מודל מכרסם יילוד של הזרקת ורידים רטרואורביטלית

פרוטוקול זה מספק שיטה ברורה ומדויקת להזרקת חומרים לסינוס הרטרואורביטלי של עכברים וחולדות בילודים. זה חשוב כי זה מראה כי הזרקות רטרואורביטליות יכולות להתבצע באופן אמין ומשכפל במכרסמים מעל P2, שם כבר לא ניתן להבחין בווריד הרקתי/פנים השטחי, ובבעלי חיים מתחת ל-P12, שבהם העפעפיים עדיין לא נפתחו, וגלגל העין אינו חשוף. יתר על כן, הזרקת רטרואורביטל בילוד נסבלת היטב הן על ידי הגורים והן על ידי הסכרים, עם סיכונים מינימליים של תופעות לוואי לאחר שליטה בטכניקה.

להזרקות דרך עירוי יש יתרון על פני נתיבי מתן אחרים מכיוון שהן מאפשרות הזרקה בריכוז גבוה, כמו גם pH נמוך וגבוה, בתנאי שקצב ההזרקה נשמר קבוע ונמוך כדי למנוע קרע של כלי השיט. יתר על כן, הזרקות IV מאפשרות פיזור מהיר יותר של תרכובות כאשר הן נכנסות ישירות למחזור הדם המערכתי ובכך עוקפות עיכובים פוטנציאליים מספיגה לקויה שנצפתה בנתיבי מתן אחרים. זה מאפשר גישה מיידית וכמעט 100% זמינות ביולוגית של תרכובות.

מבחינה קלינית IV הוא מסלול הטיפול המועדף בילודים (< 28 ימים). זה נכון במיוחד במסגרות טיפול נמרץ יילודים מכיוון שקנולציה IV מאפשרת גישה קלה לספק תרופות / נוזלים. זריקות דרך מסלול sc שימשו במידה מסוימת בילודים, במיוחד עבור מתן אריתרופויאטין¹⁵. עם זאת, הועלו חששות, כאשר מחקר הציע עירוי IV כחלופה עדיפה¹⁶. מתן אוראלי אינו לעתים קרובות אפשרות מעשית כאשר יילודים נמצאים במסגרת יחידה לטיפול נמרץ בבית החולים. נוסף על כך, בהשוואה למבוגרים, בילודים יש הבדלים במערכת העיכול שלהם, כולל עיכוב בריקון הקיבה וירידה בתנועתיות המעי, מה שעלול להשפיע על ספיגת התרופות. זריקות תוך שריריות קשות לניהול כתוצאה מהמסה השרירית הקטנה של יילודים ^3,4.

במחקר מכרסמים, אחת השיטות הנפוצות ביותר של הזרקות IV היא הזרקת ורידים זנב. עם זאת, שיטה זו היא בלתי ישימה כאשר עובדים עם יילודים. אתרי עירוי אחרים כגון וריד טמפורלי / פנים שטחי⁶ הופכים בלתי נראים ב- P3. סינוס רוחבי בילוד תואר במחקר אחד ובוצע ב-P0-P1 ובסיוע מיקרוסקופ פותח את העור ומקדם מחט נימית דרך הגולגולת לתוך הסינוס הרוחבי, המאפשר הזרקות בנפח 2-4 μl⁷. מחקרים מעטים תיעדו את השימוש בווריד הצוואר החיצוני ב-P7 בחולדות¹⁷. עם זאת, מדובר בטכניקה פולשנית הדורשת פתיחה כירורגית של העור וחשיפת הווריד הצווארי החיצוני¹⁸. במחקרים במכרסמים בוגרים, מתן רטרואורביטלי הוכח כיעיל כמו הזרקת וריד זנב⁵ ובכך מחזק את הכדאיות והרלוונטיות של המסלול הרטרואורביטלי. ההזרקה הרטרואורביטלית גורמת למצוקה מינימלית ולאחר ההשתלטות יכולה להתבצע על ידי אדם בודד עם ציוד מינימלי ומאפשרת הזרקות מרובות (מה שמבטיח שהעיניים יהיו לסירוגין). מחקרים קודמים הראו כי הזרקה רטרואורביטלית שימשה למתן וירוס 9 הקשור באדנו בעכברים ב P0-P1 או ב P14-P21¹¹ או FITC-dextran ב P17¹⁹ דבר המצביע על קבלה גוברת של שיטה זו.

ישנן כמה מגבלות הקשורות הזרקה רטרואורביטלית בילודים. כמו בכל זריקות העירוי, נפח ההזרקה מוגבל, ואנו ממליצים על 5 μL / g עבור הליך זה. בנוסף, ההזרקה הרטרואורביטלית דורשת הרדמה מלאה של הגוף. כדי למזער את הסיבוכים, מומלץ להשתמש בחומרי הרדמה בשאיפה כגון isoflurane, שכן אלה מהירים יותר בהשראת הרדמה, יש חילוף חומרים מהיר ויש להם קצב התאוששות מהיר. נדרש אימון, רצוי להשתמש בצבע צבעוני בבעלי חיים מורדמים סופניים, כדי למנוע נפיחות פוטנציאלית סביב אתר ההזרקה או טראומה בעין עקב מיקום שגוי של שיפוע המחט. בשל גודלם הקטן של בעלי חיים אלה, נדרשים מחטים עדינות יותר, עם מד מחט קטן. הזרקת תאים חייבת להתבצע בתרחיף חד-תאי, כדי למנוע חסימה של כלי הדם, וכדי להבטיח את קיום התא. באופן מעודד, מחקר שנערך על ידי עאמר ועמיתיו הראה כי הזרקה של תאי יונקים באמצעות מזרקים של 30 G עדיין מספקת כדאיות תאים אמינה גם בפליטת צפיפות תאים גבוהה²⁰.

לסיכום, להקמת מסלול עירוי אמין בילודים יש משמעות קלינית, שכן זהו מסלול מתן מועדף בבני אדם. ניתן לשלוט בקלות בהזרקה הרטרואורביטלית, היא ניתנת לשחזור ומספקת חלופה רלוונטית לאתרי הזרקה בעירוי אחרים, כגון זנב ווריד טמפורלי/פנים שלא ניתן להשתמש בהם באופן אמין לאורך כל תקופת היילוד של המכרסם. לפיכך, הזריקה הרטרואורביטלית של היילוד מאפשרת מתן תרופות, תאים ותרכובות אחרות בגילאים המתאימים ליילוד.