Мы описываем расширенный протокол кондиционирования страха, который производит перетренированность и инкубацию страха у крыс. Этот протокол предполагает одну тренировку с 25 тон-шок пар (т.е. перетренированность) и сравнение условных ответов замораживания во время контекста и биток испытаний 48 ч (краткосрочные) и 6 недель (долгосрочный) после обучения.
Эмоциональная память была в первую очередь изучены со страхом кондиционирования парадигм. Страх кондиционирования является одной из форм обучения, с помощью которого люди узнают отношения между aversive событий и в противном случае нейтральные стимулы. Наиболее широко используемые процедуры для изучения эмоциональных воспоминаний влечет за собой страх кондиционирования у крыс. В этих задачах, безусловный стимул (США) является footshock представлен один или несколько раз в течение одного или нескольких сессий, и условный ответ (CR) является замораживание. В версии этих процедур, называется cued страх кондиционирования, тон (условный стимул, CS) в паре с footshocks (США) во время фазы обучения. Во время первого испытания животные подвергаются воздействию того же контекста, в котором проходила тренировка, и ответы на замораживание проверяются при отсутствии footshocks и тонов (т.е. контекстного теста). Во время второго теста, замораживание измеряется, когда контекст изменяется (например, путем манипулирования запахом и стенками экспериментальной камеры) и тон представлен в отсутствие footshocks (т.е. тест кия). Большинство процедур кондиционирования страха cued подразумевали немногие спаривания тон-шок (например, 1-3 испытания в одной сессии). Растет интерес к менее распространенным версиям, включающим большое количество сопряжений (т.е. перетренированность), связанных с длительным эффектом, называемым инкубацией страха (т.е. реакции страха увеличиваются с течением времени без дальнейшего воздействия на аверсивные события или условные стимулы). Расширенные задачи по кондиционированию страха были ключом к пониманию поведенческих и нейробиологических аспектов инкубации страха, включая его связь с другими психологическими явлениями (например, посттравматическое стрессовое расстройство). Здесь мы описываем расширенный протокол кондиционирования страха, который производит перетренированность и инкубацию страха у крыс. Этот протокол предполагает одну тренировку с 25 тон-шок пар (т.е. перетренированность) и сравнение условных ответов замораживания во время контекста и биток испытаний 48 ч (краткосрочные) и 6 недель (долгосрочный) после обучения.
Память – это психологический процесс, охватывающий различные этапы: сбор информации, консолидация (позволяет стабильность приобретенной информации) и поиск (доказательства процесса консолидации)1. На этапе консолидации происходит создание новых синаптических соединений и модификация уже существующих соединений. Это говорит о необходимости в течение периода времени, в течение которого молекулярные и физиологические события, ответственные за эти изменения происходят1,2. Эти физиологические или молекулярные изменения варьируются в зависимости от того, эмоционально ли полученные события заряжены или нет (т.е. эмоциональная память). Например, исследования показали, что боковое ядро и басотеральная миндалина комплекса особенно актуальны для эмоциональной памяти3,,4,5.
Эмоциональное явление памяти были в первую очередь изучены со страхом кондиционированияпарадигмы 5,6. Страх кондиционирования является одной из форм обучения, с помощью которого люди узнают отношения между aversive событий и иным нейтральным стимулов7. Парадигмы кондиционирования страха производят молекулярные, клеточные и структурные изменения в миндалине. Кроме того, кондиционирование страха изменяет связь гиппокампа во время консолидации и поиска процессов эмоциональной памяти.
Одной из наиболее часто используемых процедур для изучения воспоминаний страха является классическая (Павловская) кондиционирование у крыс. Эта процедура обычно использует footshock (США) в качестве aversive стимул, который поставляется один или несколько раз в течение одного или нескольких сессий. Условный ответ (CR) крыс, подвергшихся воздействию этой процедуры является замораживание (т.е. “обобщенная неподвижность, вызванная обобщенной тонизирующей реакцией скелетной мускулатуры животных, за исключением тех мышц, которые используются в дыхании”7 ). Этот ответ можно оценить по двум типам тестов: тесты контекста и сигнала. Для контекстного теста, предмет проходит определенное количество footshocks во время тренировки, а затем удаляется из экспериментальной камеры в течение определенного времени. Во время проверки предмет возвращается в тот же контекст, в котором проводилась подготовка, и различные меры замораживания собираются в отсутствие footshocks (например, продолжительность, процент или частота эпизодов замораживания), и по сравнению с базовыми уровнями, установленными на этапе обучения. Для второго типа теста, тест на биток, стимул (обычно тон) в паре с footshocks во время фазы обучения (т.е., условный стимул, CS). После завершения обучения животное удаляется из тренировочного контекста на определенное время и впоследствии помещается в измененный контекст (например, другая экспериментальная камера, которая имеет различные формы стен и разный запах). Затем сигнал представляется определенное количество раз, и замораживание ответы на кий измеряются и по сравнению с базовыми уровнями, собранными во время обучения. Наиболее распространенная версия этой парадигмы использует от 1 до 3 тон-шок пар во время одной тренировки, а затем контекст и биток тесты, проведенные несколько часов или несколько дней спустя.
