マウスの鎖骨下静脈穿刺による血液採取

この研究は、第 2 Xiangya 病院 (中国長沙市) からの動物研究のための中央南大学倫理委員会によって承認されました。その原稿は到着に応じて準備された (動物研究: 生体内実験の報告) ガイドライン12. 1. 素材と動物 必要な材料を準備:75% エタノール、粘着テープ、epilating 剤、2ml チューブ、1.0 は、針 (26G)、電子スケール、ヘパリンおよび生理食塩水に接続されたシリンジ (材料の表を参照してください)。 動物:10 昆明マウスを準備し、6-8 週齢、重さ 21.6 ~ 28.3 g (資料表参照)。実験動物13のケアおよび使用のためのガイドに従ってマウスを維持する。 2. 麻酔と動物のポジショニング 麻酔薬の必要な投与量を計算するために、マウスを計量します。 全身麻酔14を誘導するために腹腔内注射を通じて、ペントバルビタール (60 mg/kg) のナトリウムを注入する (図 1)。露出した目への損傷を防ぐためにプロシージャの開始で生殖不能の目の潤滑の軟膏を加えなさい。注: マウスは、ペダル離脱反射、尾ピンチ、または腹部の皮膚ピンチのテストに対してモータ応答を示さない場合に十分に麻酔されると考えられる。 マウスを仰向けの姿勢で操作テーブルに置き、静脈の穿刺を促進するためにテーブルの端から 2-4 cm 離れなさい (図 2)。図 2に示すように、四肢を快適な位置に固定します。挿管装置か機械換気は全体のプロシージャで必要とされない。 綿棒で infraclavicular スペースの周りに epilating 剤を塗布します。 3分後、湿った綿棒で epilating 剤を洗って、毛皮と目に見える汚れを取り除きます。 75% のエタノールで infraclavicular 空間を滅菌し、清潔なガーゼで乾燥させます。 3. 鎖骨下静脈穿刺と採血 指で鎖骨骨と優れた胸骨窩の位置を特定します。 鎖骨の真ん中に近い穿刺部位を見つけます。左の人差し指を穿刺部位に置き、皮膚および皮下組織を固定する (図 3)。 針を上方に移動し、優れた胸骨窩に向かって cranially ます。針が皮下組織に入ると、右手の薬指を後方に動かして陰圧を形成する (図 3)。注: このステップでは、オペレータの右手の位置は、針を水平面より上方に移動させるために、操作テーブルよりもわずかに低くする必要があります。動物がテーブルの端の近くに配置されている理由です。 シリンジを前方に 3-4 mm 移動しますが、シリンジに血液が流れない場合は停止します。その後、ゆっくりとシリンジを引き戻し、その中に負圧を保持します。ほとんどの場合、血液は、戻って描画するときにシリンジに入ります。 血液がシリンジに入ると、シリンジを固定し、必要な量 (200 μ l) の血液がシリンジに集められるまで、負の圧力を維持します。 採血後、穿刺針を取り出し、1-2 分間わずかに綿棒で穿刺部位を押して出血を止める。その後、マウスをケージに戻す。注: 時には、1つは彼/彼女の最初の試みで血液を得ることができませんでした。横方向に針を調整し、ステップ 3.3-3.5 を繰り返します。3回の試行で血液サンプルが得られない場合は、反対側に切り替えます。 血液サンプルをヘパリン処理チューブに移します。 4. マウスの回復 ペントバルビタール麻酔は有効ですが、マウスが再び動くまで熱サポートを提供することで、迅速な回復を実現します。