Un protocollo di trapianto di cuore eterotopico murino modificato che corrisponde agli standard contemporanei di tecnica asettica, anestesia e analgesia

Dobbiamo gran parte della nostra comprensione dell’immunologia e dei trapianti alla ricerca basata su modelli sperimentali di trapianto di organi solidi utilizzando soggetti animali. Fin dalla prima descrizione del trapianto cardiaco vascolarizzato nei mammiferi¹, tali modelli hanno contribuito alla conoscenza in ampi settori, tra cui l’applicazione terapeutica dell’ipotermia², i benefici dell’uso di suture specializzate³ e le tecniche per l’omotrapianto totale di polmoni e cuore⁴. Lo sviluppo di modelli di trapianto cardiaco nei ratti ^5,6 ha fornito un più ampio spazio per la sperimentazione immunologica a causa della disponibilità di diverse linee di allevamento. La gamma sostanzialmente più ampia di ceppi di topo inbred e mutanti disponibili ha portato Corry et ^al.7 a sviluppare una tecnica di trapianto cardiaco eterotopico murino a causa dei notevoli vantaggi che questa gamma porta alla ricerca sui trapianti. Questo modello è stato ampiamente utilizzato e ha contribuito a una maggiore comprensione del rigetto del trapianto⁸ e delle terapie⁹. Dalla sua prima descrizione, tuttavia, la tecnica è rimasta sostanzialmente invariata a parte alcuni dettagli tecnici minori come le regolazioni alla posizione dei siti anastomotici^10,11.

Dall’integrazione della tecnica di Corry et ^al.7 nei nostri esperimenti, abbiamo identificato aree promettenti per migliorare il protocollo, vale a dire quelle della tecnica asettica, dell’anestesia e dell’analgesia. Ci si aspettava che i miglioramenti in queste aree offrissero un impatto positivo sui risultati sperimentali e migliorassero il benessere degli animali. Ciò è stato precedentemente dimostrato quando la tecnica asettica viene utilizzata negli interventi chirurgici di piccoli animali in quanto aiuta a ridurre le infezioni postoperatorie¹², che non solo influisce sulla morbilità e sulla mortalità, ma può anche compromettere gli esperimenti progettati per valutare la risposta immunitaria dopo l’intervento chirurgico di trapianto. Dal punto di vista anestesialogico e analgesico, l’uso di un regime raffinato aiuta a ridurre il costo per gli animali e bilanciare l’argomento etico di questo modello chirurgico mitigando il dolore e la sofferenza dei soggetti sperimentali. Inoltre, l’anestesia e l’analgesia appropriate limitano la risposta allo stress associata al dolore, migliorando la qualità del recupero postoperatorio e, in definitiva, aumentando il tasso di successo chirurgico¹³.

Con l’obiettivo di migliorare sia il benessere degli animali che i risultati sperimentali, è stato sviluppato un protocollo con adeguamenti per colmare queste lacune. Questo protocollo è stato adattato da quello originariamente descritto da Corry et ^al.7 con la consultazione di un anestesista veterinario e con la dovuta considerazione sia per gli effetti che per la durata degli effetti degli interventi farmacologici utilizzati nel regime anestetico e analgesico. L’approccio si è basato sui principi dell’anestesia bilanciata e dell’analgesia multimodale per garantire un’adeguata assistenza perioperatoria¹⁴. Oltre all’applicazione della tecnica asettica, sono stati somministrati preventivamente l’oppioide buprenorfina e l’anestetico locale bupivacaina. L’anestesia generale è stata eseguita utilizzando l’agente anestetico inalante isoflurano.