هنا، نقدم بروتوكولات ل 1) نشر الأسير المختبري للفراشة الزرقاء ميامي المهددة بالانقراض اتحاديا(Cyclargus thomasi bethunebakeri)،و 2) تقييم المعلومات الأساسية تاريخ الحياة مثل وقت التنمية غير ناضجة وعدد من stadia اليرقال. ويمكن تكييف كلتا الطريقتين للاستخدام مع برامج الحفظ الأخرى خارج الموقع.
تحسين المعرفة من خارج الموقع أفضل الممارسات للفراشات المعرضة للخطر مهم لتوليد نتائج ناجحة برنامج الحفظ والاسترداد. كما يمكن للبحوث المتعلقة بهؤلاء السكان الأسيرين أن تسفر عن بيانات قيمة لمعالجة الثغرات الرئيسية في المعلومات المتعلقة بسلوك الفئات المستهدفة وتاريخ حياتها وإيكولوجياها. نحن نصف بروتوكول لنشر أسيرة من الانقراض الاتحادي ة Cyclargus thomasi bethunebakeri التي يمكن استخدامها كنموذج لبرامج أخرى الفراشة المعرضة للخطر خارج الموقع، وخاصة تلك الموجودة في Lycaenidae الأسرة. كما نقدم بروتوكولبسيط ومباشر لتسجيل مقاييس تاريخ الحياة المختلفة التي يمكن أن تكون مفيدة لإعلام منهجيات الموقع بالإضافة إلى تكييفها للدراسات المختبرية لـ lepidopteraالأخرى.
تشير قائمة متزايدة من الدراسات إلى انخفاضات عالمية واسعة النطاق وخطيرة في عدد الفراشات1،2،3،4،5. ويشمل ذلك الغالبية العظمى من الأنواع المعرضة للخطر. وغالباً ما تستخدم برامج الحفظ المصممة للتخفيف من حدة هذه الانخفاضات مزيجاً من الاستراتيجيات بما في ذلك رصد السكان، وإدارة الموائل وترميمها، والبحث العلمي، والانتشار الأسير، ونقل الكائنات الحية6. داخل الولايات المتحدة وأقاليمها وحدها، يتم إدراج ما مجموعه 30 فراشة تصنيفها بموجب قانون الأنواع المهددة بالانقراض (ESA) إما مهددة أو مهددة بالانقراض، مع 21 من هذه التي وافقت على مشاريع أو خطط الاسترداد النهائية. وبالنسبة لهذه الضريبة، يوصي أكثر من نصف استراتيجيات الاسترداد المحددة بالانتشار الأسير أو ينص على أنه ينبغي تقييم الانتشار الأسير7. وقد نما استخدام جهود الحفظ خارج الموقع للفراشات بشكل كبير في السنوات الأخيرة8،9، ولديه القدرة على أن يكون أداة حاسمة للمساعدة في جهود الإنعاش10. وتشارك العديد من المؤسسات والمنظمات والوكالات حاليا مع جهود خارج الموقع لما لا يقل عن 11 فراشة المدرجة في وكالة الإيسا taxa (أي Cyclargus thomasi bethunebakeri، Euphydryas edititha quino، Euphydryas editha taylori, Heraclides aristodemus, Hesperia dacotae, Lycaeides melissa samuelis, Oarisma poweshiek, Pyrgus ruralis lagunae, وSperyeria zerene hippolyta) والعديد من الضرائب الأخرى المعرضة للخطر (على سبيل المثال, Callophrys irus, Euphydryas phaeton, Spiria Eumaeus أتالا)11. وعلى الرغم من عدد الجهود القوية والناجحة، لا يزال هناك نقص في التواصل المنتظم عبر البرامج وبين ممارسي الحفاظ على البيئة بما في ذلك تبادل الأفكار والبيانات والمنهجيات الفعالة والنتائج. وهذا التبادل المعرفي ضروري لأنه يساعد على التقليل إلى أدنى حد من ازدواجية الجهود، ويحسن أفضل الممارسات عموما، ويعزز أثر الحفظ. وقليل ونُشر في بروتوكولات البدء في الرؤوس، أو تربية الأسر، أو تربية الماشية، أو تربية الفراشات، وهي متاحة بسهولة لضريبة الفراشة المعرضة للخطر، وتلك التي تفتقر في كثير من الأحيان إلى التفاصيل السردية الكافية و/أو الرسوم التوضيحية. هذه غالبا ما توفر في الغالب تفاصيل موجزة مع تعليمات خطوة بخطوة محدودة والصور المصاحبة، مما يجعل النسخ المتماثل تحديا أو تطبيق على الضرائب الأخرى من الصعب تقييم12،13،14،15. العديد من البروتوكولات المتاحة محدودة بطريقة ما: فهي موجودة فقط في الأدب الرمادي ، أو في مستويات متفاوتة من التفاصيل ، أو عمر النشر ، أو كأجزاء مكون في وقائع الندوة ، أو تقارير الوكالة / التمويل ، أو الأدلة الداخلية16،17،18،19،20،21،22،23،24.
