プリンデキストラン硫酸ナトリウムによる大腸炎モデルにおける腸内炎症の系統的採点解析

消化管上皮バリアは、下層の組織区画1から発光抗原および病原体を分離する上で極めて重要な^役割を果たす。炎症性腸疾患(IBD)、虚血、または外科的傷害などの病理学的状態で見られる上皮損傷および粘膜創傷は、下痢、体重減少、便中の血液、および腹痛を含む臨床症状に関連している。傷害に対して、上皮細胞は粘膜バリア欠陥を再上皮化および修復するために移動し、増殖する。炎症の解決と粘膜完全性の払戻は、腸粘膜恒常性および機能^2、3、4を再確立するために極めて重要である。

腸上皮バリアの損傷に関連する基礎的な分子メカニズムを研究するために、様々な動物モデルが採用されています。化学的に誘発された大腸炎の確立された、容易に適用可能なモデルは、特にIBDのような炎症性傷害に関連する研究において広く使用されている。一般的な、再現性、信頼性の高いマウス大腸炎モデルは、デキストラン硫酸ナトリウム(DSS)媒介大腸損傷および炎症を採用しています。疾患の重症度は、マウス株、DSSの用量、DSS投与の長さ、およびDSS^5、6、7の分子量によって異なる。

DSS大腸炎中の腸粘膜損傷は、通常、体重減少、便血量、および便の一貫性によって決定される複合スコアである疾患活性指数(DAI)を用いて評価される。便の血液量は、微視的(便グアイアック酸試験を使用して検出)または巨視的であり得る。便の一貫性は、硬、軟、または液体(すなわち、下痢^)5、8に分類される。これらの臨床パラメータのスコア付けは主観的であり、ユーザーの経験やバイアスによって異なる可能性がありますが、全体的にはデータが信頼できる情報を提供し、IBDの研究者によって広く使用されています。対照的に、粘膜損傷の組織学的評価のための一般的に受け入れられている方法はない。最も一般的には、結腸の選択された領域は、訓練を受けた病理学者によって検査され、通常、脊髄損傷および白血球浸潤^9、10、11を含むいくつかのパラメータに基づいて採点される。しかし、調査対象のパラメータの数と分析した組織の量は個々の報告によってかなり異なるため、多くの公表された研究の比較可能性は限られている。観察者の偏見を減らし、研究間のコンコーダンスを強化するために、理想的な組織学的スコアリングプロトコルは、腸粘膜の炎症が最も頻繁に可変であり、スキップ病変が一般的であるため、結腸の全長を含むべきである、2)特定のキーに限定分析し、主観性を低下させるために容易に解釈可能なパラメータ、3)多数のサンプルの高速で一貫した処理を容易にし、4)広く利用可能で手頃な価格のツールを使用してデータを取得し、4)広く利用可能で手頃な価格のツールを使用する。

ここでは、小腸の結腸全体または長いセグメントを「スイスロール」構成で処理する技術と、DSS誘発性大腸炎による腸粘膜炎症および損傷を分析するための無料のコンピュータ支援スコアリングシステムの使用について説明する。