Apresentado aqui é um protocolo para determinar o número de tripes e predadores de insetos piratas minutos em culturas sobre várias datas em experimentos de campo. Também ilustrado é como determinar a eficácia das táticas de gestão contra tripes e avaliar os benefícios da predação por bugs piratas minutos.
Os Thrips ocidentais da flor, occidentalis de Frankliniella (pergande), são uma praga polífagos que seja espalhada no mundo inteiro. O uso extensivo de inseticidas em tentativas de controle de suas populações elimina inimigos naturais e espécies de tripes de flores concorrentes, aumentando assim suas populações. Uma situação insustentável se desenvolve com populações de pragas resistentes concomitantes, surtos de pragas secundárias e degradação ambiental. A gestão integrada de pragas utiliza o conhecimento de pragas e relacionamentos inimigos naturais para implementar táticas que são ambientalmente amigáveis e sustentáveis. Bugs piratas minutos são os mais importantes predadores mundiais de tripes. Eles podem suprimir e, finalmente, controlar as espécies de Frankliniella flor tripes. Amostras de flores colhidas pelo menos semanalmente são necessárias para compreender a dinâmica predador-presa. Mostrado aqui é a amostragem das flores de vegetais frutíferos e plantas acompanhante para estimar as densidades de tripes individuais e espécies de insetos piratas minutos. Dados representativos ilustra como o protocolo é usado para determinar a eficácia das táticas de gestão ao longo do tempo e como avaliar os benefícios da predação por bugs piratas minutos. O protocolo de amostragem é igualmente adaptável à amostragem de tripes e insetos piratas minutos em outras espécies de plantas hospedeiras.
A flor ocidental tripes, Frankliniella occidentalis (pergande), foi uma das primeiras grandes pragas que foi espalhado em todo o mundo como resultado do globalismo e do comércio internacional de produtos agrícolas. Os danos econômicos resultam diretamente da alimentação e da oviposição e indiretamente através da transmissão de vírus patogénicos da planta. As populações invasivas já eram largamente resistentes à maioria das classes de inseticidas, e as tentativas de controlar as populações com inseticidas aumentaram apenas o dano eliminando importantes inimigos naturais e espécies concorrentes. Essa abordagem de controle desestabilizou os programas de manejo e resultou em populações de pragas resistentes, surtos de pragas secundárias e degradação ambiental1.
Programas integrados de gestão de pragas foram desenvolvidos a partir do conhecimento de pragas e relacionamentos inimigos naturais e os efeitos das táticas de gestão sobre essas relações. As características da população da colonização e do crescimento rápidos foram acreditadas por muito tempo para outstrip as capacidades de inimigos naturais para regular os Thrips ocidentais oportunistas da flor; Isto é, até que se mostrou que a predação de populações naturais de Orius insidiosus (Say) não só resultou na supressão de populações de tripes de flores ocidentais, mas também um declínio das populações em direção à extinção2. Além disso, os tripes ocidentais da flor são na maior parte flor-habitar, em que compete para o pólen e outros recursos da flor com os tripes polífagos nativos da flor.
Na maior parte do leste dos Estados Unidos, o principal concorrente nativo é Frankliniella tritici (Fitch), enquanto no sul da Flórida a principal espécie concorrente é Frankliniella bispinosa (Morgan)3. Os tripes ocidentais da flor sofrem a resistência biótica forte em Florida das espécies nativas dos predadores e das espécies do tripes da flor do concorrente; no entanto, é a espécie dominante em habitats perturbados por inseticidas e outras táticas que excluem tripes concorrentes e inimigos naturais. Portanto, um componente central de programas de manejo integrado de pragas bem sucedidos para a frutificação vegetal é o aumento da predação e da concorrência3,4. Estes programas foram desenvolvidos a partir do conhecimento da dinâmica predador-presa e da eficácia de várias táticas para gerenciar tripes e aumentar a resistência biótica. Aqui, a metodologia usada para estimar as densidades de tripes individuais e espécies de insetos piratas minutos nas flores de vegetais frutíferos e plantas complementares na Flórida são mostradas. Os dados são utilizados para determinar a eficácia das táticas de gestão e avaliar os benefícios da predação por bugs piratas minutos.
Projetando o protocolo de amostragem de tripes de flores: informações de fundo
Quando os tripes da flor ocidental emergiram como uma praga importante na década de 19805, foi necessário desenvolver procedimentos para determinar com precisão, eficiência e precisão o número de espécies de tripes individuais em estudos de campo. Os procedimentos aqui descritos foram desenvolvidos a partir do conhecimento adquirido em inúmeros estudos realizados para compreender a biologia e o manejo de tripes de flores. Exemplos desses estudos incluem o trabalho de Funderburk et al.2, Hansen et al.6, Salguero Navas et al.7, Sutherland et al.8e Tyler-Julian et al.9. As concentrações de espécies de Frankliniella e insetos piratas minutos em flores é baseada em comportamentos e não um artefato de aplicações de inseticida ou de amostragem6. As estimativas das populações nas flores sobre outras partes da planta são geralmente suficientes para compreender a dinâmica local do predador e a rapina em um anfitrião da planta e em avaliar os benefícios de programas biológicos do controle baseados no predador às relações da rapina. No entanto, a metodologia desenvolvida para flores pode ser adaptada à amostragem de outras partes da planta. A unidade usual da amostra é uma ou mais flores. O número de amostras necessárias para atingir o nível de precisão desejado é uma função da densidade populacional e do número de flores na unidade amostral.