بالنسبة لمعظم برامج الحفظ ، يتم الانتشار الأسير في المقام الأول لدعم نقل الحفظ ، والذي يشمل إعادة الإدخال والتعزيز (أي التعزيز) ، والمقدمة25،26. والغرض من هذه الأنشطة هو تنفيذها استراتيجيا ً كعنصر من عناصر استراتيجية الإنعاش الشاملة من أجل المساعدة على منع انقراض نوع أو نوع فرعي أو مجموعات مدرجة في القائمة. ومع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن هذا هو واحد من عدة أدوار محتملة أخرى قد تخدمها مثل هذه البرامج خارج الموقع. وقد تشمل هذه التدابير أيضاً الحفاظ على تأمين (أي ريفوجيا) للسكان، وإنقاذ مؤقت للكائنات الحية، ودعم البحوث و/أو التدريب المتصلة بالإنعاش، وتعزيز جهود التثقيف والتوعية المتصلة بالحفاظ على البيئة27و28. وبغض النظر عما إذا كان للبرامج خارج الموقع هدف واحد محدد أو مزيج من عدة أهداف، ينبغي للممارسين في مجال الحفظ أن يزيدوا إلى أقصى حد من فرص جمع البيانات من أجل سد الثغرات الرئيسية في المعلومات عندما يكون ذلك ممكناً. ويكتسي هذا الأمر أهمية خاصة لأن الغالبية العظمى من الفئات الخاضعة للخطر لم تُدرس عموماً دراسة سيئة قبل حدوث انخفاضات كبيرة في عدد السكان البرية. يمكن أن تساعد المعرفة المعززة الناتجة المكتسبة على مختلف الجوانب السلوكية أو الإيكولوجية أو تاريخ الحياة من التصنيف البؤري للمساعدة في النهوض بالحفاظ على الأنواع وإدارتها بشكل فعال29.
هنا ، ونحن نصف بالتفصيل بروتوكول نشر الأسير التي تم تطويرها لفراشة ميامي الزرقاء المهددة بالانقراض اتحاديا(Cyclargus thomasi bethunebakeri)(الشكل التكميلي 1) كجزء من برنامج أكبر للحفاظ على البيئة والاسترداد. في هذه الحالة، يخدم برنامج الانتشار الأسير ثلاثة أدوار محددة محددة: 1) مجموعة تأمين في حالة فقدان السكان البرية الحالية، 2) مجموعة بحثية مصممة لملء الفجوات المعرفية البيئية وتاريخ الحياة المحددة التي قد تساعد في إثراء الانتعاش و / أو الإدارة، و 3) لإنتاج كائنات قابلة للحياة لنقل الحفظ إلى مواقع ضمن النطاق التاريخي للتصنيف. وقد تم فحص البروتوكول الناتج عن ذلك وثبت بشكل جيد، بعد أن تم استخدامه وتحسينه لأكثر من عقد من الزمان. وبالتالي، نشعر أن التقنيات والمنهجيات الموصوفة تمثل نموذجًا قابلًا للتطبيق يمكن تطبيقه أو تكييفه بسهولة لبرامج الفراشة الأخرى المعرضة للخطر، ولا سيما تلك التي تنطوي على Lycaenidae أو الضريبة ذات الصلة. وفي حين أننا لا نقترح أن البروتوكول الموصوف أعلى من غيره، فإننا نرى أن هناك فرصاً لتطبيق بعض الأساليب على نطاق أوسع للمساعدة في تعزيز الإنتاجية أو الرعاية أو الكفاءة. هذا صحيح بشكل خاص حيث يتم الكثير من تربية لدينا في ظل ظروف مختبرية داخلية مع مساحة محدودة ، على غرار برامج الحفظ التي تنطوي على Euphydryas edititha taylori وSperyeria