Summary

قياس توليد الحرارة للعضلات الهيكلية في الفئران والجرذان

Published: July 27, 2022
doi:

Summary

يتم زرع الفئران والجرذان جراحيا باستخدام أجهزة الإرسال والاستقبال عن بعد ثم تعويدها على بيئة الاختبار والإجراء. يتم قياس التغيرات في درجة حرارة العضلات استجابة للمنبهات الدوائية أو السياقية في القفص المنزلي أو أثناء النشاط البدني الموصوف (أي المشي على جهاز المشي بسرعة ثابتة).

Abstract

يوفر التوليد الحراري للعضلات الهيكلية وسيلة محتملة لفهم التوازن الأيضي بشكل أفضل والآليات الكامنة وراء إنفاق الطاقة. من المثير للدهشة أن القليل من الأدلة المتاحة لربط الآليات العصبية والعضلية الخلوية والجزيئية لتوليد الحرارة مباشرة بالتغيرات القابلة للقياس في درجة حرارة العضلات. تصف هذه الورقة طريقة يتم من خلالها استخدام أجهزة الإرسال والاستقبال لدرجة الحرارة لاسترداد القياسات المباشرة لدرجة حرارة العضلات الهيكلية للفأر والفئران.

يتم زرع أجهزة الإرسال والاستقبال عن بعد جراحيا داخل عضلات الفئران والجرذان ، ويتم منح الحيوانات وقتا للتعافي. يجب بعد ذلك تعويد الفئران والجرذان بشكل متكرر على بيئة الاختبار والإجراء. يتم قياس التغيرات في درجة حرارة العضلات استجابة للمنبهات الدوائية أو السياقية في قفص المنزل. يمكن أيضا قياس درجة حرارة العضلات أثناء النشاط البدني الموصوف (أي المشي على جهاز المشي بسرعة ثابتة) لتحليل التغيرات في النشاط كمساهمين في التغيرات في درجة حرارة العضلات التي تسببها هذه المحفزات.

تم استخدام هذه الطريقة بنجاح لتوضيح الآليات الكامنة وراء التحكم الحراري للعضلات على مستوى الدماغ والجهاز العصبي الودي والعضلات الهيكلية. يتم تقديم عروض توضيحية لهذا النجاح باستخدام رائحة المفترس (PO ؛ رائحة النمس) كحافز سياقي وحقن الأوكسيتوسين (Oxt) كحافز دوائي ، حيث تحفز رائحة المفترس توليد الحرارة العضلية ، و Oxt يثبط درجة حرارة العضلات. وبالتالي ، تعرض مجموعات البيانات هذه فعالية هذه الطريقة في اكتشاف التغيرات السريعة في درجة حرارة العضلات.

Introduction

ضمن أبحاث التمثيل الغذائي ، يعد فحص توليد الحرارة للعضلات الهيكلية وسيلة جديدة واعدة لفحص توازن وزن الجسم. تدعم الأدبيات المنشورة فكرة أن الاستجابات الحرارية لأحد أكبر أجهزة الجسم – العضلات الهيكلية – توفر وسيلة لزيادة نفقات الطاقة والتأثيرات الأيضية الأخرى ، وبالتالي إعادة توازن الأنظمة بشكل فعال داخل أمراض مثل السمنة1،2،3. إذا كان من الممكن اعتبار العضلات عضوا حراريا ، فيجب أن تستخدم الدراسات منهجية عملية لدراسة التغيرات الحرارية داخل هذا العضو. الرغبة في فهم التأثير الماص للحرارة للعضلات الهيكلية وفائدة هذه المنهجية لدراسة توليد الحرارة للعضلات غير المرتعشة ليست خاصة بالدراسات الأيضية. أظهرت التخصصات بما في ذلك التطور4 وعلم وظائف الأعضاء المقارن5 والفيزيولوجيا البيئية6،7 اهتماما راسخا بفهم الطرق التي قد يساهم بها توليد الحرارة العضلي في ماص الحرارة وكيف تتكيف هذه الآلية مع البيئة. يوفر البروتوكول المقدم الأساليب الحاسمة اللازمة لمعالجة هذه الأسئلة.

