ヒト羊膜の異なる解剖学的領域からの上皮細胞のインビトロ培養

ヒト羊膜上皮細胞(HAEC)は、胚発生の初期段階で、約8日後の受精で生じる。それらは、羊^膜1の最も内側の層から派生するエピブラストの扁平上皮細胞の集団から生じる。従って、HAECは、^胚2の3つの生殖層に分化する可能性を有するエピブラスト由来の多能性細胞の残骸と考えられる。過去10年間に、多様な研究グループは、これらの細胞を妊娠期の羊膜から分離し、インビ^トロ3、4の培養モデルにおける推定多能性関連特性を特徴付ける方法を開発した。

従って、表面抗原SSEA-3、SSEA-4、TRA 1-60、TRA 1-81などのヒト多能性幹細胞(HPSC)のHAEC特徴特性が判明した。多能性転写因子OCT4、SOX2、およびNANOGのコア;増殖マーカーKI67は、それらが自己更新していることを示唆する5、6、7。さらに、これらの細胞は、3つの生殖層(外胚葉、中胚葉、内胚葉)^の系統特異的マーカーに対して陽性の細胞を得るために分化プロトコルを用いて挑戦^{されてきた4、5、8、}ならびにヒト疾患の動物モデルにおいて。最後に、HAECエクスプレスE-カドヘリンは、HPSC^5、9と同様に上皮的な性質を保持していることを実証します。

胚起源とは別に、HAECは、抗炎症分子および抗菌分子10、11、成長因子およびサイトカイン^放出12の分泌、HPSC2とは対照的に免疫不全マウスに移植された場合の奇形腫の形成、および免疫学的耐性など、異なる臨床用途に適した他の本質的特性を有する。移植¹³.

しかし、これまでの報告では、ヒト羊膜は同種の膜であると仮定しており、解剖学的および生理学的に3つの領域に分けられることを考慮せずに:胎盤(デシドゥア基底を覆う羊膜)、臍帯(臍帯を包む部分)、および反射(膜の残りの部分は胎盤に付着^{していない)14。}羊膜の胎盤および反射領域は、形態、ミトコンドリア活性、活性酸素^種15の検出、miRNA^発現16、およびシグナル伝達^経路17の活性化における変化を示すことを示している。これらの結果は、ヒト羊膜が異なる機能を有する異種集団によって統合され、その結果またはインビトロモデルのいずれかで行われるさらなる研究のために考慮されるべきであることを示唆している。他の研究室は、膜全体からHAECを分離するためのプロトコルを設計していますが、我々の研究室は、異なる解剖学的領域から細胞を分離、培養、および特徴付けるプロトコルを確立しました。