アレルゲン曝露室を用いたアレルギー性鼻炎患者の症状評価

この記事では、ポーランドのヴロツワフ医科大学の生命倫理委員会のガイドラインに準拠したプロトコルを紹介します。すべての参加者は法的能力があり、研究に参加するための書面によるインフォームドコンセントが提供されました。彼らはまた、理由を述べずにいつでも撤退するオプションがあることを知らされました。 1. AECのクリーニング 注:洗浄は実験当日よりも早く行うことができます。 高効率粒子状空気(HEPA)フィルター掃除機で、家具や床を含むすべての表面を掃除機で掃除します。 家具、壁、窓、床など、洗えるすべての表面を水分ワイプで拭き取ります。 AECシステム(アレルゲン供給ダクト)に空気を循環させるコンプレッサーをオンにします。 床と天井のファンをオンにして、乱流条件下で流入する空気が定期的に混合されるようにします。 フィーダーコントロールステーションの「注入長さ」と「注入間の休憩」を最大値に設定して、アレルゲン供給ダクトにきれいな空気を30分間吹き飛ばします。 レーザーパーティクルカウンター(LPC)21の粒子数を監視して、アレルゲンによる汚染を確認します。メインメニューで、 を押します 構成 |サンプル。次のパラメータを使用します:1分間のサンプル、000サイクル、0分間の遅延、0分間保持、および立方メートル(m3)の単位。注意: LPCはすぐに粒子のカウントを開始し、各測定の間に間隔を空けずに1分間粒子をカウントします。LPCは、手動で停止するまでサンプルを測定し、立方メートルあたりの粒子(p / m3)を計算します。 メインメニューで、 を押します 構成 | パーティクル。すべてのオプションを選択します。注意: LPCは、最大100μm(フルレンジ)までのすべての粒子を測定します。 コンピュータプログラム(LMS Express 7など)で結果を読み上げます。注意: 立方メートルあたりの粒子数(p / m 3)が50 p / m3未満で、粒子が0〜100μmの範囲にある場合、キャビンは少なくとも10分間きれいです。 2. AECの操作 注:キャビン内の雰囲気は、試験中にパラメータが一定であることを確認するエンジニアによって定期的に監視される必要があります。参加者が入る前にパラメータを安定させる必要があります。 環境 AEC全体に空気を循環させるコンプレッサーをオンにします。温度制御システムで温度を21°C±0.5°Cに調整します(材料表)。注意: 必要に応じて、温度は18°Cから27°Cの間で変化する場合があります。 床と天井の渦巻きファンをオンにします。 フィーダーコントロールステーションの加湿器をオンにします(材料表)。 フィーダーコントロールステーションのノブ「空気供給」を5%〜20%の位置に設定して、100時間あたりの空気交換(ACH)を40〜100%に設定します。空気質計で相対湿度とCO2 濃度を測定します。注意: 新鮮な外気はHEPAフィルター を介して 引き込まれます。相対湿度(通常40%〜58%)と二酸化炭素(CO2)濃度(900ppm未満)を制御します。湿度とCO2 の両方が正常範囲内になるようにACHを調整します。湿度とCO2 の値は、参加者の数に非常に敏感です。 粒子の生成とカウント注:標準化および凍結乾燥されたアレルゲン抽出物が使用されます。粒子は給気ダクトに注入され、コンピューター制御のフィーダーを介してAECに吹き込まれます。粒子濃度は500/m3から10,000/m3の間で調整することができる。均質で空間的に安定した粒子分布は、アレルゲン粒子が床に落下して蓄積するのではなく循環するように乱流混合することによって得られます。粒子を1分間カウントするようにLPCを設定します(手順1.6.1を繰り返します)。 監視対象粒子の値を0〜20μmの範囲に設定します。メインメニューで、 を押します 構成 |パーティクル。「5、10、20μm」にチェックマークを付けます。LPCは、0〜20μmの範囲のすべての粒子を測定します。注:粒子は、異なるアレルゲンを監視するために必要な場合、0〜20μm、20〜50μm、および50〜100μmを含む範囲に分類できます。 アレルゲンをフィーダーに入れます。フィーダーコントロールステーションで、「注入長」を100ミリ秒(範囲10〜200ミリ秒)に設定し、「注入間の休憩」を1.5分(範囲0.3〜3.0分)に設定します。注:ALL-MED AEC検証では、乾燥、精製された Dermatophagoides pteronyssinus(Dp )ダニ体(材料表)をHMDチャレンジに使用し、5,000 p / m3 が最適濃度20でした。 粒子の数(p / m3)を監視します。両方のパラメータの値を変更して、継続的に調整します。 各試行が完了したら、すべての測定データ(p / m3、CO2 濃度)をコンピューターから外付けドライブにダウンロードします。データを分析します(図2)。 3. 安全管理措置 AECに入る36〜24時間前に、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2ウイルス(SARS-CoV-2)のPCR検査で参加者をテストします。PCR結果が陰性の参加者のみがAECに入ることを許可します。注:この手順は必須ではなく、地域のコロナウイルス病2019(COVID-19)の制限によって異なります。キャビン内の患者は保護マスクを着用していません。 4. 機内での検査と臨床エンドポイント 注:包含基準と除外基準、および参加者の特性については、 補足表1を参照してください。参加者は、ALL-MED AEC 20の検証に従って、5,000 p / m3 の濃度のHDMアレルゲンに120分間曝露されました。 