zerene hippolyta17،23. العديد من البروتوكولات الأخرى غالبا ما تستخدم مواد بوعاء لتربية اليرقات أو اليرقات، والتي يمكن أن تؤدي في بعض الأحيان إلى زيادة التعقيدات المتعلقة بمكافحة الحيوانات المفترسة، والسيطرة البيئية (أي الرطوبة، ودرجة الحرارة)، ورصد الماشية، وجمع البيانات، وقضايا الآفات النباتية، والفضاء على سبيل المثال لا الحصر21،22. وأخيراً، يحدد البروتوكول المعروض أساليب تربية الأسرى. العديد من برامج الحفاظ على الفراشة المعرضة للخطر الأخرى تنطوي على بدء أو تربية الأسير مع البروتوكولات التمثيلية التي تعكس تلك الاختلافات. في حين أن في كثير من الأحيان طفيفة، ونحن نرى أن هذا يساعد على توسيع مجموعة القائمة من المعلومات المتاحة لبرامج أخرى لمراجعة. وهذا أمر بالغ الأهمية، لأن معظم البرامج خارج الموقع تمثل جهودارائدة للمساعدة في تيسير استعادة التاكسي النادر الذي كثيرا ما يكون غير مدروس. يمكن أن تكون البروتوكولات المتاحة بمثابة نقطة انطلاق ممتازة للمساعدة في توفير رؤية قيمة ، والحد من ازدواجية الجهود ، وتعزيز الابتكار. بسبب “التنوع الواسع بين المجالات المتنوعة لسلوكيات الفراشة ، وسمات تاريخ الحياة ، والمتطلبات البيئية إلى جانب الاختلافات الملحوظة في كثير من الأحيان في مرافق البرنامج ، والميزانيات ، وخبرة الممارسين” وغيرها من الاختلافات المتأصلة ، فإن الاعتماد على منهجية واحدة ، حتى بالنسبة للتصنيف الوثيق الصلة ، غالبًا ما يكون محددًا وغير مبرر30. إن المرونة في تحسين أو تطوير بروتوكولات جديدة تتلاءم مع احتياجات فئات أو برامج محددة أمر ضروري للنجاح، ولذلك ينبغي التأكيد عليه. نحن بالإضافة إلى ذلك وصف التقنيات المختبرية لجمع المقاييس على تطوير الكائنات الحية في ظل ظروف أسيرة بما في ذلك عدد من instars اليرقات، ومدة مراحل التنمية الفردية، والوقت الكلي للتنمية، وطول اليرقات والجراء. هذه التقنيات لها قابلية تطبيق واسعة لدراسات تاريخ الحياة Lepidoptera التي يمكن استخدامها لصقل بروتوكولات الموقع أو إعلام البيانات الميدانية.
هنا، نوضح فعالية بروتوكول تربية الحفظ الثابت خارج الموقع للإنتاج الضخم للفراشات المعرضة للخطر، وكيف يمكن تكييفه للبحث العلمي للمساعدة في معالجة الفجوات السلوكية أو الحياتية أو الفجوات البيئية الرئيسية في البيانات. زيادة فهم متوسط إجمالي وقت التنمية (البيض إلى الكبار)، ومتوسط المدة في كل مرحلة من مراحل الحياة، ودرجة الحرارة المثلى للتزاوج، على سبيل المثال، استخدمت للمساعدة في صقل البروتوكول وتعزيز نجاح البرنامج العام. الغالبية العظمى من البروتوكولات القائمة تفاصيل أساليب تربية الكائنات الحية فقط ولا تناقش جمع البيانات، والبحث العلمي، أو استخدام مثل هذه النتائج للمساعدة في إعلام ويحتمل تكييف الأساليب خارج الموقع.
