후메이트 오레스, DOC, 부식성 재료 및 Humic 물질 함유 상업용 제품의 Humic 및 풀빅 산의 정량화

1. 솔리드 샘플 준비 분석할 시료의 약 5g을 분쇄하여 모르타르와 유봉을 사용하여 분쇄된 시료의 100%가 미국 표준 체 메쉬 크기 제200호(즉, 74 μm)를 통과하여 분말이 잘 혼합되도록 합니다. 분말의 수분 함량을 중력적으로 결정합니다. 알루미늄 계량 보트의 무게와 질량 (Wwb)을 기록합니다. 약 2g의 샘플 파우더를 계량 보트로 옮기고 질량(Wws+wb)을 기록합니다. 102 °C에서 24 시간 동안 건조 오븐에 계량 보트를 놓습니다 (102 °C를 초과하지 않음). 24 시간 후, 오븐건조에서 계량 보트를 제거하고 적어도 1 시간 동안 냉각 건조기에 배치합니다. 계량 보트와 말린 샘플 파우더(Wds+wb)의 질량을 계량하고 기록합니다. 포뮬러 1.1을 사용하여 수분 함량을 결정합니다.고체 샘플 분말의 포뮬러 1.1 수분 함량% 수분 = (((Wws+wb-Wwb) – (Wds+wb – Wwb)) / (Wws+wb – Wwb)) * 100 * 100 2. 추출 절차 솔리드 샘플 체질 시료 분말(Wsamp)의 약 2.5g을 플라스틱 또는 알루미늄 계량 보트에 넣고 무게가 4개의 소수점으로 기록합니다. 샘플을 1L 졸업 실린더에 넣고 0.1 M NaOH(NaOH x L-1)로 실린더를 1L로 채웁니다. 마그네틱 스터드 바(예: 길이 5~7cm)를 추가하고 시료가 완전히 섞일 때까지 교반판에 빠르게 저어줍니다(예: 300 ~400rpm). 졸업한 실린더의 전체 내용을 1 L Erlenmeyer 플라스크로 옮기고, 플라스크의 헤드스페이스를 N2 가스로 대피시키고, 플라스크 개구부를 밀폐 된 덮개로 덮습니다. 에를렌마이어 플라스크를 교반판에 놓고 300 -400 rpm에서 16 – 18 h로 섞는다. 액체 샘플 액체 재료의 경우, 검사 액체가 균일하게 혼합되도록 흔들어 샘플을 철저히 혼합합니다. 용기 의 바닥에 떨어졌을 수 있는 잔여물이 철저히 혼합되어 있는지 확인하십시오. 1L 졸업 실린더에 4 개의 소수점 (WTL)에 무게가 있는 테스트 액체약 5 g을 추가합니다. 졸업한 실린더를 0.1 M NaOH로 채우고 최종 부피 1L로 채웁니다. 마그네틱 교반바(예: 길이 5~7cm)를 추가하고 시험 샘플이 완전히 혼합될 때까지 교반판에 빠르게 저어줍니다(예: 300-400rpm). 혼합물을 1 L Erlenmeyer 플라스크로 옮기고 N2 가스로 헤드스페이스를 대피시키고 플라스크 개구부를 밀폐 된 덮개로 덮습니다. 에를렌마이어 플라스크를 교반판에 놓고 300 -400 rpm에서 1시간 동안 섞는다.참고: 이 시점 이후에는 고체 및 액체 시료의 처리가 동일합니다. 3. 알칼리성 추출물에서 불용성 물질 제거 교반이 완료되면 교반판에서 플라스크를 제거하고, 혼합물을 적절한 원심분리튜브로 옮기고 전체 부피를 4,921 x g 에서 30분 동안 분리한다. 마그네틱 스터디 바가 들어 있는 깨끗한 1 L 에를렌마이어 플라스크에서 HA와 FA가 포함된 알칼리성 상체를 수집합니다. 