参加者が触れるデバイスコンポーネントが感染伝播源になる可能性があるため、検査前に参加者の手を消毒してください。この推奨事項は、特にウイルス性疾患の流行やパンデミックの際に不可欠です。 表示ウィンドウから参加者の状態を常に監視し、マイクシステム を介して 音声で連絡を取ります(資料表)。 参加者がAECに入る前に、非アレルゲン粒子の浸透や衣服の潜在的な汚染を防ぐために、フード付きの使い捨てのつなぎ服(材料表)を着用するように要求してください。 参加者がAECに入る前に、検査中に使用するために必要なすべての器具使い捨てチップが入った箱を提供します:肺活量測定チップと鼻栓、使い捨て吸気フローマターマスク、ピークフローメーター(PFM)チップ、ARMチップ、アンケート用のリモコン、ハンカチ1パック、鼻汁用のバイオハザードビニール袋。 以下の手順に従って臨床エンドポイントを実行します。ARM、PNIF、PERF、およびFEVを繰り返します1 実験前と60分と120分後にテストします。参加者が30分ごとにTNSS調査を完了するようにしてください(図 3).参加者が快適に過ごせるように、AECの隣の部屋で個別にテストを実行してください。注意: 効率的なテストのために、参加者に10分間隔でキャビンに入ってもらいます。その結果、各被験者の測定は異なるリアルタイムで行われ、各患者はAEC内で合計120分を過ごします。タイムシフトにより、スタッフはテストプロセス中に参加者を支援し、対話することもできます。合計で、AECは約210分間動作します。鼻汁(客観的パラメータ)注:参加者はハンカチとビニール袋の同一のパッケージを持っている必要があります。これは重みを比較するために必要です。使用済みのハンカチをビニール袋に入れるよう参加者に指示します。2時間のチャレンジが終了したら、未使用のハンカチも同じバッグに入れてもらいます。必要に応じて、追加のティッシュとビニール袋を用意してください。 トライアルが終了したら、すべてのバッグを集めてください。ビニール袋の使用済みハンカチの重さを量って、鼻汁の重さを決定します。各測定値から未使用のハンカチとビニール袋の重量を差し引き、鼻汁の重量を求めます(図4A)。 鼻症状調査(主観評価)テレビ画面にアンケートの質問を表示します。 各症状の重症度に対応するリモコンの番号を選択して、チャレンジ前とチャレンジ中は30分ごとに患者に自己評価するように依頼します(質問)。総鼻症状スコア(TNSS)調査に基づいて鼻症状を評価します(表1)。 参加者にTNSSアンケートを記載したメールを送信します。チャレンジ後4時間24時間に自宅でアンケートに回答し、結果を返送するように依頼します。 チャレンジが終了したら、回答をダウンロードし、各調査の合計スコアを計算します(図4B)。 音響鼻測定(ARM)(目的パラメータ)注: 最小断面積(MCA)の差を計算するには、1人の参加者のすべての測定値を1つのファイルに保存する必要があります。そうしないと、分析ができなくなります。テストは、チャレンジ前、チャレンジ後 60 分、チャレンジ後 120 分の 3 回実行します。 鼻孔に鼻計の頭の適切な先端を置きます(左鼻孔は青)。きついかどうかを確認してください。参加者に3秒間息を止めてから、プログラムを開始するように依頼します。注意: 結果が不明な場合は、テストを繰り返してください。 適切な先端を持つもう一方の鼻孔についても繰り返します(右の鼻孔は赤)。 チャレンジが終了したら、MCAを計算します(図4C)。 ピーク鼻吸気流量(PNIF)(客観的パラメータ)注意: PNIFは、最大の吸気中に鼻の気流を直接測定し、鼻の閉塞の程度を判断します。テストは、チャレンジ前、チャレンジ後 60 分、チャレンジ後 120 分の 3 回実行します。 参加者に肺を深く収縮させるように依頼します。次に、流量計に接続された使い捨て吸気流量計マスクを顔に置き、鼻から最大限に息を吸うように指示します(図4D)。 テスト全体を通して、吸気流量計が水平位置にあることを確認してください。3つの測定値の最良の平均を記録します。 ピーク呼気流量PEFR(安全パラメータ)注意: PEFRは、換気の妥当性と気流の閉塞の信頼できる指標です。テストは、チャレンジ前、チャレンジ後 60 分、チャレンジ後 120 分の 3 回実行します。 参加者にできるだけ深呼吸をし、ピークフロー物質の使い捨てチップの周りに唇を置き、すばやく力強く息を吐くように依頼します(図4E)。 3つの測定値の最良の平均を記録します。 チャレンジが終了したら、参加者にPFMを提供します。チャレンジ後4時間24時間に自宅でテストを実行し、結果を送り返すように依頼します。 肺活量測定(安全肺パラメータ)注:肺活量測定は、欧州呼吸器学会(ERS)22 の基準に従って実行され、安全性を評価し、気管支閉塞の可能性を監視します23。テストは、チャレンジ前、チャレンジ後 60 分、チャレンジ後 120 分の 3 回実行します。 測定の前に、各参加者の肺活量計のパラメーター(性別、年齢、体重、身長)を設定します。 参加者に座って鼻栓をしてもらいます。次に、参加者に肺活量計の使い捨てチップの周りに唇を置き、落ち着いて慎重に呼吸してもらいます。 参加者に、肺活量計が信号を発したときにのみ中断できる、不必要な遅延なしに深呼吸と強い呼気をするように依頼します。3回繰り返します。 すべての参加者を調べた後、結果をダウンロードし、最初の1秒(FEV1)に強制呼気量を記録します(図4F)。 アレルゲンチャレンジ中に参加者の幸福または安全パラメータが大幅に悪化した場合は、すぐにテストを中止してください。 AEC施設を出た後、救助薬を提供することにより、参加者を安全で快適に保ちます(必要な場合)。 チャレンジの24時間後に各参加者と安全フォローアップコールを実施します。