Het doel van dit protocol is om gesimuleerde hydrothermale schoorstenen te vormen via chemische tuininjectie-experimenten en een thermische gradiënt over het anorganische neerslagmembraan te introduceren, met behulp van een 3D-printbare condensor die kan worden gereproduceerd voor educatieve doeleinden.
Diepzee hydrothermale ventilatieopeningen zijn zelforganiserende neerslagen die worden gegenereerd door geochemische disequilibrie en zijn voorgesteld als een mogelijke setting voor het ontstaan van leven. De groei van hydrothermale schoorstenen in een thermische gradiëntomgeving binnen een vroeg aardventilatiesysteem werd met succes gesimuleerd door verschillende hydrothermale simulanten te gebruiken, zoals natriumsulfide, die werden geïnjecteerd in een vroege oceaansimulant op aarde die opgelost ijzer bevat. Bovendien werd een apparaat ontwikkeld om de oceaansimulant voldoende te koelen tot bijna 0 °C in een condensorvat ondergedompeld in een koudwaterbad terwijl een sulfideoplossing bij warme tot kamertemperatuur werd geïnjecteerd, waardoor effectief een kunstmatige schoorsteenstructuur in een temperatuurgradiëntomgeving werd gecreëerd gedurende een periode van enkele uren. Dergelijke experimenten met verschillende chemische stoffen en variabele temperatuurgradiënten resulteerden in een verscheidenheid aan morfologieën in de schoorsteenstructuur. Het gebruik van oceaan- en hydrothermale vloeistofsimulanten bij kamertemperatuur resulteerde in verticale schoorstenen, terwijl de combinatie van een hete hydrothermale vloeistof en koude oceaansimulant de vorming van robuuste schoorsteenstructuren remde. De aanpasbare 3D-geprinte condensor die voor deze studie is gemaakt, fungeert als een omhuld reactievat dat gemakkelijk kan worden gewijzigd en gebruikt door verschillende onderzoekers. Het zal de zorgvuldige controle van de injectiesnelheid en chemische samenstelling van vent- en oceaansimulanten mogelijk maken, wat zou moeten helpen bij het nauwkeurig simuleren van prebiotische reacties in schoorsteensystemen met thermische gradiënten die vergelijkbaar zijn met die van natuurlijke systemen.
Hydrothermale schoorstenen zijn zelforganiserende chemische tuinprecipitaten die worden gegenereerd door geochemische onuitwiskunde in diepzee-ventilatieomgevingen als verwarmde, hydrothermisch veranderde vloeistof in een koudere oceaan sijpelt. In een vroeg aardscenario is voorgesteld dat de schoorstenen zich vormden bij oude alkalische ventilatieopeningen en dat transecting ambient pH / redox / chemische gradiënten reacties zouden kunnen hebben aangedreven in de richting van het ontstaan vanmetabolisme 1,2,3,4,5,6. Hydrothermale ventilatieopeningen zijn ook gepostuleerd om te bestaan op andere planeten, waaronder de oceaanwerelden, Europa en Enceladus7,8,9,10. Verschillende experimenten zijn uitgevoerd om aspecten van voorgestelde prebiotische hydrothermale schoorsteenchemie te simuleren, waaronder precipitatie van katalytische ijzersulfidemineralen die CO211,12,gradiëntgestuurde organische synthese13,14,15en opname van organische stoffen in schoorsteenstructuren kunnen verminderen16. Bij het creëren van experimentele opstellingen om hydrothermale ventilatieopeningen na te bootsen, zowel op aarde als op andere werelden, is het essentieel om rekening te houden met de geochemische gradiënten en de open, verre van evenwicht aard van het systeem om realistische simulaties te produceren.