용해성 물질을 폐기합니다. 유리 양모 또는 질적 2.5 μm 모공 크기 필터 용지를 통한 여과는 잔류 입자가 원심분리 후 침전되지 않는 경우에 권장됩니다. 4. FF에서 HA의 강수 및 분리 알칼리성 추출물을 교반플레이트에 300-400rpm으로 교반하는 동안, pH 프로브를 용액의 중간 부분에 삽입(수직으로) p ±H. pH 1의 pH에 도달하고 안정적으로 유지되면 플라스크에서 pH 프로브를 제거하고 교반 바를 회수하고 밀폐 된 덮개로 플라스크를 덮고 침전 된 HA가 플라스크의 바닥에 정착 할 때까지 플라스크가 앉게하십시오.참고: HA가 솔루션을 침전하고 중퇴하는 데 걸리는 시간은 샘플의 HA 의 소스 및 양에 따라 달라집니다. 일반적으로 HA가 완전히 침전되고 해결 방법을 중단하는 데 1-6h가 걸립니다. 1h에 대한 4921 x g 에서 추출 및 침전 HA를 원심 분리합니다. 원심 분리 후, 깨끗한 1 L 에를렌마이어에 상체 FF를 부어 밀폐 커버로 커버.참고: 침전된 HA를 포함하지 않고 FF를 해독할 수 있을 만큼 HA를 단단히 포장하기 위해서는 원심분리기 시간이 길어질 수 있다. 원심분리기 튜브를 100°C에서 24시간 동안 건조 오븐에 놓습니다. 건조 후, 건조 오븐에서 튜브를 제거하고 실온으로 냉각 건조기에 배치합니다. 냉각 후, 주걱으로 튜브의 측면과 바닥에서 긁어 튜브에서 잔류물을 정량적으로 옮기고, 타르 계량 보트로 옮기고, 질량(WEHA)을 기록한다. 이 잔류물은 “추출된 HA”입니다.참고: 50mL 이상의 원심분리기 튜브가 HA와 FF의 분리에 사용된 경우, 건조 공정을 위한 온도 내성 50mL 원심분리튜브로 침전된 HA를 전송하는 것이 편리하다. 또한, 동결 건조기를 사용할 수 있는 경우 침전된 HA는 동결 건조될 수 있다. HA가 플라스틱 튜브의 측면에 달라붙지 않고 폐기할 필요가 없기 때문에 동결 건조 상태에서 HA의 수집이 더 용이합니다. 5. 재 함량의 결정 참고: 말린 HA 및 FA 샘플의 재 함량을 결정하는 절차는 동일합니다. HA에 대한 표기법 사용 절차가 표시됩니다. 이전에 100°C에서 건조 오븐에서 건조한 후 실온으로 냉각시킨 청정, 미리 계량된 세라믹 접시(WCD)로 약 30 mg의 건조HA(WHA)를 전달한다. 가중 HA 및 접시(WHA+CD)의 결합 질량을 기록한 후, 600°C에서 2시간 동안 머플 오븐에서 HA를 연소시합니다.참고: 각 HA 샘플에 대해 3개의 복제를 처리해야 하며 순수 HA 계산에 사용되는 평균 재 함량이 처리되어야 합니다. 2 시간 후, 머플 오븐에서 접시와 내용기를 제거하고 식히기 위해 건조기에 배치합니다. 식으면 접시에 재(WASH+CD)를 계량하고 분수 1.2를 사용하여 재 비율(Ashrat)을 계산합니다.포뮬러 1.2 애쉬라트 = (WASH+CD – WCD) / (WHA+CD – WCD) 6. 정제 된 추출 HA의 비율의 결정 포뮬러 1.3을 사용하여 재 함량을 수정하여 순수 HA(WPHA)의 최종 질량을 결정합니다.포뮬러 1.3 WPHA = WEHA * (1- 아슈라트) 7. 