Analyse systématique de notation pour l’inflammation intestinale dans un modèle de colite induite par le sulfate de sodium murine dextran

La barrière épithéliale gastro-intestinale joue un rôle central dans la séparation des antigènes luminaires et des agents pathogènes des compartiments tissulaires^{sous-jacents 1}. Les dommages épithéliales et les blessures muqueuses vus dans des conditions pathologiques telles que la maladie intestinale inflammatoire (IBD), l’ischémie, ou les dommages chirurgicaux sont associés aux symptômes cliniques qui incluent la diarrhée, la perte de poids, le sang dans les selles, et la douleur abdominale. En réponse aux dommages, les cellules épithéliales migrent et prolifèrent pour rééthéthélialiser et réparer les défauts muqueux de barrière. La résolution de l’inflammation et la restitution de l’intégrité muqueuse sont cruciales pour rétablir l’homéostasie muqueuse intestinale^{et la fonction 2,3,4}.

Divers modèles animaux ont été utilisés pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents qui sont associés aux dommages à la barrière épithéliale intestinale. Des modèles bien établis et facilement applicables de colite induite chimiquement sont largement utilisés, particulièrement dans les études liées aux dommages inflammatoires tels que IBD. Un modèle commun, reproductible, et fiable de colite murine emploie le sulfate de sodium dextran (DSS) a 2gé des dommages coloniques et l’inflammation. La gravité de la maladie varie selon la souche de souris, la dose de DSS, la longueur de l’administration de DSS, et le poids moléculaire de DSS^5,6,7.

Les dommages muqueux intestinaux pendant la colite de DSS sont habituellement évalués utilisant l’indice d’activité de la maladie (DAI), un score composite déterminé par la perte de poids, la teneur en sang fécale, et la consistance de selles. La teneur en sang fécal peut être microscopique (détectée à l’aide d’un test d’acide guaiac selles) ou macroscopique; la consistance fécale est classée comme dure, molle ou liquide (c.-à-d. diarrhée)^5,8. La notation de ces paramètres cliniques peut être subjective et peut varier en fonction de l’expérience et du parti pris de l’utilisateur, bien que dans l’ensemble, les données fournissent des informations fiables et sont donc largement utilisées par les chercheurs en MII. En revanche, il n’y a aucune méthode généralement acceptée pour l’évaluation histologique des dommages muqueux. Le plus souvent, certaines zones du côlon sont inspectées par un pathologiste formé et notées en fonction de plusieurs paramètres qui incluent habituellement des dommages de crypte et l’infiltration de leucocyte^9,10,11. Toutefois, comme le nombre de paramètres étudiés et la quantité de tissu analysé varient considérablement d’un rapport à l’autre, la comparabilité de nombreuses études publiées est limitée. Pour réduire le biais des observateurs et améliorer la concordance inter-études, un protocole de notation histologique idéal devrait : 1) inclure toute la longueur du côlon, car l’inflammation muqueuse intestinale est le plus souvent variable et les lésions de saut sont courantes, 2) limiter l’analyse à des paramètres clés et facilement interprétables spécifiques pour réduire la subjectivité, 3) faciliter le traitement rapide et cohérent d’un grand nombre d’échantillons, et 4) utiliser des outils largement disponibles et abordables pour l’acquisition, l’analyse et la présentation de données.

Ici, nous décrivons une technique pour traiter l’ensemble du côlon ou de longs segments de l’intestin grêle dans une configuration « rouleau suisse » avec l’utilisation d’un système de notation assisté par ordinateur gratuit pour analyser l’inflammation muqueuse intestinale et les dommages causés par la colite induite par le DSS.