Naast pH, redox en chemische gradiënten, leggen hydrothermale ventilatieopeningen ook een thermische gradiënt op over het schoorsteenmembraan / de wand als gevolg van de toevoer van verwarmde ontluchtingsvloeistof naar een koude zeebodemomgeving. Koude zeebodem oceaantemperaturen kunnen variëren als een functie van diepte, zonnepenetratie en zoutgehalte; de gemiddelde diepten van de oceaanbodem op ventlocaties (meestal op mid-oceanische ruggen) liggen in het bereik van 0-4 °C17. Afhankelijk van het type ventilatieopening kan de thermische gradiënt tussen oceaan- en ventilatievloeistof dramatisch variëren – van de mildere gradiënten van alkalische ventilatieopeningen, zoals Lost City18,19 of het Strytan Hydrothermal Field waar de ontluchtingsvloeistof 40-90 ° C20,21is, tot de zwarte rokers op de diepzeebodem waar de ventilatievloeistof enkele honderden graden Celsius22kanbereiken, 23,24,25. Vanuit het perspectief van de oorsprong van het leven is simulatie van thermische gradiënten in hydrothermale systemen belangrijk omdat ze de mineralogie en chemische reactiviteit van schoorsteenprecipitaten3,13 kunnen beïnvloeden en / of de bewoonbaarheid kunnen beïnvloeden, aangezien hydrothermale schoorstenen microben herbergen die elektronen rechtstreeks van minerale oppervlakken opnemen26. In een gradiënt over de schoorsteenwand zou over een korte afstand een reeks temperatuuromstandigheden aanwezig zijn en de schoorsteenwand zou een combinatie van mineralen en reacties vertegenwoordigen die kenmerkend zijn voor al deze thermische regimes.
In het laboratorium gekweekte hydrothermale schoorstenen in thermische gradiënten werden gesimuleerd om de effecten van de koude oceaan en hete hydrothermale vloeistof op deze potentiële prebiotische omgeving te onderzoeken. Over het algemeen, omdat het kweken van gesimuleerde hydrothermale schoorstenen via een injectiemethode met een verwarmde binnen- en koude buitenkant praktische uitdagingen met zich meebrengt, zijn de meest toegankelijke schoorsteenexperimenten die gedaan bij omgevingsdruk (daarom zijn er geen dure en gecompliceerde reactoren nodig). Eerdere pogingen tot in het laboratorium gekweekte schoorstenen in een thermische gradiënt zijn niet in staat geweest om zowel een hete / warme hydrothermale vloeistof als een koude oceaan te produceren. In een poging om de hele schoorsteen langdurig op hoge temperatuur te houden om reactieve mineralen te vormen die organische reacties kunnen veroorzaken, verwarmden sommige studies het hele experiment (oceaan- en hydrothermale vloeistof) tot ~ 70 ° C met behulp van een verwarmingsmantel of een warm bad13,14. Een ander type schoorsteenprecipitaatvormingsexperiment, in een “brandstofcel” -apparaat, vormde de schoorsteenwandsimulant op een plat membraansjabloon; deze experimenten zijn ook in bulk verwarmd door het brandstofcelgradiëntapparaat onder te dompelen in een warmwaterbad27,28. Eerdere studies hebben gesimuleerde hydrothermale schoorstenen gevormd uit hete hydrothermale vloeistoffen (verwarmd tot ~ 70 ° C met behulp van verschillende methoden) geïnjecteerd in een oceaan op kamertemperatuur3,12; een koude oceaan is echter niet geprobeerd.
