que predisponen a los pacientes a peores resultados clínicos17. En este estudio, la CFR mostró una tendencia creciente con la extensión del tiempo de reperfusión, pero se mantuvo más baja que antes del procedimiento, enfatizando la importancia del seguimiento de los pacientes no solo inmediatamente después de la apertura del vaso culpable a través de la ICP, sino también a las 48 h. Además, la CFR sirve como medida de la disfunción microvascular coronaria, integrando los efectos hemodinámicos de la enfermedad focal, difusa y de pequeños vasos sobre la perfusión del tejido miocárdico18. Por lo tanto, la CFR es una técnica no invasiva crucial para el diagnóstico de enfermedades microvasculares coronarias. Dado que la CFR sobre la DA es un indicador fuerte e independiente de mortalidad 6,7, este estudio tiene como objetivo proporcionar valores de referencia para la toma de decisiones clínicas. Además, el uso de máquinas de ultrasonido puede reducir potencialmente la necesidad de angiografía coronaria en un entorno de contención de costos de atención médica. Mediante la capacitación y la actualización adecuadas de la tecnología, la estratificación del riesgo se puede adaptar a las necesidades individuales de los pacientes.
La vista PLAX modificada ofrece una mayor comodidad y ahorro de tiempo para los investigadores científicos. La mejora continua de esta tecnología facilitará su aplicación más amplia en otras enfermedades microvasculares coronarias. Los pasos clave de este protocolo incluyen la visualización de la arteria coronaria y la obtención de imágenes de alta calidad de la velocidad de PW. La velocidad del flujo sanguíneo aumenta gradualmente con el aumento de la concentración de anestésico, por lo que se recomienda la captura continua para evitar perder la velocidad máxima del flujo sanguíneo. Dado que el aumento de la concentración de anestésico puede alterar la frecuencia cardíaca, se recomienda volver brevemente al modo Doppler color durante la medición para garantizar una posición constante antes y después de la medición.
Es esencial reconocer las limitaciones, incluidas las limitaciones inherentes a la medición ecográfica de la CFR. Debido a la curvatura de la arteria coronaria, no es posible visualizar toda la arteria en su totalidad, lo que lleva a la medición en un solo segmento. Los operadores deben tratar de medir el comienzo de la arteria coronaria para identificar el punto de velocidad máxima del flujo sanguíneo coronario con la mayor precisión posible. Además, lo ideal es determinar la CFR en función de los cambios en el volumen del flujo sanguíneo coronario, pero este estudio utiliza la velocidad del flujo sanguíneo en lugar del volumen del flujo sanguíneo, pasando por alto el efecto del diámetro de los vasos. Sin embargo, estudios previos han demostrado una fuerte correlación entre la CFR y la CFVR (reserva de velocidad de flujo coronario)19. La investigación adicional sobre la función microvascular coronaria puede ayudar a comprender las complejas alteraciones de la isquemia y mejorar nuestra comprensión de la disfunción microvascular coronaria.
The authors have nothing to disclose.
Este trabajo contó con el apoyo de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (Subvención Nº 82270352), el Proyecto de Investigación Clínica de la Construcción de la Sala de Investigación de Beijing (2022-YJXBF-04-03), la Financiación Nacional de Investigación Clínica de Hospitales de Alto Nivel (2022-NHLHCRF-YSPY-01), los Fondos de Capital para la Mejora de la Salud y la Investigación (Nº 2022-1-4062), el Programa Nacional de Construcción de Disciplinas de Especialidades Clínicas Clave (Subvención Nº 2020-QTL-009) y la Fundación de la Sociedad China de Cardiología (No. CSCF2021B02).
5-0 silk suture | Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd. | 210322 | |
C57 mice | Peking University Health Science Center Department of Laboratory Animal Science | ||
Depilating agent | Nair | NAR-255-1 | |
Electrode gel | Cofoe | ||
High Frequency Ultrasound | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Vevo3100 | |
Isoflurane | REWARD | R510-22-10 | |
Linear array high frequency transducer | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | MS550 | |
Rodent Ventilator | Shanghai Alcott Biotech | ALC-V9 | |
Small Animal Anesthesia Machine | REWARD | R530 | |
SPSS | IBM Corp, Armonk, NY, USA | version 23.0 | statistical analysis software |
Ultrasound Gel | Cofoe | ||
Vevo Lab Software | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Verison 5.7.0 |