小児、青年、成人における味覚検出閾値を評価する精神物理学的追跡法:味覚閾値(TDT)試験

1. 一般的な考慮事項 注: TDT テストのこのプロトコルでは、例としてスクロースを使用して、味のソリューションを準備し、スクロース、NaCl、または MSG の味覚検出しきい値を決定するための手順について説明します。この方法は、ペンシルベニア大学の規制局によって承認されています。本明細書に記載の研究では、インフォームド・コンセントは、小児参加者の各成人参加者または親/法的保護者から得られた。情報に基づく同意は、参加前の7歳以上の各子から得られた。 表 1に示すように、1 M から 0.00010 M までの 17 個のソリューションを準備します。理想的には、蒸留水(dH2O)などの超純水を希釈剤として用い、味覚問題による水道水を使用しない12。溶液を最大2週間冷蔵しますが、以下に説明するプロトコルが付着している場合に限ります。 インフォームド・コンセントは、成人の参加者または親/法的保護者から取得され、該当する場合は、小児の参加者から同意し、理想的には期待のためのシンクを持っている快適な個室でテストを行います。溶液が飲み込まれず、むしろ口腔内にスウィッシュされ、吐き出されることを確認してください。シンクが利用できない場合は、唾を吐くための大きなカップを用意してください。 テスト担当者が香りの高い製品を着用していないことを確認し、会話を方法の説明や説明に制限します。成人の参加者と子供の参加者の両親/法的保護者に、参加者は水以外の飲食やタバコ製品(大人のみ)をテスト前に1時間使用することを控えるべきであることを指示します。 2. 味覚刺激ソリューションを作るための材料とレシピ 注: ストックソリューション (1000 mmol/L; 以下 、株式と呼びます ) およびスクロース、NaCl、または MSG のストックソリューションの 16 連続希釈 (四半期ログステップ) の詳細な手順をここに示します。 表1 は、各希釈工程の濃度を示す。 図1 は、希釈ステップ1~16を通じてストック溶液を作る手順を示しています。少なくとも4人の参加者のしきい値を決定するのに十分なソリューションの量。 歩 臼歯 スクロース(g/L) ナクル (g/L) MSG (g/L) (1/4 ログユニット離れています) 0 1 M 342.3 58.44 187.13 1 0.562 M 192.37 32.84 105.17 2 0.316 M 108.17 18.47 59.13 3 0.178 M 60.93 10.4 33.31 4 0.100 M 34.23 5.84 18.71 5 0.056 M 19.17 3.27 10.48 6 0.032 M 10.95 1.87 5.99 7 0.018 M 6.16 1.05 3.37 8 0.010 M 3.42 0.58 1.87 9 0.0056 M 1.92 0.33 1.05 10 0.0032 M 1.09 0.19 0.6 11 0.0018 M 0.62 0.11 0.337 12 0.0010 M 0.34 0.058 0.187 13 0.00056 M 0.19 0.033 0.105 14 0.00032 M 0.11 0.019 0.059 15 0.00018 M 0.06 0.0105 0.034 16 0.00010 M 0.03 0.0058 0.019 表1:スクロースの濃度ステップとそれに対応するモルリティ、塩化ナトリウム(NaCl)、および味覚閾値(TDT)試験に必要なグルタミン酸ナトリウム(MSG)溶液。 テスト資料を準備します。 食品グレードのスクロース、NaCl、またはMSGの供給源を入手してください。 必要なすべてのガラス製品を洗浄し、滅菌します( 材料表を参照)。 図1: 希釈手順 #1-16 でストックソリューションを作成する手順を説明します。 図 1A-Cに示すように、ストック ソリューションを作成します。 日付、タスタンの種類、およびストックですべてのガラス製品にラベルを 付けます。 0.01 gに正確なスケールで使い捨て計量ボートにタスタントを計量し、2000 mLビーカーに転送します。注:在庫を準備するために必要な量は、スクロースの場合は684.60g、MSGの場合は374.26 g、NaClの場合は116.88 gです。 