Aqui, apresentamos um protocolo sobre como evitar micro fissuras em núcleos de incremento através da aplicação de uma broca sem fio com um multiplicador de torque para minimizar problemas ao perfurar árvores, bem como seu efeito na preparação de microseções longas. Este protocolo também inclui um procedimento para afiar os corers no campo.
Na pesquisa dendroecológica, a datação precisa de cada anel de crescimento é um requisito básico para todos os estudos, concentrando-se apenas em variações de largura do anel, análises químicas ou isótopas ou estudos anatômicos de madeira. Independentemente da estratégia de amostragem para um determinado estudo (por exemplo, climatologia, geomorfologia), a forma como as amostras são colhidas é crucial para a sua preparação e análises bem-sucedidas.
Até recentemente, era suficiente usar um (mais ou menos) cortador de incremento afiado para obter amostras de núcleo que poderiam ser lixadas para análises posteriores. Como as características anatômicas da madeira podem ser aplicadas a séries temporais longas, a necessidade de obter núcleos incrementais de alta qualidade assumiu um novo significado. Essencialmente, o corer precisa ser afiado (enrustido) quando usado. Ao perfurar uma árvore à mão, existem alguns problemas no manuseio do corer, resultando na ocorrência oculta de micro rachaduras ao longo de todo o núcleo: Ao começar a perfurar à mão, a broca é fortemente pressionada contra a casca e o anel mais externo até que o fio tenha entrado totalmente no tronco. Ao mesmo tempo, a broca é movida para cima e para baixo, bem como para os lados. Em seguida, o corer é perfurado todo o caminho para o tronco; no entanto, é necessário parar após cada curva, mudar a aderência e virar novamente. Todos esses movimentos, bem como o start/stop-coring, colocam tensão mecânica no núcleo. As micro rachaduras resultantes tornam impossível criar micro seções contínuas, pois elas se desfazem ao longo de todas essas rachaduras.
Apresentamos um protocolo para superar esses obstáculos através da aplicação de uma nova técnica usando uma broca sem fio para minimizar esses problemas ao perfurar uma árvore, bem como seu efeito na preparação de microseções longas. Este protocolo inclui a preparação de longas micro seções, bem como um procedimento para afiar corers no campo.
A pesquisa dendroecológica é baseada em várias características dos anéis de crescimento em árvores, tanto anuais quanto de outra forma. A dendrocronologia da disciplina “precursora” foi estabelecida usando variações de largura de anel como parâmetro para simplesmente datar os anéis e, como resultado, estabelecer longas cronologias. Portanto, várias outras características, como variações de densidade, concentrações isotópicas ou características anatômicas da madeira, são usadas para correlacionar anéis únicos ou sua estrutura e conteúdo a parâmetros ambientais para entender melhor o impacto das condições ambientais no crescimento das árvores ao longo do tempo.
A dendroecologia, assim como a dendroclimatologia, tem ganhado importância na pesquisa ambiental, principalmente na reconstrução de condições climáticas passadas 1,2,3. Para isso, os anéis de inúmeras árvores devem ser analisados em detalhes. Embora existam algumas técnicas para determinar a largura e a densidade dos anéis das árvores (por exemplo, por meio da tecnologia de ondas acústicas4 ou resistência à perfuração5,6), até o momento, não existe um método “não destrutivo” confiável para extrair as características dos anéis das árvores. Para análises muito detalhadas das características dos anéis dentro de uma árvore, ou para estimar o incremento da área basal, seria melhor cortar discos das árvores de interesse7. Isso exigiria o corte de todas as árvores potenciais de interesse para análises específicas. Tendo em conta o grande número de árvores analisadas em todo o mundo a cada ano, esta estratégia de amostragem não é praticável. Independentemente de desperdiçar uma quantidade incrível de recursos, essa estratégia é simplesmente muito cara. Devido a isso, o uso de corers de incremento foi estabelecido como uma técnica de amostragem padrão em pesquisas de anéis de árvores8. O uso de corers incrementais permite uma extração minimamente invasiva de núcleos de madeira dos caules, partindo da casca e atingindo (em casos ótimos) a medula da árvore9.
Embora o coring cause uma lesão no caule – um buraco com um diâmetro de ~ 1 cm – as árvores são capazes de fechar essa ferida através do aumento da formação de madeira nas proximidades do orifício do núcleo. Uma desvantagem, além do próprio furo, é a ocorrência de uma “zona de compartimentalização”, uma área ao redor do orifício onde as células são preenchidas por fenóis para evitar a potencial disseminação de fungos a partir do buraco10,11. Até onde sabemos, ainda não há evidências de que o aumento do coring cause um aumento significativo da frequência de decomposição das árvores, pelo menos em povoamentos florestais de alta altitude não perturbados para Picea abies12 e várias espécies de madeira de lei em uma floresta temperada13.