يمكن استخدام الطريقة المقدمة في تقييم كل من تعديل المحفزات السياقية والدوائية لدرجة حرارة العضلات ، بما في ذلك التقنية الفريدة لتوفير رائحة المفترس (PO) لتغيير السياق لتكرار تهديد المفترس. أظهرت التقارير السابقة قدرة PO على إحداث زيادة كبيرة في توليد الحرارةالعضلي 8 بسرعة. علاوة على ذلك ، يمكن للمحفزات الدوائية أيضا تغيير درجة حرارة العضلات. وقد ثبت ذلك في سياق توليد الحرارة العضلي الناجم عن PO ، حيث أدى الحصار الدوائي للمستقبلات β الأدرينالية المحيطية ، باستخدام nadolol ، إلى تثبيط قدرة PO على تحفيز توليد الحرارة العضلي دون التأثير بشكل كبير على توليد الحرارة المقلص أثناء المشي على جهاز المشي8. كما تم استخدام الإدارة المركزية لمنبهات مستقبلات الميلانوكورتين في الفئران لتمييز آليات الدماغ التي تغير توليد الحرارة 9,10.

يتم توفير هنا تحقيقا أوليا في قدرة هرمون الأوكسيتوسين العصبي (Oxt) على تغيير توليد الحرارة العضلي في الفئران. على غرار تهديد المفترس ، تؤدي اللقاءات الاجتماعية مع شخص محدد من نفس الجنس إلى زيادة درجة حرارة الجسم ، وهي ظاهرة يشار إليها باسم ارتفاع الحرارة الاجتماعي11. نظرا لأهمية Oxt للسلوك الاجتماعي12 ، فقد تم التكهن بأن Oxt هو وسيط لارتفاع الحرارة الاجتماعي في الفئران. في الواقع ، يقلل مضاد مستقبلات الأوكسيتوسين من ارتفاع الحرارة الاجتماعي في الفئران11 ، وتظهر جراء الفئران التي تفتقر إلى Oxt عجزا في الجوانب السلوكية والفسيولوجية للتنظيم الحراري ، بما في ذلك توليد الحرارة13. بالنظر إلى أن Harshaw et al. (2021) لم يجد دليلا يدعم توليد الحرارة للأنسجة الدهنية البنية (BAT) المعتمدة على مستقبلات الأدرينالية β3 مع ارتفاع الحرارة الاجتماعي11 ، فقد افترض أن ارتفاع الحرارة الاجتماعي قد يكون مدفوعا بتحريض أوكست لتوليد الحرارة العضلي.

لقياس التوليد الحراري للعضلات الهيكلية ، يستخدم البروتوكول التالي زرع أجهزة الإرسال والاستقبال IPTT-300 المبرمجة مسبقا بجوار العضلات محل الاهتمام داخل الفأر أو الجرذ8،10،14،15. أجهزة الإرسال والاستقبال هذه عبارة عن رقائق دقيقة مغلفة بالزجاج تتم قراءتها باستخدام قارئات جهاز الإرسال والاستقبال المقابلة. استخدمت الأبحاث القليلة أو المعدومة هذه التقنية بهذه الصفة ، على الرغم من أن الدراسات أشارت إلى الحاجة إلى الخصوصية التي توفرها هذه الطريقة16,17. أظهرت التحقيقات السابقة موثوقية هذه الطريقة ومجموعة متنوعة من الطرق التي يمكن من خلالها استخدام أجهزة الإرسال والاستقبال في درجة الحرارة مقارنة بطرق اختبار درجة الحرارة الأخرى18 أو بالاقتران مع الطرق الجراحية (على سبيل المثال ، القنية19). ومع ذلك ، تعتمد الدراسات من هذا النوع على مواضع استراتيجية مختلفة لقياس درجة حرارة الجسم الكلية 20،21،22 أو أنسجة محددة مثل BAT23،24،25.

بدلا من قياس درجة الحرارة من هذه المواقع أو أثناء استخدام موازين حرارة الأذن أو المستقيم26 ، توفر الطريقة الموضحة هنا خصوصية للعضلة محل الاهتمام. تعد القدرة على استهداف موقع ما عن طريق زرع أجهزة إرسال واستقبال مباشرة مجاورة للعضلات محل الاهتمام أكثر فعالية لفحص توليد الحرارة العضلي على وجه التحديد. يوفر طريقا جديدا بالإضافة إلى تلك التي يوفرها قياس الحرارة بالأشعة تحت الحمراءالسطحية 27,28 أو قياسات درجة الحرارة الجلدية عبر المزدوجة الحرارية 29. علاوة على ذلك ، توفر البيانات المقدمة من خلال هذه الطريقة مجموعة من طرق البحث ، وتجنب الحاجة إلى معدات وبرامج كبيرة ومكلفة وعالية التقنية مثل التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء30،31،32.