원래 소스 샘플에서 순수 HA의 농도 (%) 결정 포뮬러 1.4 및 1.5를 사용하여 순수 HA의 농도를 결정합니다.포뮬러 1.4: 솔리드 샘플 = (WPHA/Wsamp) * 100 % 순수 HA포뮬러 1.5: 액체 샘플에서 % 순수 HA = (WPHA/ WTL) * 100 8. HFA 정화를 위한 칼럼 준비 폴리메틸메타크릴레이트 DAX-8 수지로 포장된 저압 크로마토그래피 컬럼을 준비합니다. 수지는 이전에 사용되지 않은 경우, 메탄올에 수지2h를 담근 다음 모든 메탄올이 제거 될 때까지 deionized H2O로 철저히 헹구십시오. 이 때 물에 떠 있는 작은 수지 입자를 제거합니다. 수지가 이전에 사용된 경우 섹션 10에 설명된 대로 다시 생성합니다. 일단 철저히 헹구면 수지 침대 지지대용 10 μm 프릿이 있는 5 x 25cm 유리 크로마토그래피 컬럼에 수지물을 붓습니다. 수지 침대를 입력하기 전에 FF의 혼합을 가능하게하기 위해 수지없는 용액을 위해 컬럼 위에 2.5 ~ 5cm를 둡니다. 기둥 위에 상단 조각을 맞추고 열 상단을 통해 Deionized H2O를 펌프하여 연동 펌프를 사용하여 DAX-8 수지 침대를 포장합니다. 9. HFA 의 격리 수지 침대가 포장되면, 열의 상단을 통해, 저압에서 연동 펌프를 사용하여 열에 FF를로드합니다. 35 ~ 40 mL /분의 유량을 사용합니다. 수지 침대를 사용하면 수지의 건조 및 추출물 의 채널링을 방지하기 위해 전체 로딩 및 헹구는 절차에 걸쳐 컬럼의 수지 상단이 용액으로 덮여 있는 것이 중요합니다. 풀빅 분획이 수지에 완전히 적재되면, 탈이온화된 물로 수지세척을 세척하고, 저압하에서 퍼실릭 펌프를 사용하여 컬럼의 상단을 통해 펌핑하여 비흡착 “수성 풀빅 분획”(HyFF)을 제거한다. 35 ~ 40 mL /분의 유량을 사용합니다. 분석에 사용되지 않는 한 HyFF 함유 유출물을 폐기하십시오. 기둥 유출물의 350nm에서 흡광도가 같을 때까지 탈이온화된 H2O로 컬럼을 세척하여 열을 세척하는 데 사용되는 H2O의 열과 동일하다(예: 0.015 흡광도 단위 이내). 분광측계를 0(즉, 빈) 0으로 사용하십시오. 연동 펌프를 사용하여 컬럼의 바닥을 통해 0.1 M NaOH를 펌핑하여 HFA를 백 용출으로 탈모한다. 35 ~ 40 mL /분의 유량을 사용합니다. 펌프 유출물을 캡처합니다(Na-fulvate는 깨끗한 크기의 용기(예: 2 L Erlenmeyer)에 담아보시합니다.참고: 대부분의 HFA 는 DAX-8 수지 침대의 맨 위에 속수합니다. 열 하단에서 0.1 M NaOH를 도입하여 탈약하면 FA를 완전히 탈취하는 데 필요한 0.1 M NaOH의 양을 최소화합니다. 모든 HFA는 기둥 유출물의 흡수제가 350 nm에서 0.1 M NaOH 의 흡수와 같을 때 디소베드되었습니다. 0.1 M NaOH를 분광성 공백으로 사용하십시오. 모든 FA가 캡처되도록 desorbed FA 솔루션의 흡광도를 확인하기 위해 가져온 유출물을 추가합니다. 10. 