يتطلب هذا البروتوكول تربية الكائنات الحية اليومية. وتتحقق صحة الكائنات الحية وإنتاجيتها إلى أقصى حد من خلال ظروف التربية النظيفة، وعدم اكتظاظ الكائنات الحية، وتوافر مواد نباتية مضيفة عالية الجودة. بالنسبة للجزء الأكبر، ونحن نستخدم لوازم التربية المتاح والحاويات (على سبيل المثال، ورقة وأكواب بلاستيكية)، وعادة ما تحل محلها بانتظام، في كثير من الأحيان يوميا، وأبدا إعادة استخدام المواد. وهذا أمر فعال من حيث التكلفة ويقلل من الحاجة إلى المزيد من الصرف الصحي للمواد كثيفة العمالة. ومع ذلك ، فإن الأدوات الشائعة الاستخدام ، مثل الملقط الانتانية ، وفرش الطلاء بالألوان المائية ، وأقفاص الطيران المنبثقة الصغيرة ، وكذلك جميع أسطح التربية مثل أسطح الطاولة وقمم مقاعد البدلاء المختبرية يتم تعقيمها بانتظام باستخدام محلول التبييض بنسبة 5٪. يعتمد الجدول الزمني الدقيق للصرف الصحي بشكل كبير على تواتر الاستخدام ، وعلم الفينولوجيا الكائن الحي ، والمتغيرات الأخرى ، ويجب أن يكون مصممًا وفقًا للاحتياجات المحددة لكل برنامج خارج الموقع. بالإضافة إلى ذلك نجد أن ورقة الجزار الأبيض مفيد لتغطية جميع أسطح التربية. فهو يوفر ركيزة نظيفة غير مكلفة وسهلة النشر ، وتسهل لون الخلفية البيضاء رؤية أي كائنات حية ضالة. بالنسبة للتربية اليومية ، يجب على جميع موظفي المختبر دائمًا ارتداء قفازات الفحص المختبري التي يمكن التخلص منها لتقليل التلوث وحماية الموظفين من أي تهيج محتمل في الجلد ناتج عن مناولة النبات أو الكائن الحي. هذا أمر بالغ الأهمية بشكل خاص إذا كان أي من موظفي المختبر لديهم الحيوانات الأليفة المنزلية التي تتطلب علاجات البراغيث الموضعية. حتى كمية صغيرة من بقايا المكونات النشطة يمكن أن تكون خطرة على الماشية الأسيرة.
وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي الحرص على التقليل إلى أدنى حد من اكتظاظ الكائنات الحية. يمكن أن يؤدي اكتظاظ اليرقات بسرعة إلى انخفاض صحة الكائنات الحية وحتى أكل لحوم البشر في بعض التاكسي ، وخاصة Lycaenidae. قد يكون من الضروري فصل اليرقات بانتظام لتقليل الأعداد داخل حاويات التربية و / أو حتى عزل اليرقات الفردية كما هو موضح في جزء تاريخ الحياة من البروتوكول. وقد تختلف الأرقام المثالية لكل حاوية اختلافاً كبيراً استناداً إلى التصنيف الخاص ومختلف قيود البرامج خارج الموقع مثل الميزانية المتاحة، ومرافق المختبرات، والعدد الإجمالي لموظفي تربية الأطفال. وبالمثل نوصي بترك مساحة كافية بين الكؤوس التي تحتوي على يرقات لتقليل احتمال ية حركة الكائنات الحية بين الحاويات. وأخيرا، يوصى بشدة بفصل المخزون بين مرفق مختبري واحد أو أكثر بالنسبة للسكان السجناء الأكبر حجما. ويمكن أن تساعد استراتيجية الصون هذه على التقليل إلى أدنى حد من الخسائر الكارثية لجميع السكان بسبب الأمراض أو الآثار الأخرى غير المتوقعة.
إن جودة النباتات المضيفة لليرقات وتوافرها يدفعان الإنتاج الحيواني ويؤثران بقوة على كل من معدلات تنمية اليرقات وصحة السكان بشكل عام. ومع ذلك، فإن القليل من التقارير أو الدراسات المنشورة تسلط الضوء على هذا الشرط في الكواليس أو تناقش أفضل ممارسات الحضانة. يجب أن يُحسب التخطيط الناجح للبرنامج خارج الموقع كميات كافية من النباتات والإنتاج والصيانة. كما تتطلب العديد من اليرقات أيضا أو تفضل أجزاء نباتية معينة (على سبيل المثال، نمو جديد محطة، براعم الزهور والإزهار، الفاكهة، الخ)، التدريج الفعال لضمان الفينولوجيا النباتية المناسبة مطلوب.
وتشمل الاعتبارات الإضافية الإدارة الديمغرافية والجينية المناسبة، والتقليل إلى أدنى حد من أي آثار سلبية محتملة للأسر. نوصي بوضع خطة للإدارة الوراثية. وقد يشمل ذلك استراتيجيات تشمل ضخ مواد جينية جديدة على أساس منتظم، وتعظيم التنوع ومنع التزاوج الوثيق، وتقييم متغيرات اللياقة البدنية الرئيسية للكائنات الحية دوريا، ورصد علم الوراثة على مستوى ما للتمكين من المقارنة بين السكان الراهنين والتحقق من صحة المخزون الأسير. المقارنة الدورية لخصائص الأفراد الأسرى للأفراد من السكان المؤسسين لها ما يبررها أيضا34،35.