Dit werk bevordert methoden voor prebiotische schoorsteengroeilaboratoriumsimulaties4 om een realistische thermische gradiënt te creëren van een koude (0-5 ° C) oceaan naar een verwarmde hydrothermale vloeistof om schoorsteenmaterialen te synthetiseren en interessante eigenschappen te testen. Tot op heden zijn er geen prebiotische schoorsteenexperimenten met succes uitgevoerd met een realistische temperatuurgradiënt voor alkalische ventilatieopeningen: met de binnenste ontluchtingsoplossing op ~ 70 ° C gehouden en de buitenste oceaanoplossing gekoeld tot ~ 5 ° C. Bovendien is in de weinige verwarmde schoorsteenexperimenten die zijn uitgevoerd, de experimentele opstelling complex en kan deze kostbaar zijn. Chemische tuinexperimenten hebben een groot potentieel om inzichten op te leveren over de processen die mogelijk hebben plaatsgevonden in hydrothermale ventilatieopeningen op de vroege aarde. Daarom is de mogelijkheid om snel meerdere variaties van een schoorsteenexperiment op te zetten voordelig, net als de mogelijkheid om een eenvoudig apparaat te hebben dat goedkoop, niet-fragiel, gemakkelijk te wijzigen en ideaal is voor studenten om mee te werken. Hier wordt een nieuw apparaat gepresenteerd (figuur 1) dat is ontworpen om de groei van een gesimuleerde hydrothermale schoorsteen te vergemakkelijken met behoud en bewaking van een realistische thermische gradiënt tussen de koude oceaan en de verwarmde hydrothermale vloeistofsimulant. Dit experimentele apparaat is qua ontwerp vergelijkbaar met een mantelreactor, maar is een driedimensionale (3D) geprinte condensor die gemakkelijk kan worden geproduceerd door elke onderzoeksgroep die geïnteresseerd is in het uitvoeren van vergelijkbare experimenten (zie Aanvullend afdrukbaar bestand). Met behulp van deze 3D-geprinte condensorator werden thermische gradiënt schoorsteenexperimenten uitgevoerd om het nut van dit apparaat te testen voor het handhaven van robuuste temperatuurgradiënten en om de effecten van temperatuurgradiënten op schoorsteenstructuur en morfologie te testen.
Effect van thermische gradiënten op gesimuleerde schoorsteengroei: Dit experimentele apparaat leverde verschillende variaties in schoorsteenmorfologieën op die te wijten waren aan verschillende experimentele parameters. Schoorstenen van ijzersulfide en ijzerhydroxide vormden hoge rechtopstaande structuren bij kamertemperatuur, maar vormden meer ijle, sliertige neerslagen of platte heuvels in de thermische gradiëntexperimenten. Dit was in overeenstemming met de bevindingen van Herschy et al. waar piekerige, niet-rechtopstaande schoorsteenprecipitaten werden gevormd uit een hydrothermale vloeistof verwarmd tot 70-80 ° C en geïnjecteerd in oceaansimulant op kamertemperatuur33. Er zijn verschillende mogelijke verklaringen hiervoor: convectieve warmteoverdracht kan meer natuurlijke drijvende krachten veroorzaken (samen met het geforceerde pompen van de injectie) om het neerslag snel naar de top van het oceaanschip te laten stromen terwijl het zich vormt. Als alternatief maakt het verwarmen van de spuitvloeistof de hydrothermale simulant minder dicht en dus meer geneigd om verticaal te stijgen dan om bovenop het injectiepunt te stabiliseren. Het is mogelijk dat dit effect kan worden verzacht door de injectiesnelheid van de spuit te wijzigen in langzamere snelheden om de groei van een stabielere structuur mogelijk te maken. White et al. onderzochten de groei van ijzersulfide schoorsteen met de hydrothermale simulant geïnjecteerd met extreem langzame snelheden (0,08 ml / h), en hoewel de schoorsteen dagen nodig had om samen te smelten, was deze structureel stabiel13. Aangezien Herschy et al. peristaltische pompen gebruikten met injectiesnelheden van 10-120 ml / h, wat enkele ordes van grootte sneller is dan de snelheden die worden gebruikt in onze thermische gradiëntexperimenten, is het niet verwonderlijk dat ze ook snaarachtige schoorsteenstructuren produceerden33.