計量艇に残っている任意のタスタントをdH2Oですすいで、ビーカーに注ぎます。1500 mLのdH2Oを加える。 漏斗を使用してビーカーの内容物を2000 mLの容積フラスコに移し、より多くのdH2Oでビーカーと漏斗をすすいで、すすい水をフラスコに注ぎます。フラスコをdH2Oで2000mLマークに充填し、フラスコにストッパーを貼り付けます。タンスタンが溶解するまで混ぜ合わせる。 図1D -Fに示すように、ソリューション#1-4を作成します。 ラベル 1000 mL 容積フラスコ番号 1 ~ 4 と、日付、タイプのタスタント、およびステップ 4へのストックを持つ 1000 mL のガラス瓶に対応します。 560 mL、320 mL、180 mL、および 100 mL のストックをフラスコ 1、2、3、および 4にそれぞれ移します。フラスコ1-4をdH2Oで1000mLマークに充填し、ストッパーを貼り付け、タスタンが溶解するまで混ぜます。必要に応じて、各フラスコの内容物を漏斗を使用して、対応する1000 mLガラス瓶(ステップ1~ステップ4とラベル付け)に注ぎます。 ストックとラベル付けボトルに残りの ストック溶液を注ぎます。蓋をしっかり閉め、冷蔵庫の中に4°Cで入れます。 図 1G-I に示すように、ソリューション#5-16を作成します。 日付、タスタンの種類、および ステップ5 から ステップ16までのラベル12 1000 mLボトル。 4 x 4 グリッドに、ステップ 1 ~ 4 のソリューションを含むボトルを最前列に並べます ( 図 1G-Iを参照)。注:この位置決めは、行の中で最も希薄化されたステップ(例えば、ステップ4)から始まり、最も集中したステップ(例えばステップ1)で終わるような単純な希釈シリーズを可能にする。 ステップ1、2、3、および4の50 mLをボトル5、6、7、および8にそれぞれパイプする。450 mLのdH2Oをボトル5-8に加え、ストッパーを貼り付け、インバートして混ぜる(図1 H)。 2 番目の行から開始するプロセスを繰り返します。ステップ5、6、7、および8の50 mLをボトル9、10、11、および12にそれぞれパイプする。ボトル9-12に450mLのdH2Oを加え、ストッパーを貼り付け、混ぜるために反転します。 3 行目 (図 1 I)からプロセスを繰り返します。ステップ9、10、11、および12の50 mLをボトル13、14、15、および16にそれぞれパイプする。ボトル13 – 16にdH2Oの450 mLを追加し、ストッパーを貼り付け、混ぜるために反転します。ボトル1~16に蓋をして蓋をしっかり閉め、冷蔵庫で4°Cで保管します。 数本の殺菌した120mLラベルのガラス瓶をdH2Oで満たし、蓋をしっかりと閉め、4°Cで冷蔵庫に保管します。 3. 心理物理学的方法: TDT 一方はタスタントともう一方のdH2Oの濃度である溶液のペアを含む薬のカップを参加者に提示します。注: 最初のペアでは、dH2O と組み合わせたタスタントは、NaCl または MSG のしきい値を決定する際にスクロースのしきい値とステップ 12を決定する場合の濃度ステップ10です。最初のステップでのタスタントの濃度は、それぞれがその特定のタスタントの平均検出閾値を数ステップ下回っているので選択されました。それでもTDTは、平均値を上回るか下回るかに関係なく、閾値を測定するための信頼性の高いツールです。 飲み込まずに両方の溶液を味わい、試飲の合間にdH2Oで口をすすいすります。彼らはそれに味を持っているか、水とは異なる味を持っていると思う薬のカップを指し示すためにそれらを指示します。注:後続のペアで提示されるタスタントの濃度は、参加者の応答が正しいかどうか(すなわち、参加者がタスタントを指したかどうか)によって異なります。この方法は強制選択手順であり、参加者が「どちらも」または「わからない」と言っても応答できないことを意味します。むしろ、2つのソリューションのいずれかを選択する必要があります。この方法は、参加者の応答13に応じて、味覚刺激が上昇(タスタントの高濃度)または降下(タンスタントの低濃度)順で提示されるため、階段手順である。説明を容易にするために、スクロースシリーズを作り、スクロース検出閾値を決定するための指示が提供されている。