Представлена система получения данных о самоинициируемых индивидуальных поведенческих сессиях в условиях социальной клетки. Эффективность этой системы демонстрируется с помощью автоматизированной квалифицированной оценки охвата, позволяющей охарактеризовать двигательные нарушения после инсульта, потенциальные поведенческие изменения, связанные с мотивацией, циркадные вариации и другие инновационные зависимые переменные.
Поведенческое тестирование на крысовых моделях часто используется для различных целей, включая психологические, биомедицинские и поведенческие исследования. Многие традиционные подходы включают в себя индивидуальные сеансы тестирования один на один между одним исследователем и каждым животным в эксперименте. Эта установка может занять очень много времени для исследователя, и их присутствие может повлиять на поведенческие данные нежелательным образом. Кроме того, традиционное содержание в клетке для исследований на крысах требует отсутствия обогащения, упражнений и социализации, которые обычно типичны для вида, и этот контекст также может исказить результаты поведенческих данных. Преодоление этих ограничений может быть целесообразным для нескольких исследовательских приложений, включая изучение приобретенных повреждений головного мозга. Здесь представлен пример метода автоматического обучения и тестирования индивидуального поведения крыс в клетке колонии без присутствия человека. Радиочастотная идентификация может быть использована для адаптации сеансов к конкретной крысе. Валидация этой системы произошла в контексте измерения моторики передних конечностей до и после инсульта. Измеряются традиционные характеристики постинсультных поведенческих нарушений и новые показатели, доступные с помощью системы, включая частоту успеха, различные аспекты силы тяги, анализ схватки, частоту и модели инициации, продолжительность сеанса и циркадные паттерны. Эти переменные могут собираться автоматически с небольшими ограничениями; Несмотря на то, что аппарат устраняет экспериментальный контроль над воздействием, временем и практикой, валидация обеспечила разумную согласованность этих переменных от животного к животному.
Поведенческое обучение и тестирование на крысовых моделях важны в бесчисленных областях исследований, от изучения когнитивных процессов до болезненных состоянийи многого другого. Как правило, это обучение и тестирование проводится с отдельными животными в индивидуальных занятиях, при этом исследователь вручную извлекает животное из домашней клетки и временно помещает его в какой-либо аппарат. К сожалению, в этом подходе есть несколько трудностей и ограничений. Во-первых, поведенческое тестирование может занять много времени у исследователей, а когда требуется обучение, это время становится еще больше. Во-вторых, этот подход автоматически влияет на полученные данные или даже потенциально искажает их, как было установлено в другом месте2. Эти путаницы особенно заметны при рассмотрении переменных, связанных с обогащением. В частности, лабораторные крысы традиционно содержатся в небольших клетках, которые достаточно велики для одной или двух крыс, и если не предоставить беговые колеса, они могут всю жизнь не иметь значимых возможностей для физических упражнений. Кроме того, изолированное жилье может быть основным источником стресса у социальных видов, таких как крысы4. Некоторые из этих недостатков, связанных с благополучием, вероятно, влияют на физиологию крыс 5,6, что может предвосхитить развитие типичного для вида поведенческоговыражения4 и повлиять на качество моделей грызунов применительно к человеческому контексту.
В последние годы исследователи искали несколько типов решений этих проблем. Простейшим решением было автоматизировать поведенческое тестирование и обучение 7,8,9,10, тем самым устранив необходимость одного исследователя заниматься одним животным. Дополнительным решением является автоматизация перемещения животных в экспериментальные камеры11,12, что еще больше устраняет необходимость участия человека. Наконец, было исследовано несколько установок, которые позволяют размещать животных в клетках колонии с другими животными и с большим пространством для исследования иобогащения. Несмотря на эти преимущества, такие колонии могут ограничить или усложнить усилия по сбору индивидуально дифференцированных поведенческих данных (хотя см. усилия по использованию компьютерного зрения)14,15. Если требуются индивидуальные поведенческие данные, может быть сложнее или сложнее идентифицировать и извлекать животных из клеток колонии для поведенческих сеансов. В настоящее время существует несколько систем для сбора индивидуальных поведенческих данных из (обогащенных) колоний, в которых содержится 16,17,18.