프로토네이션에 의한 HFA 드 애쉬 나-fulvate 용액을 반복적으로 중력 사료에 의해, 5 × 50cm 기둥에 포함된 강한 양이온 H+-교환 수지(재료 의 표)를 통과하고, 유리 프릿은 전기 전도성 미터로 측정된 대로 <120 μS/cm가 될 때까지 수지를 유지한다. 각 패스에 앞서 H+교환 수지는 섹션 11에 설명된 대로 보수공사가 필요합니다. 모든 FA가 최종 패스 후 수지에서 제거되도록 하기 위해, 350nm에서 유출물의 흡수도가 동일할 때까지 탈이온화된 물로 수지(예: 0.015 흡광도 단위) 열을 세척하는 데 사용되는 탈온화된 물로 씻어낸다. 분산된 H2O를 분광성 공백으로 사용합니다. 정제된 FA 용액에 흡광도를 확인하기 위해 세척 및 유출물을 추가합니다. 모든 FA의 제거를 돕기 위해 수지 (예 : 긴 유리 또는 플라스틱 막대 사용)를 여러 번 교반 할 수 있습니다. 55°C에서 회전 증발기를 사용하여 약 15± 2mL의 부피로 FA를 농축한다. 15mL FA 농축액을 50mL 플라스틱 원심분리기 튜브로 완전히 옮기고 60±3°C에서 건조오븐에서 일정한 건조성으로 건조한다. 동결 건조는 오븐 건조의 대안입니다. 건조 후 냉각 건조기로 튜브를 전송합니다. 주걱으로 튜브 측면과 바닥을 긁어 튜브에서 FA를 제거하고 사전 타르 계량 용지에 수집 된 FA의 무게를 측정합니다. 이 자료는 “추출 된 FA”(WEFA)입니다. HA에 대해 6단계 아래에 설명된 바와 같이 추출된 FA의 재비율(ASHrat)을 결정하고 포뮬러 1.2를 사용하여 재 비율을 계산한다. 포뮬러 1.3을 사용하여 재(WPFA)없이 추출된 FA의 무게를 결정하고 WEHA 중량을 위해 WEFA를 대체합니다. 마지막으로 WPHA에 대한 포뮬러 1.4 대체 WPFA를 사용하여 샘플에서 % 순수 FA를 결정합니다. 11. DAX-8 수지 재생 유출물의 pH가 백류물의 pH와 같을 때까지 35~40mL/min의 유량으로 0.1M HCl(8.33mL 농축 HCl/1000 mL 최종 부피 H2O)을 펌핑하여 DAX-8 수지의 재생을 재생할 수 있습니다. 연동 펌프를 사용하여 재생 중에 DAX-8 컬럼을 통해 모든 시약을 펌핑합니다. 유출물의 pH가 유입물의 pH(즉, DI water)와 같을 때까지 기둥의 맨 위로 펌핑하여 DI 물로 컬럼을 헹구는다. 12. H+-양이온 교환 수지 재생 큰 비커(예: 4 L 플라스틱 비커)에 수지물을 부어 배치 공정에서 H+ 양이온 교환 수지를 재생하여 DI H2O로 수지를 덮어 여러 번 헹구고, 물을 혼합한 다음 붓습니다. 수지 1M HCl(83.3mL 농축 HCl/1000 mL 최종 볼륨 DI 워터)로 수지 커버. 가끔 교반 (예 : 30 분마다 한 번)으로 최소 2 h를 방치하십시오. 산에서 붓고 DI 물로 수지를 덮어 수지에서 여분의 산을 제거합니다. 15s의 교반 봉으로 힘차게 저은 다음 수지가 플라스크 바닥에 떨어지자 물을 부어 줍니다. 헹구물의 전기 전도도가 0.7 μS/cm≤ 될 때까지 공정을 반복하십시오. 재생된 재생된 회신을 열에 다시 로드합니다. 사용 사이에 수지가 젖어 있는지 확인하기 위해 deionized H2O로 덮으십시오.