تم استخدام هذه الطريقة بنجاح لقياس درجة الحرارة في عضلات الفخذ والساق ، إما من جانب واحد أو ثنائي. كانت هذه الطريقة فعالة أيضا بالتزامن مع الجراحة التجسيمية14،15. ضمن ~ 7-10 سم من طرف جهاز الإرسال والاستقبال ، يتم استخدام قارئات جهاز الإرسال والاستقبال المحمولة (DAS-8027 / DAS-7007R) لمسح درجة الحرارة وقياسها وعرضها. كانت هذه المسافة حرجة وقيمة للتحقيقات السابقة8،9،10 لأنها تقلل من الضغوطات المحتملة والمتغيرات المتغيرة لدرجة الحرارة مثل التعامل مع الحيوانات أثناء إجراءات الاختبار. باستخدام أجهزة ضبط الوقت ، يمكن بعد ذلك تسجيل القياسات وجمعها على مدار فترة زمنية دون تفاعل مباشر مع الحيوانات.

لتقليل إزعاج الفئران أثناء الاختبار ، تصف هذه الطريقة تجميع واستخدام الناهضين المصنوع من أنابيب PVC لمنح المجرب إمكانية الوصول إلى قاع الأقفاص المنزلية أثناء الاختبار. باستخدام الناهضين جنبا إلى جنب مع القارئ الرقمي ، يمكن إجراء قياسات درجة حرارة طرف جهاز الإرسال والاستقبال دون أي تفاعل حيواني بعد وضع التحفيز. بأقل تكلفة ، يمكن استخدام هذه الطريقة جنبا إلى جنب مع المحفزات الدوائية والسياقية ، مما يجعلها في متناول الباحثين. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام هذه الطريقة مع عدد كبير من الموضوعات (~ 16 فأرا أو ~ 12 فأرا) في وقت واحد ، مما يوفر الوقت في زيادة الإنتاجية الإجمالية لأي مشروع بحثي.

تم تقديم آلية مصممة في هذه الطريقة لتقديم الروائح للفئران باستخدام كرات الشاي المصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ ، والتي يشار إليها من الآن فصاعدا باسم “كرات الشاي”. على الرغم من أن كرات الشاي هذه مثالية لاحتواء أي مادة ذات رائحة ، في هذه الدراسات ، يتم وضع المناشف التي كانت بمثابة فراش في قفص على مدى 2-3 أسابيع للقوارض ، وهي مفترس طبيعي للفئران والجرذان ، داخل كل كرة شاي علاجية. يتم تقطيع كل منشفة إلى مربعات 5 سم × 5 سم. يتكرر هذا الاقتباس أيضا مع مناشف تحكم متطابقة عديمة الرائحة. أدى تقديم هذه الروائح بدون حاجز (أي كرة الشاي) إلى قيام الفئران بتمزيق الألياف داخل أقفاصها ، مما زاد من النشاط البدني. لم يكن هذا السلوك بارزا في الفئران. توفر كرات الشاي غلافا جيد التهوية للمنشفة ، مما يتيح الوصول الكامل إلى الرائحة مع الحفاظ على الحماية طوال التجربة التجريبية. يمكن تعقيم كرات الشاي هذه وفقا لبروتوكولات استخدام الحيوانات ، وإعدادها وإدخالها مباشرة بعد الجراحة لبدء تعويد الحيوانات على الهيكل جنبا إلى جنب مع حافز التحكم. يمكن للفئران بعد ذلك العيش مع التخصيب الإضافي ، مما يقلل من بروز عرض التحفيز الحاد.