وتمثل هذه البروتوكولات أفضل الممارسات المثبتة. وينبغي أن تكون مفيدة لمجموعة متنوعة من الباحثين والممارسين الحفاظ على البيئة التي يمكن أن تطبق مباشرة أو تكييف أساليبنا لدراساتهم الخاصة والبيئة في الموقع في خطر الفراشة أو الحشرات وبرامج الانتعاش. ومن المرجح أن يكون بروتوكول التربية الأسير المحدد المحدد هو الأكثر انطباقاً على البرامج التي تركز على الليكاينيدا الأخرى، أو الفئات ذات الصلة، أو الفئات الأصغر حجماً. ومع ذلك، يمكن القول إن العديد من المكونات مثل تلك التي تنطوي على تأمين المغازلة الناجحة والجماع، وصيانة البالغين بالرحيق الاصطناعي، وتعظيم السرقة، والرعاية العامة لليرقات يمكن تطبيقها على نطاق أوسع أو تكييفها مع مجموعة أوسع من الtaxa. وكما ذُكر آنفاً، فبينما ينبغي التشديد على مرونة البروتوكول، فإن الوصول إلى منهجيات أخرى راسخة يمكن أن يساعد على توفير رؤية قيمة ونقطة انطلاق قابلة للتطبيق للتكيف والابتكار. يمكن القول إن الأساليب المعروضة لتقييم خصائص تاريخ الحياة المختلفة مثل وقت تطور اليرقات وعدد ملعب اليرقات لها انطباق واسع النطاق على برامج التربية الأخرى للحفاظ على البيئة والتصنيف في خطر. ونشجع الآخرين على المساعدة في معالجة الثغرات الرئيسية في البيانات الإيكولوجية عندما يكون ذلك ممكنا، ونشر البروتوكولات ونتائج البرامج التي تم فحصها.
The authors have nothing to disclose.
تم دعم هذا العمل من خلال منح من مبادرة استعادة الحفاظ على البيئة التابعة لدائرة الأسماك والحياة البرية الأميركية (F17AP00467) وصندوق ديزني للحفاظ على البيئة. وقدم متحف فلوريدا للتاريخ الطبيعي وقسم علم الحشرات وعلم النماة في جامعة فلوريدا دعما إضافيا.
12 oz plain white paper cups (Karat) | Lollicup | C-KC16 | |
15-Amp 2-Outlet Mechanical Residential Plug-in Countdown Lighting Timer | Lowes | UTTNI2423 | |
1ml sub-Q syringes (0.45 mm x 16 mm) | Fisher Scientific | 14-829-10F | |
2 oz clear plastic portion cup lids | Party City | #791091 | |
2 oz Clear Plastic Portion Cups | Party City | #791088 | |
34.29 cm x 34.29 cm x 60.96 cm collapsible mesh popup rearing cage | Bioquip | 1466BV | |
8.5" 1-Watt Incandescent Clamped Work Light | Lowes | PTC301L | |
Adoric Electronic Digital Caliper | Amazon.com | B07QX2SK2F | |
Big Kid's Choice Arts & Crafts Brush Set-12/Pkg, assorted sizes | Walmart | #10965135 | |
Clear Plastic Cup Tray | Frontier Scientific Services | AG_9040 | |
Fisher Scientific traceable memory monitoring thermometer | Fisher Scientific | 15-077-8D | |
Forceps, Straight Points, Swiss Style #4, Stainless | BioQuip | 4531 | |
Humco Glycerin 6 oz | Walmart | #303951037966 | |
Luminous Paint Kit, Blue, Red, Yellow, 4 Dram | Bioquip | 1166A | |
Melon flavored Gatorade Fierce Thirst Quencher or fruit punch flavored Gatorade Thirst Quencher sports drink | Walmart | #568456137 | |
Neoteck Digital 2 in 1 Hygrometer-Thermometer | Amazon.com | NTK026 | |
Olympus 0.6 ml Microtubes, Clear, Polypropylene, Nonsterile | Amazon.com | 24-272C | |
Plastic Tank Sprayer | Lowes | #5318 | |
Q-tips Cotton swabs | Walmart | #551398298 | |
Rectangular plastic tupperware container with lid (Rubbermaid) | Walmart | #554320171 | |
Showgard 903 Stamp Tongs, 4 5/8 inch Spade Tip | Amazon.com | #787793151378 | |
Single face corrugated paper roll | Amazon.com | BXSF12 | |
Snap blade utility knife | OLFA | #5023 | |
Solo 9 oz plastic cups | Solo | SQ950 | |
Thorton Plastics 50 dram clear plastic snap cap vial (6.25 oz.) | Thorton Plastics | #50 | |
Tulle Spool 9 inch x 150 feet – Black | Jo Ann Fabrics | #16029696 | |
Zep 32 oz Plastic Spray Bottle | Lowes | HDPRO36 |