Um ensaio planário de motilidade para medir as propriedades biomodulantes de produtos naturais

O protocolo descrito utiliza motilidade planária para fornecer um meio de avaliar os efeitos biomoduladores das substâncias naturais. Foi especificamente adaptado para determinar se essas substâncias funcionam como estimulantes, e se elas foram então associadas a um comportamento de retirada mensurável¹. Este ensaio, conhecido como teste de velocidade locomotor planária (pLmV), foi usado pela primeira vez para testar os conhecidos agentes farmacológicos^2,3. A aplicação deste ensaio planário baseado em motilidade tem crescido desde então em popularidade e tem sido adotada por diferentes laboratórios interessados em outras substâncias além dos produtos naturais^4,,5. Para este ensaio, um planário é colocado em uma placa de Petri contendo água de nascente ou água de nascente contendo um biomodulador dissolvido. Como o prato em si é colocado em papel gráfico, o número de linhas de grade cruzadas pelo animal com o tempo à medida que se move sobre o recipiente pode ser usado para determinar a taxa de movimento em cada condição. O teste claro/escuro, também chamado de teste de preferência de local condicionado (CPP), é outra variação sobre o tema do monitoramento da motilidade planária, e avalia a rapidez com que os animais respondem e migram para um ambiente escurecido^6,7. O rastreamento de vídeo dos movimentos planários também pode ser analisado usando programas de computador e rastreamento do Centro de Massa (COM)^8,,9,,10,,11.

Usar o planário como modelo animal para tais estudos oferece várias vantagens sobre outros animais, pois o experimentador pode facilmente controlar o ambiente de ensaio. Especificamente, passar fome aos planários antes da experimentação pode impedir sua exposição a outros agentes nutricionais ou farmacológicos que poderiam confundir os resultados, e o biomodulador específico sob investigação pode ser introduzido aos planários simplesmente adicionando-o diretamente à água da cultura, padronizando assim a exposição. Como os planários possuem um sistema nervoso e neurotransmissores que lembram animais de “alta ordem”, a fisiologia e as respostas experimentais desses animais a estímulos neuromusculares são consideradas biologicamente relevantes para outros organismos^{12,,13,,14,,15,16}. Além disso, como os planários são relativamente baratos e diretos de manter em laboratório, eles oferecem um modelo biológico acessível para muitos pesquisadores.

Como um animal experimental, os planários são adequados para uma ampla gama de estudos. Por exemplo, nosso grupo, assim como outros pesquisadores usam planários para estudar tumorigênese^17,,18,,19. Os planários também exibem uma série de comportamentos de resposta a estímulos químicos, térmicos, gravitacionais, elétricos, fotográficos e magnéticos que formaram a base de outros sistemas de ensaio. Alguns desses efeitos têm sido utilizados para estudar a aprendizagem e a memória nesses animais^{20,21,22,23,24,25,26,27}. O uso primário do modelo planário na literatura atualmente enfoque na atividade de células-tronco pluripotentes planárias, chamadas neoblastos, e seu papel na regeneração^28,,29,30. Assim, a adoção do modelo aqui descrito permite um estudo mais aprofundado usando outros ensaios baseados em planários para fornecer uma compreensão mais ampla de como produtos naturais e outros biomoduladores afetam o organismo.