التعود على وجود كرة الشاي هو جانب واحد فقط من التعود الذي يعتبر حاسما لهذه الطريقة. يتكون بروتوكول التعود الموصوف أيضا من التعرض المتكرر لإجراء الاختبار لتطبيع بيئة الاختبار (أي الأفراد والنقل والحركة إلى موقع الاختبار والتعرض للتحفيز). يقلل هذا التعود الممتد من الاستجابات الدقيقة من الحيوانات ويركز القياسات على المتغيرات التابعة المرغوبة (على سبيل المثال ، المحفزات الدوائية أو السياقية). حدد التقييم السابق لهذا البروتوكول أربع تجارب كحد أدنى لعدد الاعتيادات اللازمة قبل اختبار درجة الحرارة داخل الأقفاص المنزلية في الفئران8. إذا تم فصل الاختبار بفترات طويلة (أكثر من 2-3 أسابيع) ، فيجب تعويد الحيوانات مرة أخرى. بالنسبة للتعود المتكرر ، يكفي ما لا يقل عن تجربة أو تجربتين. ومع ذلك ، إذا تم فصل اختبارات درجة الحرارة عن طريق نوبات زمنية أطول ، فقد يكون من الضروري تكرار المزيد من التجارب.

في الجهود المستمرة لتعويد الفئران والجرذان على إجراء الاختبار ، يجب تضمين فترة تأقلم قبل عرض التحفيز في كل تجربة تجريبية. يعد وقت التأقلم هذا أمرا بالغ الأهمية لإعادة توازن درجة الحرارة والنشاط بعد نقله إلى موقع الاختبار. تميل القوارض إلى زيادة حادة في درجات الحرارة بسبب النقل. يجب أن يتكون التأقلم من 1 ساعة على الأقل دون تفاعل من المجرب في يوم الاختبار قبل أي إضافة لعامل دوائي أو محفزات سياقية. هذا ضروري كل يوم من الاختبار.

في اختبارات درجة حرارة القفص المنزلي المحددة ، تتمتع الفئران بالنطاق الحر لقفصها المنزلي للتجول استجابة للتحفيز الذي تم اختباره. يمكن أن يتسبب ذلك في حدوث تحولات متغيرة في النشاط ، مما يؤثر على دقة قراءات درجة الحرارة ، وبالتالي تحليل التأثيرات الحرارية للمتغير المستقل (على سبيل المثال ، التحفيز الدوائي أو السياقي). تقديرا للتغيرات المحتملة في درجة الحرارة بسبب مستوى النشاط ، يتم تضمين بروتوكول أدناه يصف استخدام درجة الحرارة أثناء المشي على جهاز المشي. تصف الأدبيات المنشورة الاستخدام الناجح لهذا الإجراء في الفئران ، ويتم استخدامه حاليا مع الفئران8،10،14،15. يحافظ المشي على جهاز المشي على سرعة ثابتة للنشاط لموضوع الاختبار. في هذه الدراسة ، يتم استخدام أجهزة المشي بشكل صارم للتحكم في مستوى النشاط ، وبالتالي ، يتم ضبطها على أقل سرعة متاحة على جهاز المشي لتعزيز المشي للفئران وإعداد منخفض مماثل للفئران.

تم تحديد الإجراء التالي لقياس درجة حرارة gastrocnemius من جانب واحد في الفئران وعرض رائحة المفترس. يمكن استخدام التصميم جنبا إلى جنب مع العوامل الدوائية ويمكن نقله إلى الفئران ومجموعات العضلات الهيكلية الأخرى (أي عضلات الفخذ) في الفئران. بالنسبة للفئران ، يمكن وضع أجهزة الإرسال والاستقبال في gastrocnemius بشكل ثنائي وفي الأنسجة الدهنية البنية. نظرا لقيود الحجم والمسافة ، يمكن استخدام جهاز إرسال واستقبال واحد فقط لكل ماوس. يمكن إجراء تعديلات طفيفة (على سبيل المثال ، إزالة المحفزات السياقية) لتقييم الاستجابات الحرارية للعوامل الدوائية.

