Oral Nötrofillerin Değerlendirilmesinde Mürin Periodontitin Sağlam Ligatür Kaynaklı Modeli

Periodontal hastalık (PH) önemli konak morbidite ve ekonomik yük ile ilişkili bir osteolitik durumdur, hangi dişeti iltihabı ve etkilenen dentition için hem yumuşak doku eki ve osseous destek kaybı ile kendini gösterir^1,2,3,4. Bu süreç, oral mikrobiyota ve konak doğuştan gelen bağışıklık sistemi arasındaki etkileşimler tarafından yönetilir. Ayrıca diyabet, kardiyovasküler hastalık ve kanser^5,6,7,8dahil olmak üzere diğer sistemik inflamatuar hastalıkların alevlenme ile ilişkilidir. Tarihsel olarak, BU PD patogenezpors gibibelirli bakterilerin büyük miktarlarda bağımlı olduğu varsayımında 9^. Ancak, son kanıtlar PH mikrobiyal bileşeni diş biyofilm aracılık olduğunu göstermektedir. Biyofilm sağlıklı simbiyotik ve yıkıcı disbiyotik devletlerde var olabilir çok sayıda mikroorganizmaların organize, karmaşık bir topluluktur^10,11. Oral biyofilm normalde patojenik bakterilerin foci kurulmasını engelleyerek ev sahibine direnç sağlar ve konak bağışıklık yanıtı 12 düzenlenmesi ile ideal dişeti doku yapısı ve fonksiyonu teşvik^12,13. Oral kavite içinde kommensal organizmalar ve konak bağışıklık sistemi arasındaki dengesel ilişkinin perturbations doku homeostaz değişikliklere yol açabilir, dysbacteriosis ve PD damgasını klinik ve radyografik görünümlerin gelişimi ile sonuçlanan^{5,10,12,13,14}.

İlginçtir, oral disbacteriosis kurulması, PD başlatılması için gerekli iken, tüm bireylerde PH sürücü için yeterli değildir, simbiyotik ve disbiyotik durumlar arasında mikrobiyota geçiş bozmak için konak bağışıklık yanıtı yeteneğine doğru kaçan¹⁵. Bu pd doğuştan gelen bağışıklık sisteminin önde gelen karakterlerinden biri, yani polimorfonükleer granülosit (PMN) veya nötrofil, yerel ve sistemik bakış açılarından^16,17etkiler anlamına belirli bir spot yerleştirir .

İnsanlarda, PMN’ler sağlıklı periodontal bağ dokularında ~2 x 10⁶ hücre/h oranında dolaşımdan alınırlar, burada hakim lökosit popülasyonudur. Burada, daha sonra dişeti kreviküler sıvı bir bileşeni olarak ağız boşluğuna dişeti sulkus atılır. PH varlığında, nötrofili dolaşım ve ağız boşluğu içinde tezahür, Bu efektör hücreleri periodontium yukarıda belirtilen imha yol açan bir hiperinflamatuar fenotip sahip^{nerede 17,18,19,20,21,22}. Bu nedenle, PD ve diğer sistemik inflamatuar durumlarda PMN’lerin rolünü anlamak son derece önemlidir.

Kronik hastalıkların PH’ye karşılıklı olarak bağlı olduğu yaygın olarak kabul edilse de, altta yatan mekanizmalar henüz açıklığa kavuşturulamamıştır ve bu morbid ve potansiyel olarak ölümcül sistemik durumların yönetiminde zorluklara katkıda bulunmaktadır. Birden fazla deneysel hayvan modelleri, her biri benzersiz avantajları ve dezavantajları ile, PD^23,24patofizyolojisi çalışmak için kullanılmıştır. Özellikle murine modellerine odaklanan pd çalışmasının kolaylaştırıldığı çeşitli protokoller vardır; ancak, çeşitli teknik ve fizyolojik eksiklikleri sahip^25,26,27,28,^29,30,31.

İlk olarak, oral gavage fare modeli dişeti iltihabı ve kemik kaybı oluşturmak için insan periodontal patojenlerin çok sayıda oral aşılama gerektirir. Ayrıca, genellikle antibiyotik tedavisi bir süre önce murine commensal oral flora yıkmak için²⁵. Bu model genellikle güvenli bir şekilde oral gavaj gerçekleştirmek için özel eğitim gerektirir, daha karmaşık insan oral mikrobiyom periodontal patojenlerin sadece küçük bir kısmını kullanır, ve alveoler kemik kaybı kurmak için birkaç ay gerektirir.