MSGとNaClの方法は、(a)ストック溶液を異なるようにするために必要なタスタントの濃度が異なる(表1)、(b)上述のように、テストが開始される濃度は、ショ糖のステップ10ではなく、NaClまたはMSGのステップ12です。 小児集団の検出閾値を評価する場合、テストはセッションごとに単一のタスタントに制限されます。注: 成人は、1 回のセッションで 3 つのしきい値をすべて完了できます。 図2: 閾値追跡グリッド( A)味覚検出の閾値を記録する。(B) 1台のトレイのセットアップ この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。 4. 試験前の材料の準備 ペア内で刺激を提示する順番をランダム化シーケンスとして生成し、水が最初に来る場合はボックスにWを配置し、Tを最初に来る場合はTを配置して、各ペアのトラッキンググリッドの一番上の行(図2A)を記入します。 溶液を含むボトル(ステップ0~16)とdH2Oを冷蔵庫から取り出し、試験前に120mL滅菌ガラスボトルを適切にラベル付けして各ステップに対して溶液の約120mLを移します。 ステップ0~16本を冷蔵庫に戻し、移送液を室温に平衡化させます。 ラベル2、12カップマフィンパンをペア番号で、DH 2O医学カップをWで保持するマーク位置(図2B)。注:必要なペアの数は不明ですが、最初の6組の場合は 、W 位置にある薬のカップを10 mLのdH2Oで満たしてください。 5. 試験のための参加者の準備 大人にタバコ製品の食べたり、飲んだり、使用したりするのを控えるように指示し、テストの前に少なくとも1時間は子供の参加者に何か食べたり飲んだりしないように親に指示します。 1 人の参加者を用紙の前のテーブルに 1 と2 の数字(図 3)というラベルを付けて座ります。注:参加者は、彼らが彼らの前に置かれるまで、味覚刺激を見るべきではありません。これは、不透明なパーティションが参加者と調査員を分離することで達成できます。 参加者が少なくとも10分間、試験室とテスターに順応することを許可します。 ストップウォッチを使用して、10秒の刺激間隔(第1刺激の期待から第2刺激をすする時間)を時間に合う。 図3:味の閾値検出試験に参加している子。一対のソリューションは、参加者が味わうべき順序で前のテーブルの上に置かれます。参加者は、5秒間の位置1で溶液を味わい、期待し、dH2 Oで口をすすい、そして2位の溶液について繰り返すように求められる。両方の溶液を試飲した後、参加者は、味または味が水とは異なる溶液を指すように求められます。この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。 6. 参加者への口頭での指示 小児科参加者 参加者にカップを見せて、「私たちは味わうものと一緒にゲームをするつもりです。ここに2つのカップがあります。あなたは最初のカップの中にあるものを味わい、口の周りをスウィッシュしますが、飲み込まないでください、そして、私はシンク(またはカップ)にそれを吐き出すタイミングを教えてくれます。その後、水ですすいで、2番目のカップの中にあるものを味わいます。いつ吐き出したらいいか教えてあげよう。その後、私はあなたに水とは異なる味のものを指してほしい。あなたがわからない場合は、推測してください。その後、水で口を2回すすいで、私たちは再びこれを行います。正しい答えも間違った答えもありません。どちらが味を持っていると思うかを知りたい」 すべての応答の後、参加者に「ありがとう」と言って報酬を与えます。あなたは良い仕事をしています! 青年と大人 参加者にカップを見せて、「私たちはあなたに味わいの解決策を与えるつもりです。ここに2つのカップがあります。あなたは最初のカップの中にあるものを味わい、口の周りをスウィッシュしますが、飲み込まないでください、そして、私はシンク(またはカップ)でそれを吐き出す時期を教えてくれます。その後、水ですすいで、2番目のカップの中にあるものを味わいます。いつ吐き出したらいいか教えてあげよう。その後、私はあなたに水とは異なる味のものを指してほしい。あなたがわからない場合は、推測してください。その後、水で口を2回すすいで、私たちは再びこれを行います。正しい答えも間違った答えもありません。どちらが味を持っていると思うかを知りたい」 すべての応答の後、参加者に「ありがとう」と言って報酬を与えます。