Protocol

يمكن تطبيق هذه الطرق على كل من نماذج الفئران والفئران وتم تنفيذها بموافقة مؤسسية (جامعة ولاية كينت ، موافقة IACUC # 359 و # 340 CN 12-04). قبل تنفيذ البروتوكول ، يجب إيواء الحيوانات وفقا لدليل رعاية واستخدام المختبر. 1. إعداد قارئ جهاز الإرسال والاستقبال ملا…

Representative Results

تم زرع أجهزة الإرسال والاستقبال من جانب واحد في الساق الأيمن لعشرة فئران من النوع البري (WT) عمرها 4-6 أشهر تم تربيتها من سلالة SF1-Cre (خلفيات Tg (Nr5a1-cre) 7Lowl / J ، Strain # 012462 ، C57BL / 6J و FVB ؛ أنثى N = 5 ؛ ذكر N = 5). بعد الشفاء ، اعتادت الفئران على إجراء اختبار درجة حرارة القفص المنزلي الذي لم يتضمن حافزا سياقيا (…

Discussion

يوفر بروتوكول اختبار درجة الحرارة هذا للحقل وسيلة لقياس توليد الحرارة للعضلات الهيكلية مباشرة. هذا أمر بالغ الأهمية حيث تتعمق الأبحاث في تحديد الآليات الكامنة وراء توليد الحرارة العضلي33. توفر الطريقة بروتوكولين فعالين من حيث التكلفة لقياس توليد الحرارة للعضلات الهيكلية في …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

هذا العمل مدعوم من قبل R15 DK097644 و R15 DK108668. نشكر الدكتورة شيتانيا ك. جافيني والدكتورة ميغان ريتش على مساهماتهما السابقة والدكتور ستانلي دانيميلر لضمان امتثالنا لإرشادات الاستخدام المؤسسي للحيوانات. شكر خاص للدكتور تيم بارتنيس على تقديم البحوث الأساسية اللازمة لبناء هذه الطريقة والدراسات المرتبطة بها. تم إنشاء الأشكال 1A و C و D والشكل 2A باستخدام Biorender.com.

Materials

1012M-2 Modular Enclosed Metabolic Treadmill for Mice, 2 Lanes w/ Shock Columbus Instruments
1012R-2 Modular Enclosed Metabolic Treadmill for Rats, 2 Lanes w/ Shock Columbus Instruments
1-1/4 in. Ratcheting PVC Cutter BrassCraft
1 mL Syringes Fisher Scientific BD 309659
Betadine Swabs Fisher Scientific 19-898-945
Booster Coil BioMedic Data Systems Transponder Accessory
Electric Clippers Andis 40 Ultraedge Clipper Blade
Flexible Mirror Sheets Amazon Self Adhesive Non Glass Mirror Tiles
Forceps Fisher Scientific 89259-940
Heating Pad
Induction Chamber (isoflurane) Kent Scientific VetFlo-0730 3.0 L Low Cost Chambers for Traditional Vaporizers
Ketoprophen Med-Vet Intl. RXKETO-50
Magnetic Strips Amazon
Magnets Amazon DIYMAG Magnetic Hooks 40lbs
Needles Med-Vet Intl. 26400
Neomycin/Polymixin/Bacitracin with Hydrocortisone Ophthalmic Ointment, 3.5 g Med-Vet Intl. RXNPB-HC
Oasis Absorbable Suture Med-Vet Intl. MV-H821-V
Predator (Ferret) Odor Towels Marshall BioResources
PVC pipe
Reflex Wound Clip Remover CellPoint Scientific
Reflex Wound Clip, 7 mm (mouse) CellPoint Scientific
Reflex Wound Clip, 9 mm (rat) CellPoint Scientific
Srerile Autoclip, 7 mm (mouse) CellPoint Scientific Wound Clip Applier (mouse)
Stainless Strainers Interval Seasonings Tea Infuser Amazon
Sterile Autoclip, 9 mm (rat) CellPoint Scientific Wound Clip Applier (rat)
Sterile Saline Med-Vet Intl. RX0.9NACL-10
Surgical Scissors Fisher Scientific 08-951-5
Surgical Sheets
Towels (Control/Habituation) Amazon 100% Cotton Towels, white
Transponders BioMedic Data Systems Model: IPTT-300
Transponders Reader BioMedic Data Systems Model: DAS-8027-IUS/ DAS-7007R
Versaclean Fisher Scientific 18-200-700 liquid detergent
Webcol Alcohol Preps Covidien 22-246-073 
Wedge pieces for PVC pipe

