Una técnica quirúrgica modificada para el trasplante de riñón en ratones

Desde que Sakowitz et al. desarrollaron modelos de trasplante renal en 1973 por primera vez¹, ha demostrado ser una importante herramienta experimental para estudiar los mecanismos de la lesión isquémica del trasplante y el rechazo aloinmune, así como para desarrollar nuevos tratamientos destinados a prolongar la supervivencia del aloinjerto y posiblemente lograr la tolerancia inmunológica. Sin embargo, la técnica quirúrgica ha demostrado ser compleja y muy exigente, a veces con complicaciones como estenosis anastomóticas vasculares que conducen a insuficiencia prerrenal no inmunológica del trasplante renal², insuficiencia posrenal causada por isquemia y posterior necrosis del uréter trasplantado, estenosis de la anastomosis del uréter trasplantado y/o vejiga urinaria del receptor que conduce a una interrupción del flujo urinario. Todas estas son razones por las que el trasplante renal en ratones no se ha desarrollado más y, por lo tanto, no se usa ampliamente. Establecer un modelo de trasplante renal de ratón estable y efectivo a largo plazo sin complicaciones vasculares y del tracto urinario todavía tiene un significado insustituible para muchos estudios en el campo del trasplante con enfoque en las enfermedades inmunomediadas por el riñón pero también infecciosas³. Además, en comparación con otros trasplantes de órganos en modelos murinos como el trasplante de pulmón, corazón e intestino ^4,5, el modelo de trasplante de riñón de ratón ofrece una oportunidad para estudiar la supervivencia a largo plazo incluso en el contexto de una gran disparidad de antígenos de histocompatibilidad ^3,6. También se ha demostrado que en el mismo contexto de combinaciones de cepa donante-receptor diferentes trasplantes de órganos como corazón o riñón se caracterizan por diferentes dinámicas e inicios de rechazo del aloinjerto³. Además, desde el punto de vista nefrológico, es un modelo más adecuado para estudiar los mecanismos de regulación inmune mediados por parénquimas en el contexto de eventos de rechazo agudo y crónico que los simples experimentos de trasplante de piel.

Sobre la base de informes previos sobre la técnica quirúrgica de trasplante renal en ratones 3,7,8,9, aquí demostramos las siguientes mejoras fiables que se han aplicado con éxito durante los últimos 10 años dentro de nuestro grupo ^10,11,12: En primer lugar, la arteria ureteral se conserva de forma segura a medida que la arteria renal se reseca en bloque. junto con la parte respectiva de la aorta abdominal. En segundo lugar, una técnica nueva, simple y rápida de una anastomosis vascular sin nudos en la que la puntada final de la anastomosis no se ata con el extremo de la corbata superior como el enfoque tradicional, sino que permanece libre. Esta técnica permite aumentar o disminuir el tamaño de la anastomosis después de la reperfusión renal para evitar la estenosis de los vasos y el sangrado intraabdominal. En tercer lugar, se utilizaron agujas de jeringa de 21 G y 30 G como herramienta auxiliar de guía de punción para implantar el uréter donante en la pared de la vejiga del receptor reduciendo el daño a la vejiga del receptor y facilitando la formación de anastomosis libre de estenosis.

En este informe también comparamos la técnica tradicional y ampliamente utilizada con la modificada que se establece en nuestro laboratorio y no encontramos diferencias significativas en el grado de atrofia tubular renal y fibrosis del tejido intersticial trasplantado renal. En estudios previos, además, comparamos los resultados de esta nueva técnica con el método convencional en cuanto a hemorragia local, trombosis, tiempo de realización de la anastomosis del vaso y tasa de supervivencia. Se encontraron mejoras como reducciones significativas de los eventos de trombosis local (1,1% versus 6,6%), una reducción del tiempo para el procedimiento de anastomosis y una supervivencia a largo plazo del injerto singénico renal altamente reproducible (95% versus 84% con el enfoque clásico)¹⁰.