As espécies de Frankliniella tendem a ser uma distribuição agregada nas flores, e as populações são concentradas geralmente nas flores do dossel superior da planta7. Para a maioria de estudos, as flores são selecionadas aleatòria da metade superior da planta. As técnicas relativas para remover tripes das flores, incluindo a lavagem líquida, o dislodgement mecânico, ou a dessecação, são inexatas e imprecisas8. Por esta razão, uma contagem direta, a técnica de estimativa absoluta é usada. Tripes são pequenos organismos cerca de 2 mm em Iength, e a microscopia geralmente é necessária para determinar com precisão a espécie. As flores que constituem uma unidade de amostra são colocadas em um frasco de 70% de álcool. Uma vez coletadas as amostras, os frascos de cada parcela são devolvidos ao laboratório para extração dos tripes e insetos piratas minutos e determinação exata do sexo, das espécies e do estágio de cada um. Experimentos consistem em gráficos de campo replicados que são usados para avaliar a eficácia dos tratamentos para suprimir os tripes e os benefícios da predação por bugs piratas minutos. As amostras de flores são colhidas pelo menos semanalmente durante o período de floração do hospedeiro da planta. Os projetos experimentais do bloco completo randomizado são úteis na remoção das diferenças experimentais de erro em tripes e densidades de bug pirata minutos entre blocos. Os arranjos de tratamento de subparcelas são úteis para reduzir os efeitos interplot das táticas de manejo que afetam o movimento de tripes9.
Processamento e análise de amostras de flores: informações de fundo
Antes da década de 1990, as chaves para espécies de tripes foram desenvolvidas para uso por especialistas taxonômicos, que colocaram tripes para identificação em lâminas de microscópio usando um dos vários suportes de montagem. Pesquisadores estudando biologia e manejo de tripes não foram especialistas taxonômicos, e não houve envolvimento de especialistas taxonômicos nos estudos. Tipicamente, os tripes em amostras desses estudos foram aglomerados nos níveis de classificação do gênero, família, subordem ou ordem. Após a disseminação dos tripes da flor ocidental, houve 1) rápida proliferação de pesquisas sobre Biologia e manejo de tripes e 2) reconhecimento por pesquisadores pela necessidade de identificar espécies de tripes e desenvolver um sistema eficiente para o processamento de amostras.
Em estudos em meados da década de 1990 envolvendo a biologia populacional de tripes, os tripes adultos das amostras foram colocados em lâminas de microscópio e identificados para espécies por especialista taxonômico R. J. Beshear (por exemplo, Salguero Navas et al.7). As larvas foram identificadas apenas no gênero devido à falta de chaves de identificação larval disponíveis naquele momento. A montagem da corrediça era cara e laboriosa, e um sistema mais eficiente foi desenvolvido2. Em estudos subsequentes, os tripes nas amostras foram extraídos das flores em uma placa de Petri contendo 70% de álcool, e os machos e fêmeas na placa de Petri foram identificados para espécies estereoscopia. A maioria de nossa pesquisa envolve espécies de Frankliniella. Os adultos dessas espécies foram separados para espécies o estereoscópio, utilizando-se diferenças na sua chaetotaxia na superfície dorsal do pronotum, cabeça e antenas10,11,12.
Conhecimentos adicionais em taxonomia de tripes foram adquiridos para reconhecer e identificar outros gêneros de tripes e espécies nas amostras. Existem inúmeras espécies Orius em todo o mundo que são importantes predadores de tripes. Duas espécies, o. insidiosus e o. pumilio (Champion), são simpátricas em grande parte da Flórida13. Os adultos destas espécies são separados por características de cor do segmento sensilas basal, fémures da perna traseira, e necesse na asa. Espécies de tripes e gêneros diferem em sua biologia e comportamento; Portanto, os dados para cada um são normalmente analisados separadamente. Como as populações de tripes em flores têm um padrão agregado de distribuição, os dados precisam de transformação para estabilizar variâncias entre os tratamentos. Os meios de tratamento são comparados por meio da análise de variância, conforme apropriado para o experimento, e os dados são analisados para cada data individual e/ou para dados agrupados na data2,9. A análise dos efeitos em datas individuais é importante quando as diferenças de tratamento variam ao longo da data. A proporção do total de tripes (adultos e larvas) por bug pirata minuto (adultos e ninfas) é usado para avaliar a eficácia do controle biológico com bugs piratas minutos em estudos de campo da Flórida suprimindo populações de tripes em uma proporção de cerca de um predador para cada 180 tripes2,9.