References

  1. Periasamy, M., Herrera, J. L., Reis, F. C. G. Skeletal muscle thermogenesis and its role in whole body energy metabolism. Diabetes Metabolism Journal. 41 (5), 327-336 (2017).
  2. Rowland, L. A., Bal, N. C., Periasamy, M. The role of skeletal-muscle-based thermogenic mechanisms in vertebrate endothermy. Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 90 (4), 1279-1297 (2015).
  3. Maurya, S. K., et al. Sarcolipin is a key determinant of the basal metabolic rate, and its overexpression enhances energy expenditure and resistance against diet-induced obesity. Journal of Biological Chemistry. 290 (17), 10840-10849 (2015).
  4. Grigg, G., et al. Whole-body endothermy: Ancient, homologous and widespread among the ancestors of mammals, birds and crocodylians. Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 97 (2), 766-801 (2022).
  5. Franck, J. P. C., Slight-Simcoe, E., Wegner, N. C. Endothermy in the smalleye opah (Lampris incognitus): A potential role for the uncoupling protein sarcolipin. Comparative Biochemistry and Physiology – Part A: Molecular & Integrative Physiology. 233, 48-52 (2019).
  6. Nowack, J., et al. Muscle nonshivering thermogenesis in a feral mammal. Scientific Reports. 9, 6378 (2019).
  7. Oliver, S. R., Anderson, K. J., Hunstiger, M. M., Andrews, M. T. Turning down the heat: Down-regulation of sarcolipin in a hibernating mammal. Neuroscience Letters. 696, 13-19 (2019).
  8. Gorrell, E., et al. Skeletal muscle thermogenesis induction by exposure to predator odor. The Journal of Experimental Biology. 223, (2020).
  9. Gavini, C. K., et al. Leanness and heightened nonresting energy expenditure: Role of skeletal muscle activity thermogenesis. The American Journal of Physiology – Endocrinology and Metabolism. 306 (6), 635-647 (2014).
  10. Almundarij, T. I., Gavini, C. K., Novak, C. M. Suppressed sympathetic outflow to skeletal muscle, muscle thermogenesis, and activity energy expenditure with calorie restriction. Physiological Reports. 5 (4), 13171 (2017).
  11. Harshaw, C., Lanzkowsky, J., Tran, A. D., Bradley, A. R., Jaime, M. Oxytocin and ‘social hyperthermia’: Interaction with beta3-adrenergic receptor-mediated thermogenesis and significance for the expression of social behavior in male and female mice. Hormones and Behavior. 131, 104981 (2021).
  12. Caldwell, H. K. Oxytocin and vasopressin: Powerful regulators of social behavior. The Neuroscientist. 23 (5), 517-528 (2017).
  13. Harshaw, C., Leffel, J. K., Alberts, J. R. Oxytocin and the warm outer glow: Thermoregulatory deficits cause huddling abnormalities in oxytocin-deficient mouse pups. Hormones and Behavior. 98, 145-158 (2018).
  14. Gavini, C. K., Britton, S. L., Koch, L. G., Novak, C. M. Inherently lean rats have enhanced activity and skeletal muscle response to central melanocortin receptors. Obesity. 26 (5), 885-894 (2018).
  15. Gavini, C. K., Jones, W. C., Novak, C. M. Ventromedial hypothalamic melanocortin receptor activation: regulation of activity energy expenditure and skeletal muscle thermogenesis. The Journal of Physiology. 594 (18), 5285-5301 (2016).
  16. Zaretsky, D. V., Romanovsky, A. A., Zaretskaia, M. V., Molkov, Y. I. Tissue oxidative metabolism can increase the difference between local temperature and arterial blood temperature by up to 1.3(o)C: Implications for brain, brown adipose tissue, and muscle physiology. Temperature. 5 (1), 22-35 (2018).
  17. Yoo, Y., et al. Exercise activates compensatory thermoregulatory reaction in rats: A modeling study. Journal of Applied Physiology. 119 (12), 1400-1410 (2015).
  18. Langer, F., Fietz, J. Ways to measure body temperature in the field. Journal of Thermal Biology. 42, 46-51 (2014).
  19. Pence, S., et al. Central apolipoprotein A-IV stimulates thermogenesis in brown adipose tissue. International Journal of Molecular Sciences. 22 (3), 1221 (2021).
  20. Li, D., et al. Homeostatic disturbance of thermoregulatory functions in rats with chronic fatigue. Journal of Neuroscience Research. 165, 45-50 (2021).