Embora esse padrão de amostragem tenha sido aplicado por décadas em todo o mundo, alguns problemas ainda permanecem. Um deles é o fato de que os núcleos têm que ser levados à mão sem qualquer suporte mecânico, o que leva muito tempo e é bastante exaustivo depois de um tempo. Para facilitar a amostragem, várias estratégias (mais ou menos praticáveis) têm sido testadas, como o uso de motosserras equipadas com um corer em vez da corrente14,15,16,17. O uso de motosserras foi preferido às brocas porque estas últimas não eram suficientemente poderosas; no entanto, essa ideia não pegou devido ao grande peso da motosserra e ao combustível necessário.
Nos últimos anos, as técnicas anatômicas da madeira evoluíram significativamente e foram integradas aos estudos dendroecológicos18,19. No entanto, a capacidade de analisar parâmetros anatômicos da madeira por longos períodos cortando microseções de núcleos de incremento resultou em problemas inesperados. Frequentemente, as microseções retiradas dos núcleos se quebravam em pequenos pedaços, o que impossibilitava a produção de cortes coerentes (Figura 1). Este problema foi causado pela técnica manual de coring árvores e corers não afiados. O estresse mecânico exercido sobre a madeira durante a perfuração resultou em micro rachaduras dentro do núcleo. Essas microfissuras nunca foram notadas durante o exame macroscópico dos núcleos de incremento e, portanto, nunca apresentaram um problema.
O coring manual é feito colocando a alça na extremidade traseira do corer, pressionando a ponta com a rosca na haste e começando a girar a alça até que o corer tenha perfurado um pouco mais da metade do diâmetro do caule. Ao fazer isso, a ponta do corer é (obviamente) fixada na haste, mas a extremidade traseira do corer girada pela alça está sempre se movendo para o lado ou para cima e para baixo, pelo menos até que a cabeça da broca esteja totalmente aparafusada no porta-malas, dando mais orientação e estabilidade ao corer. Como resultado da alta pressão e do movimento do corer, os núcleos de incremento são distorcidos com frequência no extremo externo ~5 cm (Figura 1). Mesmo que o atrito durante o giro seja reduzido ao mínimo, outro processo está exercendo tensão no núcleo de incremento dentro do corer. A coragem manual não permite um movimento contínuo da aresta de corte do corer dentro da haste. Pode-se fazer um máximo de uma volta completa, antes de ter que parar para mudar a aderência e, em seguida, continuar a perfuração. Cada vez que a rotação é reiniciada, o núcleo é ligeiramente torcido até que o atrito seja superado e a broca gire novamente. Essas tensões mecânicas potencialmente causam rachaduras microscópicas na estrutura dos núcleos.
Este estresse mecânico é ainda aumentado quando a aresta de corte do corer não é afiada. Um sinal visível para um corer não afiado é uma superfície de núcleo irregular, mostrando muitas rachaduras ao longo de toda a sua extensão20 (Figura 2). A frequência de afiação depende da densidade das árvores a serem coradas e dos minerais ou areia presentes na casca da árvore a ser corada. Em uma nota geral, não se deve assumir que os novos corers são afiados. Até o momento, o afiamento de um corer quase nunca é feito em campo devido à dificuldade dele, já que isso tem que ser feito à mão e precisa de muita experiência11,20.
Para resumir, o corte manual e as arestas de corte não afiadas resultam em micro rachaduras que ocorrem nos núcleos retirados. Até o momento, esses problemas não foram analisados sistematicamente, nem foram feitas tentativas de encontrar soluções. Este trabalho apresenta um protocolo para superar esses obstáculos, comparando a técnica de coring manual com a aplicação de uma nova técnica. Propomos o uso de uma broca sem fio equipada com um adaptador especial para um correlacionador de incremento. Apresentamos até que ponto os problemas são minimizados ao corear uma árvore, bem como o efeito do coring mecânico contínuo na preparação de microseções longas. Este protocolo inclui a preparação de micro seções longas usando uma fita solúvel em água como auxiliar de suporte e um procedimento para afiar os corers no campo.
A inclusão significativa da anatomia da madeira em estudos dendroecológicos23,24, bem como um intercâmbio intensificado entre cientistas especializados em pesquisa de anéis de árvores e anatomistas de madeira25, abriu um amplo campo de análises novas e aprofundadas das condições ambientais passadas. Estes novos estudos abriram novas possibilidades e questões, mas também deram origem a novos problemas.