Protocolos de amostragem com níveis desejados de precisão para estimar as densidades populacionais de tripes de flores foram desenvolvidos para as culturas da Flórida ao longo de mais de três décadas de pesquisa de campo. Os estudos foram conduzidos para compreender aspectos importantes da biologia dos tripes da flor que afetam estimativas da população. Por exemplo, estudos foram conduzidos para compreender os efeitos sobre as estimativas de hora do dia em que a amostragem16, local da amostra dentro do campo16, local da amostra em plantas individuais6,16, padrões de agregação em flores7, e cor da flor17. Esses fatores foram encontrados para influenciar as estimativas populacionais; assim, as decisões de onde, quando e como são criticamente importantes ao projetar o protocolo de amostragem em futuros estudos de pesquisa.
Minuto pirata bug adultos e ninfas são altamente anthophilous, e os agregados predador com sua presa de forma dependente de densidade, preferindo as mesmas flores também preferido pelo tripes17. Eles também exploram pistas de presas ou de plantas danificadas por presas na localização de tripes. Os adultos se movem rapidamente entre as flores, um comportamento que aumenta a sua capacidade de rastrear populações locais de tripes presas no espaço e no tempo18. Portanto, os protocolos de amostragem desenvolvidos para estimar populações de tripes devem ser usados em estudos futuros ao estimar populações de insetos piratas minutos. Bugs piratas minutos são predadores eficientes dos adultos e larvas de diferentes Frankliniella espécies flor tripes19. O número do predador em relação ao número de presas totais de tripes fornece a melhor estimativa da capacidade dos bugs piratas minutos para suprimir e controlar populações mistas de tripes nas flores. Isso deve ser considerado ao analisar os dados em estudos futuros.
Os adultos da espécie Frankliniella colonizam rapidamente as culturas hospedeiras, uma vez iniciada a floração, e o rápido crescimento populacional segue na ausência de mortalidade por inimigos naturais2,18,19. Em uma boa planta hospedeira tanto para predadores como para as presas de tripes como o girassol, os números de tripes são maiores logo após a iniciação das flores, seguidos por quedas nas populações como aumento de bugs piratas minutos (Figura 9). Populações de bugs piratas minutos permanecem, embora os tripes estão quase extintos. Para compreender plenamente esta relação dinâmica predador-presa, é necessário amostrando freqüentemente durante todo o período de floração da cultura. O mesmo é verdade quando se investiga a eficácia de outros tipos de táticas, como eles podem ser eficazes em algumas datas e não outros. Uma vez ou duas vezes por semana durante todo o período de floração foi empregada para avaliar os efeitos de múltiplas táticas no sistema push-pull investigação em Tyler-Julian et al.9,14.
Frankliniella é o segundo maior gênero da família Thripidae, e há uma grande quantidade de literatura descrevendo os estágios de vida adulta20. Um complexo de espécies habita flores que é específico para diferentes espécies de plantas hospedeiras e localizações geográficas. Conseqüentemente, a identificação do perito de espécimes slide-preparados de um subconjunto das amostragens iniciais é crítica. Em seguida, em qualquer hospedeiro de planta e localização geográfica, caracteres taxonômicos únicos para adultos de cada espécie podem ser escolhidos para que a espécie possa ser determinada em estudos futuros sem ir ao procedimento trabalhoso e dispendioso de colocar cada um no microscópio slides para visualização um microscópio composto. Eles simplesmente podem ser vistos e identificados um estereoscópio. (Em algumas situações incomuns, os caracteres morfológicos separando duas espécies são tão semelhantes que eles não podem ser separados o estereoscópio.) Os métodos descritos aqui para as espécies de tripes de flores comuns na maioria das culturas na Flórida devem ser adaptados e usados em outras localidades geográficas ao processar o grande número de amostras necessárias em estudos de campo para determinar a eficácia das táticas de manejo e avaliar os benefícios da predação por bugs piratas minutos.
The authors have nothing to disclose.
A sustentação foi fornecida por concessões do bloco da colheita da especialidade do departamento de Florida da agricultura e dos serviços de consumidor numera 01856 e 024049. Apoio adicional veio de acordos de cooperação entre o USDA-ARS e da Universidade da Flórida números 58-6618-2-096 e 58-6618-4-035. Agradecemos aos alunos, postdocs e colaboradores anteriores que contribuíram de muitas maneiras para nossa pesquisa para entender os fatores que afetam a dinâmica populacional de tripes de flores.
Alcohol | Any source | 70% ethanol or isopropyl | |
Centrifuge tube | Fisher Scientific Co. | 06-443-18 | Flat cap and trayed |
Forceps | Fisher Scientific Co. | 08-885 | Medium point |
Kaolin clay | Novasource | Surround WP | 95% kaolin |
Pasteur pipet | Fisher Scientific Co. | 13-678-6A | 5 ¾ inch disposable |
Petri dish | Fisher Scientific Co. | FB0875711A | With grid |
Probes/seekers | Fisher Scientific Co. | 08-995 | 6 inch bent end |
Scalpel | Fisher Scientific Co. | 14-840-00 | Excel international |
Stereomicroscope | Leica Microsystems | M Series | 40X and greater |
UV-reflective mulch | Intergro | Metalized |