  21. Carlier, J., et al. Pharmacodynamic effects, pharmacokinetics, and metabolism of the synthetic cannabinoid AM-2201 in male rats. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 367 (3), 543-550 (2018).
  22. Pato, A. M., Romero, D. M., Sosa Holt, C. S., Nemirovsky, S. I., Wolansky, M. J. Use of subcutaneous transponders to monitor body temperature in laboratory rats. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 114, 107145 (2022).
  23. Almeida, D. L., et al. Lean in one way, in obesity another: Effects of moderate exercise in brown adipose tissue of early overfed male Wistar rats. International Journal of Obesity. 46 (1), 137-143 (2022).
  24. Brito, M. N., Brito, N. A., Baro, D. J., Song, C. K., Bartness, T. J. Differential activation of the sympathetic innervation of adipose tissues by melanocortin receptor stimulation. Endocrinology. 148 (11), 5339-5347 (2007).
  25. Vaughan, C. H., Shrestha, Y. B., Bartness, T. J. Characterization of a novel melanocortin receptor-containing node in the SNS outflow circuitry to brown adipose tissue involved in thermogenesis. Brain Research. 1411, 17-27 (2011).
  26. Kort, W. J., Hekking-Weijma, J. M., TenKate, M. T., Sorm, V., VanStrik, R. A microchip implant system as a method to determine body temperature of terminally ill rats and mice. Laboratory Animals. 32 (3), 260-269 (1998).
  27. Mei, J., et al. Body temperature measurement in mice during acute illness: Implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8, 3526 (2018).
  28. Warn, P. A., et al. Infrared body temperature measurement of mice as an early predictor of death in experimental fungal infections. Laboratory Animals. 37 (2), 126-131 (2003).
  29. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
  30. Fiebig, K., Jourdan, T., Kock, M. H., Merle, R., Thone-Reineke, C. Evaluation of infrared thermography for temperature measurement in adult male NMRI nude mice. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 57 (6), 715-724 (2018).
  31. Franco, N. H., Geros, A., Oliveira, L., Olsson, I. A. S., Aguiar, P. ThermoLabAnimal – A high-throughput analysis software for non-invasive thermal assessment of laboratory mice. Physiology & Behavior. 207, 113-121 (2019).
  32. Koganti, S. R., et al. Disruption of KATP channel expression in skeletal muscle by targeted oligonucleotide delivery promotes activity-linked thermogenesis. Molecular Therapy. 23 (4), 707-716 (2015).
  33. Bal, N. C., Periasamy, M. Uncoupling of sarcoendoplasmic reticulum calcium ATPase pump activity by sarcolipin as the basis for muscle non-shivering thermogenesis. Philosophical Transactions of the Royal Society B. 375 (1793), 20190135 (2020).
  34. Hicks, C., et al. Body temperature and cardiac changes induced by peripherally administered oxytocin, vasopressin and the non-peptide oxytocin receptor agonist WAY 267,464: a biotelemetry study in rats. British Journal of Pharmacology. 171 (11), 2868-2887 (2014).
  35. Kasahara, Y., et al. Oxytocin receptor in the hypothalamus is sufficient to rescue normal thermoregulatory function in male oxytocin receptor knockout mice. Endocrinology. 154 (11), 4305-4315 (2013).
  36. Kasahara, Y., et al. Role of the oxytocin receptor expressed in the rostral medullary raphe in thermoregulation during cold conditions. Frontiers in Endocrinology. 6, 180 (2015).
  37. Yuan, J., Zhang, R., Wu, R., Gu, Y., Lu, Y. The effects of oxytocin to rectify metabolic dysfunction in obese mice are associated with increased thermogenesis. Molecular and Cellular Endocrinology. 514, 110903 (2020).
  38. Scholl, J. L., Afzal, A., Fox, L. C., Watt, M. J., Forster, G. L. Sex differences in anxiety-like behaviors in rats. Physiology & Behavior. 211, 112670 (2019).

Play Video

Cite This Article
Watts, C. A., Haupt, A., Smith, J., Welch, E., Malik, A., Giacomino, R., Walter, D., Mavundza, N., Shemery, A., Caldwell, H. K., Novak, C. M. Measuring Skeletal Muscle Thermogenesis in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (185), e64264, doi:10.3791/64264 (2022).

View Video