가축의 초기 개국 여포에서 온수에 대한 생체 외 문화 전략

생식 수명 동안 난소에 존재하는 난소의 극히 일부만 성숙하고 배란 시 나팔관에서 방출되며, 수정되어 실행 가능한 배아^1로발전할 수 있다. 다른 한편으로는, 난소 내의 난모세포의 대부분은 atresia를 겪고 결코 배란되지 않습니다. 시험관 내 배아 생산(IVP) 기술은 난소^{예비2,,3의}착취를 증가시키려 고 시도했다. 지금까지 이러한 기술은 불임 보존, 가축 의 선택 프로그램 및 멸종 위기 종의 보존에 대한 개입을 허용했습니다. 그럼에도 불구 하 고, 대부분의 프로토콜 은 기본적으로 개소 난소 여포 내에서 성장 단계를 완료 한 난모 세포를 사용 하 여, 따라서 완전히 성장 된 난모 세포로 언급. IVP 기술이 널리 사용되는 가축에서는 완전히 자란 난모세포가 약 120 μm의 최종 직경에 도달하고 직경 2~8mm(중간 개미 여포)^1에이르는 여포로부터 채취된다. 여포에서 격리되면, 이러한 난모세포는 체외에서 성숙하고 수정됩니다. 그런 다음 zygotes는 배아세포 단계까지 배양되고 수령인 또는 냉동 보존으로 옮겨갑니다. 가축에서뿐만 아니라 다른 많은 종에서, IVP에 의해 제공 된 잠재력에도 불구하고, 소 당 생체 외 생산 배아의 수는 크게 지난 40 년 동안 개선되지 않았다. 이는 주어진 시간에 난소를 채우는 완전히 자란 난소의 수가 제한되어 있기 때문에 부분적으로 표준 IVP 기술^4,,5,,6을회수하고 복종할 수 있다.

초기 개미 여포 내에서 동봉된 난초, 즉 직경이 2mm 미만인 여포는 불임 보존 프로그램^7에서 사용할 수 있는 잠재적인 근원을 나타내며, 난소는 대략 중간 개미^8보다10배 더 이른 개량여제를 함유하고 있다. 그러나, 이러한 난모세포는 여전히 성장 단계에 있으며 아직 완전히 성장 한^{단계 9에}도달하지 않았습니다. 이와 같이, 그들은 여전히 전사 활성, 나중에 발달 단계에 저장됩니다 mRNA를 생산, 아직 자발적으로 재개하고 meiosis를 완료의 능력으로 난모를 부여하는 데 필요한 모든 분화 과정을 겪지 않은 나는 한 번 여포 구획에서 분리^10,,11. 따라서 표준 시험관 성숙(IVM) 프로토콜에 직접 제출할 수는 없지만 성장 단계를 완료하고 적절하게 차별화할 수 있는 추가 문화 기간이 필요합니다.

여포가 초기 개랑자에서 중간 개소 단계로 발전할 때 발생하는 완전히 자란 단계로의 전환은 난모세포 발달 중 중요한 단계 중 하나입니다. 가축에서, 몇몇 연구 결과는 시험관 외^{2,,,,12,13,14,,15,,16,17,,18,,19에서}이 사건을 재구성하는 것을 시도했습니다.^, 그러나 현재까지 신뢰할 수 있는 프로토콜이 개발되지 않았으며 제한된 성공만 보고되었습니다. 이전 연구에 따르면^20,이러한 성장 난모세포는 균일 한 인구를 구성. 전사활성 외에도, 그들의 크로마틴은 GV0^{2,21이라는}구성으로 발아 소포(GV)에²분산된다. 반대로, 중형 개포로부터 수득된 완전히 자란 난모세포의 인구는 이질적이며,^20을관찰할 수 있는 크로마틴 다짐(GV1, GV2 및 GV3)의 다양한 정도에 의해 미러되는 상태이다. 이들 중, 이전 데이터는 GV2 와 GV3 난모세포가 전반적으로 더 나은 품질과 더 높은 배아 발달 능력^{(20,,21,,22, 23,,,24)을}특징으로하는 것으로 나타났습니다.²³

위의 관찰부터 시작하여, 우리는 초기 개울 여포에서 적혈구 -oocyte 복합체 (COC)로 격리 된 난모 세포의 분화를 허용하는 5 일 간의 긴 배양 시스템을 설명합니다. 이러한 배양 전략은 실험실에서 10년 동안 진행된 연구에서 진화하여 이전에 개발된 시험관 내분비 배양(IVCO)^2,선조 시스템^{23,25 및}난소 배양 시 아연 보충제에 뿌리를 두고 있다. 여포 자극 호르몬(FSH)과 인포디스세라제-3(PDE3) 억제제의 조합으로, 적정성-난낭화^통신2를향상시킬 수 있고, 불시의 메이오틱 재개^2를방지하고, 난낭 성장^2를 지원하였다.