Эти недостатки могут конкретно повлиять на исследования поведенческих эффектов приобретенной черепно-мозговой травмы. Во-первых, ясно, что присутствие и/или пол людей, а также методы обращения с ними влияют на поведение грызунов 2,19, и эти переменные могут по-разному влиять на поведение крыс до и до 2000 года. после инсульта. Во-вторых, поведенческие результаты человека после инсульта могут ухудшиться из-за добровольного снижения вовлеченности в рекомендуемую дозировку реабилитационныхупражнений. В настоящее время эксперименты на грызунах, как правило, не моделируют такой контекст, потому что крысы не свободны в выборе участия или воздержания от поведенческих сеансов.
В этой статье представлен протокол, предназначенный для облегчения индивидуального поведенческого тестирования в рамках обогащенной клетки колоний. Этот подход не только устраняет ограничения, связанные с нынешней практикой, но и открывает возможности для изучения новаторских мер. Был разработан турникет для одной крысы (ОРТ), который может быть прикреплен к клетке колонии, что позволяет животным самостоятельно входить в поведенческие камеры и инициировать свои собственные сеансы обучения и тестирования. Система доступна по цене; каждый ОРТ может быть собран с небольшими затратами (при наличии доступа к 3D-принтеру). В прошлом валидация этой системы проводилась с использованием базовой оперантной камеры, показывая, что животных можно последовательно обучать выполнять простое оперантное нажатие рычага без присутствия экспериментатора16. Тем не менее, вопрос о том, применима ли эта конфигурация к другим сценариям, остается нерешенным. Цель состоит в том, чтобы подтвердить эффективность ранее созданной системы ORT-colony для обучения и количественной оценки квалифицированного поведения, связанного с двигательными нарушениями после инсульта. Конфигурация была использована для создания новых переменных, которые обычно не изучаются в исследованиях инсульта. Эти переменные включают в себя показатели эффективности для задачи по охвату квалифицированных специалистов и измерения самоинициации, которые могут иметь отношение к мотивации и принятию решений. Кроме того, были эффективно обнаружены индуцированные инсультом изменения в циркадных паттернах ежедневной самоинициации в течение всего 24-часового периода.
Этот протокол имеет множество применений. Во-первых, и это наиболее широко, ОРТ был разработан с целью обеспечения автоматизированного однопредметного поведенческого обучения и сбора данных в контексте социального, обогащенного жилья. В то время как это исследование проверило идею сб…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была частично профинансирована Фондом Беатрис Х. Барретт для исследования нейрооперантных отношений в Университете Северного Техаса (UNT). Мы благодарны за вклад и помощь всем сотрудникам Лаборатории нейропластичности и восстановления, особенно Валери Рохас, Мэри Кейт Мур, Кэмерон Скаллон и Ханна Макги.
3D printer | Consult with local makerspace | ||
bolt | Boltdepot | 1346 | 6-32 or 8-32 by 0.5" |
bolt | Boltdepot | 1348 | 6-32 or 8-32 by 0.75" |
door hinge | XJS (Amazon) | 43398-16234 | 1" cabinet stainless steel door hinge set; Optional (if "perfect hinge" is not printed) |
drill | Any electric drill works | ||
extension spring | Nieko (Amazon) | 50456A | Choose and adjust spring based on ORT sized and desired tension |
granulated sugar | |||
lock nuts | Boltdepot | 2551 | 6-32 or 8-32 |
measuring tape | |||
microcontroller | Arduino | A000066 | Arduino Uno |
microswitch | Sparkfun | KW4-Z5F | mini microswitch (SPDT-roller lever) |
One Rat Turnstile (ORT) | Vulintus | Contact company to request quote if not self-assembling | |
Operant Chambers as desired for behavioral assessment: For this experiment we used automated isometric pull chambers from Vulintus | Vulintus | No cat #: contact Vulintus | Contact Vulintus for quote |
PLA filament | OVERTURE (Amazon) | UK-MATTEPLA17511 | |
plexiglass | Lesnlok (Amazon) | B09P74K7BR | clear, 1/8" thickness, Cut to size |
plexiglass cutter | |||
python program | Python Software Foundation | software available on request | |
RFID reader | Priority 1 Design | RFIDRW-E-USB | With antenna |
RFID tag | Unified Information Devices | UC-1485-10 | |
rod | Boltdepot | 23632 | cut to > 3.5" |
Rotary tool | Used to bore hole in apparatus and colony caging for ORT; any hardware usable | ||
sand paper | HSYMQ (Amazon) | TOMPOL-1118-1915-11 | |
socket wrench set | Any socket wrench set works | ||
soldering iron | |||
super glue | 234790 | ||
wire | Plusivo (Amazon) | EAN0721248989789 |