あなたは良い仕事をしています! 7. 調査指示:味検出の閾値 トラッキング・グリッドに示されているように、ショ糖のステップ10から開始します(または、NaClまたはMSGの場合はステップ12)。ステップ10の10mLを含む1個と、参加者の前に1と2の用紙にdH2Oを含む1つの薬のカップを置く(図3)。注:水または味液が置かれる数は、生成されたランダム化された刺激表示の順序によって決定されます。例えば、 図2では、ペア1のランダム化順は W( 水第1位)であり、水を含むカップは位置 1にあり、 ステップ10 を含むコップは位置 2にある。 スウィッシュによって位置 1 の溶液を味わうように参加者に指示します。5 sの後、参加者に期待し、口を水ですすい、また期待するように指示する。 スウィッシングにより 2 位の溶液を味わい、5秒間後に期待するように参加者に指示する。 水とは異なる味や味を持つ溶液を指し示す参加者に依頼します。参加者がどちらも言っていない場合は、参加者に選択するように指示します。注:参加者は戻ってどちらの解決策も好きになれないため、2つのうち1つを選択する必要があります。 彼らが選択した後、彼らの選択をした後、彼らの口を水ですすぐように指示し、参加者がタスタント(正しい応答)でカップを選んだ場合はグリッドにプラス記号(+)を置き、水でカップを選んだ場合はマイナス記号(-)を置きます( タスタントの濃度は最初のペアの参加者の応答に依存することに気づいて、2番目のペアに進みます。最初のペアで参加者が正しくない場合 (参加者が Wを選択した)、2 番目のペアのタスタントが次に高い濃度になることに注意してグリッド上に進みます (ステップ 9)。参加者が正しければ (Tを選択した)、2 番目のペアのタスタントは同じ ステップ 10になることに注意してください。表示順序 (先にW または T) については、グリッドを参照してください。 手順 7.2 ~ 7.5 で説明するこの手順を繰り返します。ステップ10で参加者が2回連続して正しい場合(Tを両方ともピックする)、次のペアには次の低濃度が含まれることを覚えておいてください(ステップ11)。ペア 2 (ピックW)の参加者が正しくない場合は、グリッド上から次に高い濃度に進みます (ステップ 9)。 このプロセスを続行し、正しくない答えごとにグリッドを次の高濃度に上げるか、2つの正解の後にグリッドを次の低濃度に下げます。 参加者の応答の精度の方向の変化、つまり、参加者が階段の次のステップを試飲するときにタスタントを識別することに多かれ少なかれ成功した場合、 逆転があるグリッド上のステップを丸で囲みます。注:具体的には、参加者は1つのステップでTを識別しなかった場合(-)、次のより集中したステップでTを2回連続して識別することに成功するか(++)、または参加者は、次の集中ステップが少ないときにTを識別しないことに成功します。この失敗は、集中度の低いステップの最初または 2 番目のプレゼンテーション(-または+-) の間に発生する可能性があります。 4つの逆転が達成されるまで味のテストを続け、これらの4つの逆転のステップ番号をリストします。 4 つの逆転が目的の基準を満たしていることを判断します。 つまり、連続する逆転は互いに2段階以下であり、参加者が同じステップで T を2回正しく識別するペアの2組があります。 STOP を実行し、7.13 に進んで検出しきい値を計算します。 または、4 つの逆転が基準を満たしていないことを判断します。すなわち、連続反転は互いに2段階以上離れているか、または少なくとも2組のペアが存在しないが、参加者は同じステップでTを2回正しく識別した。4つの逆転が基準を満たすまでテストを続行するか、または参加者がグリッドの上部に到達するか(しきい値は1 M(ストック))、正解を提供し続けてグリッドの底に達し、ステップ16で2回正しい応答を与えます(しきい値は0.00010 M(ステップ16))。 これらの4つの反転のモルティフィティのログ値の算術平均を計算して、参加者の検出しきい値を決定します。算術平均=(逆転1+逆数の対数集中工程1+逆数2+逆仕訳の対数集中工程3+逆仕訳4の対数集中工程)/4。注: これは、最後の 4 つの反転の濃度の幾何平均を計算するのと同等です。 試験用材料の調製中に120mLボトルに移された未使用の味液を廃棄します。