O rápido desenvolvimento desta nova era de “dendroanatomia” requer um alto número de amostras, o que é definitivamente apoiado pelo uso de uma broca sem fio, como explicado anteriormente. Além do fato de que levar núcleos com a broca não é de todo exaustivo, economiza muito tempo. Embora os resultados apresentados neste trabalho impliquem possibilidades de amostragem seis vezes mais rápidas que a pontuação manual, trata-se de um teste para núcleos únicos. No entanto, durante a amostragem regular (uma pessoa marcando, com uma codificando e armazenando os núcleos), conseguimos núcleor 24 árvores de abeto (dois núcleos de comprimento total cada), com diâmetros de caule de aproximadamente 80 cm, dentro de 1,5 h. Isso é uma média de <2 minutos para um núcleo, incluindo armazenamento, empacotamento e mudança para a próxima árvore.
O manuseio rápido de todo o processo é suportado pelo fato de que o adaptador recém-projetado para corers de incremento pode ser usado sem a necessidade de fixar o corer dentro do adaptador com um parafuso ou fechamentos comparáveis. Como resultado, mudar a broca para a alça do corer para quebrar e extrair o núcleo é rápido e fácil. O adaptador é projetado para que se possa até mesmo puxar o corer para fora durante a perfuração de volta, caso a haste esteja podre, ou (como é comum com alguns corers de incremento) se a rosca não agarrar ao voltar para trás e o corer não se mover para fora.
No entanto, deve-se notar que, ao remover o corer da haste, é necessário inclinar o adaptador ligeiramente para que ele possa ser puxado com sucesso sem que a broca escorregue (etapa de protocolo 2.8). A crescente demanda por estudos de anéis de árvores para criar cronologias longas baseadas em proxies anatômicos19,26 tem exigido a preparação de microseções a partir de núcleos de incremento, cortadas em pedaços antes da preparação ou cortadas como microseções inteiras 22. Embora a qualidade de microcortes de até 40 cm de comprimento ainda não seja sempre comparável a seções curtas (por exemplo, o ângulo variável das células em sua extensão vertical frequentemente dificulta as medições da parede celular), elas podem ser usadas para identificar e datar reações de crescimento específicas como a ocorrência de madeira de reação ou anéis azuis27 (Figura 6).
Consequentemente, a qualidade das amostras é um pré-requisito básico para uma preparação bem sucedida e análises adicionais de estruturas anatômicas. Essa demanda requer mais cautela em relação à nitidez da campanha de amostragem ao tomar núcleos de incremento. Como consequência, a preparação de microseções pode ser muito demorada e trabalhosa, e às vezes até impossível, se os espécimes não forem incorporados de antemão28.
Afiar a aresta de corte de um escorador de incremento à mão requer muita prática e experiência, a fim de moer a borda uniformemente ao redor à mão sem qualquer apoio. A capacidade de usar o novo suporte de perfuração para afiar núcleos de incremento permite que até mesmo usuários inexperientes em afiação afiem a borda de corte de seus corers no campo. O fato de que isso agora pode ser feito rapidamente aumentará a qualidade das amostras colhidas no futuro.
Embora o uso do novo equipamento mostre claras vantagens para o processamento subsequente dos núcleos, a broca sem fio também poderia ser combinada com pequenos dispositivos para afiação, desenvolvidos e apresentados há quase 40 anos20. Maeglin20 apresentou detalhes de construção de uma modificação do “afiador de broca de Goodchild” feito de madeira e metal29. Hoje em dia, este dispositivo pode ser modelado e impresso em uma impressora 3D sem problemas30. Seria necessário apenas criar um modelo 3D detalhado do apontador para imprimir as peças individuais e montá-lo para uso no campo. As possibilidades de melhoria ainda não foram esgotadas e temos a certeza de que esta publicação irá inspirar muitos colegas a desenvolverem ainda mais as ferramentas aqui apresentadas. Um obstáculo ainda não resolvido é o fato de que é preciso remover a broca e adicionar a alça do corer para extrair o núcleo.
A etapa final do corte de microseções de núcleos de incremento inteiros22 ainda é uma questão complicada. A aplicação da fita solúvel em água, como descrito anteriormente, suporta o processo, estabilizando a seção ao cortá-la e colocá-la na lâmina de vidro. No entanto, esse procedimento ainda exige que o usuário tenha um alto nível de experiência.
The authors have nothing to disclose.
Nenhum.
BS 18 LTX-3 BL QI | Metabo | 0 | Cordless drill |
Core-microtome | WSL | 0 | Microtome to cut micro sections from increment cores |
Drill adapter for increment corer | WSL | 0 | Adapter to fix the increment corer on the cordless drill |
Increment corer | Haglöff | 0 | 40cm increment corer |
Power X3 | Metabo | 0 | Torque amplifyer |
Sharpening support board | WSL | 0 | Board to attach the cordless dril to sharpen the cutting edge ofd the corer |
Water-soluble tape 5414, transparent 3/4IN | 3M | 0 | Transparent tape to support cutting long sections |