Hogere concentraties neerslaande reactanten in de oceaan en ontluchtingsoplossingen kunnen ook robuustere schoorstenen in thermische gradiënten opleveren. Hogere chemische concentraties van neerslaande ionen (sulfide of hydroxide) in de hydrothermale vloeistof of oceaansimulant kunnen leiden tot een hogere totale neerslagmassa, waardoor een sterkere structuur ontstaat. Omdat Herschy et al. en White et al. lagere concentraties sulfide in de hydrothermale vloeistof (10 mM) gebruikten, waren hun structuren kleiner dan die geproduceerd in dit werk met hogere (20-50 mM) sulfideconcentraties. Bovendien hebben sommige studies van ijzersulfide schoorsteengroei ook silica in de hydrothermale vloeistof opgenomen, samen met het natriumsulfide, wat kan helpen bij het produceren van robuustere schoorstenen3,13,33. Silica chemische tuinstructuren zijn ook gebruikt om aspecten van hydrothermale schoorsteengroei te simuleren34, en deze hebben de neiging om zeer robuuste structuren te produceren die uit de buis / flacon kunnen worden verwijderd voor fysische analyse. De effecten van temperatuurgradiënten op silica-injectiestructuren zijn echter niet bekend en zullen een gebied van verdere studie zijn.
Overwegingen voor toekomstige schoorsteensimulatie-experimenten:De 3D-geprinte condensor die in deze studie werd gemaakt om het oceaanschip te koelen, werkte als een ommanteld reactievat, maar met enkele praktische verbeteringen: 1) de open bovenkant maakte bemonstering van de schoorsteen mogelijk en het onderhouden van de anoxische oceaanhoofdruimte; 2) het 3D-geprinte deel verleende gemakkelijke reproduceerbaarheid; 3) omdat de ontwerpen digitaal kunnen worden bewerkt, kan het apparaat snel worden gewijzigd en indien gewenst opnieuw worden afgedrukt; en 4) het gebruik van goedkope materialen maakte elke condensor kosteneffectiever dan de eigenlijke reactievaten met glazen mantel. Deze 3D-geprinte condensors zijn een flexibel en gemakkelijk te delen experimenteel apparaat dat een nuttige manier kan zijn om platforms te standaardiseren voor gesimuleerde hydrothermale schoorsteenexperimenten in verschillende onderzoeksgroepen, waardoor een betere vergelijking van monsters en gegevens mogelijk is. Bestanden van de condensor kunnen naar collega’s worden gestuurd om zelfstandig te printen voor hun educatieve of wetenschappelijke doeleinden (zie Aanvullend 3D-printbestand van de condensor die in dit werk wordt gebruikt). Deze goedkope opstelling kan ook worden gebruikt als een niet-gegradueerd laboratoriumexperiment voor chemische tuinen of chemobrionics29,35.
Concluderend beschrijft dit werk een nieuw experimenteel apparaat dat 3D-printen gebruikt om de groei van gesimuleerde hydrothermale schoorstenen in temperatuurgradiëntomgevingen te vergemakkelijken. De 3D-geprinte condensor is in staat om de oceaansimulant te koelen tot temperaturen in de buurt van bijna-vriestemperaturen, vergelijkbaar met het zeewater in de buurt van hydrothermale systemen op de zeebodem. Ondertussen werd een verwarmde spuit gebruikt om de hydrothermale vloeistof op hoge temperatuur te simuleren die in deze koude oceaan injecteerde. De morfologieën en structuren van ijzersulfide- en ijzerhydroxideschoorstenen werden beïnvloed door de thermische gradiënt: wanneer zowel de oceaan als de hydrothermale vloeistofsimulanten op kamertemperatuur waren, vormden de schoorstenen verticaal georiënteerde structuren, maar toen de hydrothermale vloeistof werd verwarmd en de oceaan werd afgekoeld, werd de vorming van robuuste schoorsteenstructuren geremd. Voor het nauwkeurig simuleren van prebiotische reacties in dergelijke schoorsteensystemen met thermische gradiënten analoog aan die van natuurlijke systemen, zal het nodig zijn om parameters zoals injectiesnelheid en chemische samenstelling van zowel vent- als oceaansimulanten zorgvuldig te regelen. De aangepaste en goedkope 3D-geprinte condensor die voor deze studie is gemaakt, is qua functie vergelijkbaar met een omhuld reactievat en kan eenvoudig elektronisch worden gewijzigd en gedistribueerd naar verschillende onderzoeks- en onderwijsgroepen voor gebruik in vele soorten chemobrionische experimenten.