Buna karşılık, kimyasal olarak indüklenen mürin modelleri trinitrobenzen sülfonik asit oral teslim kullanmak (TNBS) veya dekstran sülfat sodyum (DSS), ajanlar genellikle periodontal kemik kaybı neden birkaç aylık bir süre içinde kolit murine modelleri kurulmasında kullanılan²⁶. Dorsumun mürin ifilsorve dokularının yanı sıra kalvaryum içeren intraoral ve ekstraoral apse bazlı modeller mevcuttur. Eski apse modelinde, bakteri çeşitli enjeksiyonlar uygulanır, birden fazla dişeti apse ve alveoler kemik kaybı eksikliği oluşturarak, PH çalışmada kullanımını sınırlayan. İkinci apse modelleri önemli ölçüde daha bakteriyel virülans çalışmaya apt, inflamasyon, ve ağız boşluğu dışında sitelerde kemik rezorpsiyonu, periodontium ve oral mikrobiyom değerlendirme ortadan kaldırır^{27,28,29,30,31}.

Periodontitin ligatür kaynaklı modeli kullanılarak, örgülü ipek dikiş genellikle ikinci azı dişleri etrafında çevresel olarak yüklenmiştir. Alternatif olarak, dikiş malzemesinin tek bir doğrusal segmenti birinci ve ikinci azı dişleri arasına eklenebilir^32,33. Ligatür yerleşiminin amacı bakteri birikimini kolaylaştırmak ve dişeti sülfür içinde disbiyoz oluşturmak, periodontal doku iltihabı ve periodontium oluşturan dokuların imha ile sonuçlanan. En önemlisi, Bu model daha yaygın olarak kullanılan oral gavage modeli³⁴ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha alveoler kemik kaybı üretme yeteneğine sahiptir. Oral gavaj modelinin kullanımını daha da zorlaştıran şey, farelerin çeşitli suşlarının (c57BL/6) alveoler kemik kaybına karşı doğal direncidir. Bu aynı zamanda sorunludur, çünkü bu tür en sık kullanılan rürin bazlı hayvan^{araştırmalarında 35′}tir.

Marchesan ve ark. ve Abe ve Hajishengallis tarafından açıklanan mevcut prosedürler ligature^33,36yerleştirerek teknik hareket basitleştirmek için icat edilebildi. Ne yazık ki, eski protokol özel 3D baskılı ekipman gerektirir ve erken ligatür kaybı potansiyeline sahip, bu nedenle artan hayvan kullanımı ve ameliyathanede harcanan ek zaman ile ilgili maliyetler. Ayrıca, her iki protokol de bir çalışma için mevcut hastalıklı periodontium sadece küçük bölgeler oluşturur.

Bu teknikle yatan avantajlar, periodontium’u yöneten oral disbiyoz ve immünolojinin eşzamanlı çalışmasında, farklı genetik geçmişe sahip düşük maliyetli hayvanların kullanımı ve basit barınma ve hayvancılık uygulamalarında temellenmiştir. Bu nedenle, hedefler hastalıklı doku hacimlerini en üst düzeye çıkarmak ve hayvan araştırmalarında azaltma ilkelerini uygulama girişimlerinde, hayvan tüketimini mümkün olduğunca düşük bir seviyeye düşürmek olmalıdır. Bu, tüm hayvanların deneysel analizlere dahil edilme lerini sağlamayı gerektirir^37. Ancak, periodontal hastalığın hangi hayvan modeli kullanılırsa kullanılsın, insan PH patofizyolojisinin her unsurunu kapsayan tek bir model olmadığı unutulmamalıdır.

Bu yeni protokol, çoğu laboratuvarda bulunan enstrümantasyon ve malzemeler kullanılarak birden fazla maksiller azı dişinin etrafına bir bağ yerleştirilmelerini sağlar. Kolayca ve güvenle erken avulse olası olmayan bir ligatür yüklemek için yeterli miktarda zaman sağlar. Son olarak, PMN’ler PD’deki periodontium’un yok oluşunun koordinasyonu yla, oral nötrofilleri insanlara benzer bir şekilde kurtarmak için yeni bir metodoloji de sunulmuştur.