Другие менее часто осуществляемые процедуры кондиционирования страха включают в себя большое количество ударных кий пар (т.е. испытаний), которые часто называются процедуры перетренированности8. Растущий интерес к этим задачам связан с их длительными и повышенными эффектами памяти, называемыми инкубацией страха (т.е. обусловленные реакции страха увеличиваются с течением времени в отсутствие дальнейшего воздействия на побочные события или условные стимулы)9,,10,11. Пример таких процедур перетренированности влечет за собой учебный этап из 100 тоном-шоковых пар, распределенных по 10 сессиям, за которыми следуют тесты контекста и сигнала, проведенные 48 ч и 30 дней спустя11,12. Чтобы избежать обширной подготовки распространяется в течение нескольких дней, Марен (1998) сообщил, что перетренированность может быть создана и оптимизирована в одну сессию с 25 пар8. Эффект инкубации проявляется в значительно более высоких уровнях кондиционированного страха у крыс, проверенных через 31 день после тренировки, по сравнению с крысами, тестируемыми 48 ч после. Расширенные задачи по кондиционированию страха были ключевыми для понимания поведенческих и нейробиологических аспектов, лежащих в основе инкубации страха, включая его связь с другими психологическими явлениями (например, задержкой начала посттравматического стрессового расстройства)11,12,13.
Здесь мы описываем расширенный протокол кондиционирования страха, который вызывает перетренированность и инкубацию страха у крыс. В отличие от других парадигм, которые требуют нескольких дней обучения11, текущий протокол ориентирован на одну тренировку8. Мы использовали 25 тон-шок пар для получения более высоких обусловленных замораживания ответов во время контекста и биток испытаний, проведенных через 6 недель после тренировки, по сравнению с тестами, проведенными 48 ч после.
Нынешний расширенный протокол кондиционирования страха является эффективным и действенным подходом для оценки эмоциональной памяти в короткие (48 ч) и долгосрочные периоды (6 недель). Таким образом, протокол позволяет изучать перетренированность и страх инкубационных явлений у крыс. С?…
The authors have nothing to disclose.
Финансовую поддержку этому исследованию оказал Фонд университета Конрад Лоренц – грант No 9IN15151. Авторы хотели бы поблагодарить отдел коммуникаций Университета Конрада Лоренца за помощь в записи и редактировании видео, в частности, Наталью Риверу и Андреса Серрано (продюсеры). Кроме того, Николь Пфаллер-Садовский и Люсия Медина за свои комментарии по рукописи, и Johanna Барреро, декан Corporacion Universitaria Iberoamericana, для институционального сотрудничества. У авторов нет конфликта интересов.
Acetic acid (ethanoic acid) | https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/acetic_acid | ||
Aversive Stimulation Current Package | MED Associates Inc | ENV-420 | https://www.med-associates.com/product/aversive-stimulation-current-test-package/ |
Contextual test protocol.pro | https://osf.io/4nkfq/?view_only=0640852a88544b239549462f9c21175b. | ||
Cue test protocol.pro | https://osf.io/4nkfq/?view_only=0640852a88544b239549462f9c21175b. | ||
Curved Wall Insert | MED Associates Inc | VFC-008-CWI | https://www.med-associates.com/product/curved-wall-insert/ |
Data processing.zip | https://osf.io/4nkfq/?view_only=0640852a88544b239549462f9c21175b. | ||
NIR/White Light Control Box | MED Associates Inc | NIR-100 | |
Pellets | BioServ | F0165 | http://www.bio-serv.com/pdf/F0165.pdf |
Quick Change Floor/Pan Unit for Mouse | MED Associates Inc | ENV-005FPU-M | https://www.med-associates.com/product/quick-change-floorpan-unit-for-mouse/ |
Small Tabletop Cabinet and Power Supply | MED Associates Inc | SG-6080D | https://www.med-associates.com/product/small-tabletop-cabinet-and-power-supply-120v-60-hz/ |
Standalone Aversive Stimulator/Scrambler (115 V / 60 Hz) | MED Associates Inc | ENV-414S | https://www.med-associates.com/product/standalone-aversive-stimulatorscrambler-115-v-ac-60-hz/ |
Standard Fear Conditioning Chamber | MED Associates Inc | VFC-008 | https://www.med-associates.com/product/standard-fear-conditioning-chamber/ |
Training protocol VFC.pro | https://osf.io/4nkfq/?view_only=0640852a88544b239549462f9c21175b. | ||
Video Fear Conditioning Package for Rat | MED Associates Inc | MED-VFC-SCT-R | https://www.med-associates.com/product/nir-video-fear-conditioning-system-for-rat/ |