The authors have nothing to disclose.
Dit onderzoek werd uitgevoerd in het Jet Propulsion Laboratory, California Institute of Technology, onder een contract met NASA, ondersteund door het NASA Astrobiology Institute Icy Worlds. Dr. Gabriel LeBlanc werd gedeeltelijk ondersteund door een Research Initiation Grant (2017-34) via de Oklahoma NASA EPSCoR Cooperative Agreement (NNX15AK42A). We willen Heather Whitehead bedanken voor hulp bij het eerste 3D-geprinte condensorontwerp, Kalind Carpenter voor hulp bij 3D-printen, John-Paul Jones voor nuttige discussie over condensorvaten, Laura Rodriguez voor hulp bij temperatuurgegevensanalyse en Erika Flores met laboratoriumassistentie. Copyright 2020 California Institute of Technology.
3/8-Inch Clear Vinyl Tubing | Watts | SVIG10 | Cut to desired length for experiment |
40-pin Male to Female Wire Jumper Multicolored Ribbon Cables | EDGELEC | ED-DP_L30_Mix_120pcs | These wires will require stripping of plastic ends and carefully removing one of the 2 plastic casings |
Aluminum seals | Fisher | 0337523C | Thermo Scientific National Headspace 20 mm Crimp Seals |
Ferric chloride hexahydrate | Fisher | I88-100 | Ferric Chloride Hexahydrate (Lumps/Certified ACS) |
Ferrous chloride tetrahydrate | Fisher | I90500 | Ferrous Chloride Tetrahydrate (Crystalline/Certified) |
Gear Hose Clamps | Glarks | 40Pcs | |
Gray butyl stoppers | Fisher | 0337522AA | Thermo Scientific National 20 mm Septa for Headspace Vials |
Pipette tips | VWR | 53511-682 | pipette tips 0.5-10 microliters |
Serum bottles | Sigma-Aldrich | 33110-U | Vials, crimp top, serum bottle, size 100 mL, clear glass, outer diameter x height 51.7 mm x 94.5 mm. For these experiments, the bottom of the serum bottle should be cut off. |
Sodium hydroxide | Sigma-Aldrich | S5881 | reagent grade, ≥98%, pellets (anhydrous) |
Sodium sulfide nonahydrate | Fisher | S425212 | Sodium Sulfide Nonahydrate (Crystalline/Certified ACS). Store at -20 °C. Only open in a glove box or fume hood. Releases toxic H2S gas; all sulfide-containing solutions must be kept in a glove box or fume hood. |
syringe heater | Syringepump.com | HEATER-KIT-5SP | Clamp gear hose clamps around heating blanket |
Syringe needles (16 gauge) | Fisher | 14-826-18B | BD General Use and PrecisionGlide Hypodermic Needles, 16 G x 1.5 in. (38 mm) |
Syringe Pump | Syringepump.com | NE-4000 | Dual or multiple channel, depending on desired number of simultaneous experiments |
Syringes (10 mL) | Fisher | 14-823-16E | BD Syringe with Luer-Lok Tips (Without Needle) |
Tubing | Cole Parmer | EW-06407-71 | Tygon Lab Tubing, Non-DEHP, 1/16" internal diameter X 1/8" outer diameter |
Water Circulation Pump | Bayite | BYT-7A015 | May need two people to help prime pump |